淡水藻保存液Ⅱ公司正在出售的產(chǎn)品：NSBP1/FITC 熒光標(biāo)記核小體結(jié)合蛋白1抗體IgG3-氧苯磺酰 96%
NSE/FITC 熒光標(biāo)記神經(jīng)元特異性烯化抗體IgG2-吡羧 98%
Ntn1/FITC 熒光標(biāo)記軸突導(dǎo)向因子1抗體IgG氨水 AR,25-28%
NT-3/FITC 熒光標(biāo)記神經(jīng)營養(yǎng)因子-3抗體IgG氨水 CP,25-28%
NT-4/NT-5 /FITC 熒光標(biāo)記神經(jīng)生長

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時(shí)內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

半裸法氏殼肝結(jié)合蛋白/陽離子抗菌蛋白37/天青殺抗體Human HPCAL4 ELISA Kit小鼠基質(zhì)金屬蛋白5(MMP-5)免疫試劑盒

香菇核突觸蛋白抗體Human HPDL ELISA Kit小鼠基質(zhì)金屬蛋白4(MMP-4)免疫試劑盒

美澳型核果褐腐病菌β-肌動(dòng)蛋白/β-Actin 抗體（內(nèi)參抗體）Human HPD ELISA Kit小鼠基質(zhì)金屬蛋白3(MMP-3)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌β淀粉樣肽1-42(C端)/β-Amyloid 1-42 (CT)抗體Human HPGD ELISA Kit小鼠基質(zhì)金屬蛋白2/明膠A(MMP-2/Gelatinase A)免疫試劑盒

球孢白僵菌β淀粉樣肽1-16/Aβ1-16抗體Human HPS1 ELISA Kit小鼠基質(zhì)金屬蛋白2/明膠A(MMP2/Gel A)抗體免疫試劑盒

冷湖黃桿菌β淀粉樣肽1-28/β-Amyloid 1-28抗體Human HPGDS ELISA Kit小鼠基質(zhì)金屬蛋白13(MMP-13)免疫試劑盒

金針菇激活受體2A抗體Human HPS3 ELISA Kit小鼠基質(zhì)金屬蛋白10(MMP-10)免疫試劑盒

蠟樣芽孢桿菌水通道蛋白5抗體Human HPS4 ELISA Kit小鼠基質(zhì)金屬蛋白1(MMP-1)免疫試劑盒

板栗蛇孢日規(guī)殼β淀粉樣肽（1-40）抗體Human HPS5 ELISA Kit小鼠基質(zhì)γ羧基谷蛋白(MGP)免疫試劑盒

高加索異常倚囊霉β淀粉樣肽（1-42）抗體Human HOXC4 ELISA Kit小鼠肌激同工MM(CK-MM)免疫試劑盒

外來毛霉橙色變種載脂蛋白A1抗體Human HOXC8 ELISA Kit小鼠肌激同工MB(CK-MB)免疫試劑盒

累四菲鏈霉菌β-抑制蛋白1抗體Human HOXD11 ELISA Kit小鼠肌激(CK)免疫試劑盒

鞘桿菌屬錨定蛋白B抗體Human HOXD12 ELISA Kit小鼠肌球蛋白重鏈(MHC)免疫試劑盒

三葉草根瘤菌銅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白質(zhì)α鏈抗體Human HOMEZ ELISA Kit小鼠肌球蛋白(MYS)免疫試劑盒

谷棒桿菌單克/抗體Human HOOK3 ELISA Kit小鼠肌紅蛋白(MYO/MB)免疫試劑盒

黃灰鏈霉菌ASMTL蛋白抗體Human HOXD13 ELISA Kit小鼠肌酐(Cr)免疫試劑盒

銅綠假單孢菌Pseudomonas│aeruginose 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR白介11試劑盒山羊豆堿

大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR白介10試劑盒藤子酚

黑曲霉Aspergillus│niger 質(zhì)量規(guī)格：>99.9%,AR白喉抗體試劑盒四氫黃連堿
淡水藻保存液Ⅱ糙皮側(cè)耳 3-溴-5-硝基吲唑脂肪氧化Elisa

炭疽芽胞桿 2-羥基煙酸甲酯脂肪Elisa

盤長孢狀盤孢 4-苯氧基苯甲纖維蛋白原γElisa

局限青霉 2,7-二溴-9,9-雙[3'-(N,N-二甲氨基)基] -芴葡萄糖神經(jīng)酰合成Elisa

擬青霉 4-甲氧基-6-甲基-2H-吡喃-2-酮神經(jīng)鞘磷脂Elisa

赭曲霉 間三氟磺酰酸性神經(jīng)酰Elisa

產(chǎn)油油脂酵母 4--3-三氟甲苯絲氨酸棕櫚酰轉(zhuǎn)移Elisa

蘇云金芽孢桿 3,4-二甲酯酸性神經(jīng)鞘磷脂Elisa

多根硬皮馬勃 6-(三氟甲基)尿嘧啶口蹄疫O型Elisa

果生鏈核盤 3-(五氟硫基)蛋白二硫化物異構(gòu)A3Elisa

釀酒酵母 9-氧雜-1-氮雜-蒽-10-酚抗肌蛋白Elisa

環(huán)圈鏈霉 N-叔丁氧羰基-D-高絲氨酸單鈉鹽Fission 1蛋白Elisa

灰樹花 (R)-2-氧代四-3-基氨酸叔丁酯循環(huán)復(fù)合物Elisa

嗜中溫居冰 Diclofensine 鹽酸鹽冷誘導(dǎo)RNA結(jié)合蛋白Elisa

枯草芽孢桿 2-氟-3-羥基酸甲酯精脒精乙酰轉(zhuǎn)移Elisa