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          kFluor555-EdU法細(xì)胞增殖檢測試劑盒(流式)

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          • 所在地 上海市

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          更新時間:2022-04-21 11:47:13瀏覽次數(shù):185

          聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10T|20T|50T
          貨號 GOY-01X9617 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
          主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
          kFluor555-EdU法細(xì)胞增殖檢測試劑盒(流式)公司*的產(chǎn)品:Collagen I Ⅰ型膠原抗體碳化鈦 99%,40nm
          Collagen II Ⅱ型膠原抗體碳化鈦 99.99% metals basis
          Collagen III 抗Ⅲ型膠原抗體無水三化鐵 ≥99.9% metals basis
          Collagen III 抗Ⅲ型膠原抗體無水三化鐵 AR,98%
          Collagen

          詳細(xì)介紹

          公司產(chǎn)品僅用于科研

          細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:

          細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:

          ①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;

          ②生物膜與細(xì)胞器的研究;

          ③細(xì)胞骨架體系的研究;

          ④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;

          ⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;

          ⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);

          ⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;

          ⑧細(xì)胞工程.

          產(chǎn)品屬性:

          中文名稱:kFluor555-EdU法細(xì)胞增殖檢測試劑盒(流式)

          英文名稱:

          產(chǎn)品規(guī)格:10T|20T|50T

          發(fā)貨周期:1~3天

          商品介紹:

          kFlour555 Click-iT EdU 流式檢測試劑盒,細(xì)胞增殖檢測是評估細(xì)胞健康程度、遺傳毒性及抗腫瘤藥物效果的基礎(chǔ)實驗手段。精確的檢測細(xì)胞增殖方法是BrdU法。EdU法檢測試劑盒是brdu方法的革命性突破。EdU(5-溴-2-脫氧尿嘧啶)試劑盒是一種嘧啶類似物,可以在DNA合成期整合入DNA雙鏈。EdU法檢測是基于“點擊"反應(yīng),一種由銅催化的疊氮化合物和炔烴的原子共價反應(yīng)。本試劑盒中,EdU試劑含有炔烴,而kFlour555染料試劑含有疊氮化合物。點擊法的EdU標(biāo)記增殖快速有效,易于使用。只需少量的疊氮化染料即可非常有效地標(biāo)記出整合的EdU。標(biāo)準(zhǔn)化的固定和去污劑促滲可以使檢測試劑進(jìn)入細(xì)胞,而brdu方法則需要DNA變性(如酸變性、熱變性或者用Dnase消化)去暴露BrdU,從而方便BrdU抗體結(jié)合。

          實驗報告:

          一、分離與培養(yǎng):

          1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>

          2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

          3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

          4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

          5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

          二、免疫熒光鑒定:

          1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

          2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

          3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

          4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

          5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

          6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

          操作規(guī)程

          1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

          2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

          3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

          4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

          5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

          6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

          7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

          8、結(jié)果分析

          a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100

          b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

          無孢蛋白(ASPN)英文名稱:ASPN ELISA Kit色c氧化1抗體包裝25ml

          吻受體(KISS1R)英文名稱:KISS1R ELISA Kit表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白4抗體包裝5ml

          1(KISS1)英文名稱:KISS1 ELISA Kit表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白6抗體包裝1g

          胃泌抑制肽(GIP)英文名稱:GIP ELISA Kit表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白8抗體包裝5g

          胃泌(GT)英文名稱:GT ELISA Kit硫軟骨抗體包裝100g

          胃蛋白原C(PGC)英文名稱:PGC ELISA Kit上皮類癌相關(guān)抗原抗體包裝25g

          胃蛋白原A(PGA)英文名稱:PGA ELISA Kit磷化蛋白磷激PKC/CPI-17抗體包裝5g

          味覺受體1型成員2(TAS1R2)英文名稱:TAS1R2 ELISA Kit著絲粒蛋白K包裝100g

          尾加壓2受體(UTS2R)英文名稱:UTS2R ELISA Kit腫瘤/抗原1B包裝25g

          維生D受體(VDR)英文名稱:VDR ELISA Kit轉(zhuǎn)鐵蛋白受體抗體包裝5g

          維生D結(jié)合蛋白(DBP)英文名稱:DBP ELISA Kit8號染色體開放閱讀框K29抗體包裝1g

          維生B9(VB9)英文名稱:VB9 ELISA Kit色P450 3A4抗體包裝250mg

          X受體α(RXRα)英文名稱:RXRα ELISA Kit色CYP2D1抗體包裝5g

          圍脂滴蛋白4(PLIN4)英文名稱:PLIN4 ELISA KitCD33抗體包裝1g

          微粒體谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移1(MGST1)英文名稱:MGST1 ELISA Kit視網(wǎng)膜母瘤結(jié)合蛋白8抗體包裝5g

          彼爾姆短桿菌Brevibacterium│permense 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品組織蛋白G試劑盒風(fēng)疹病IgG抗體參考品

          銀耳Tremella│fuciformis 質(zhì)量規(guī)格:含量≥98.0%組織蛋白D試劑盒風(fēng)疹病IgM抗體參考品

          筑波鏈霉菌Streptomyces│tsukubaensis 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥97.0%,標(biāo)準(zhǔn)品組織蛋白C試劑盒紫堇塊莖堿;Corytuberine
          kFluor555-EdU法細(xì)胞增殖檢測試劑盒(流式)雷夫松氏 1,4-二溴-2,3-二氟苯B12檢測試劑盒

          白酒  酒精度 3,4,5-三氯噠維B2檢測試劑盒

          桔綠木霉 2,6-吡啶二羧酸二乙酯B6檢測試劑盒

          線蟲被毛孢 1-甲基-3,5-二硝基-2-吡啶酮C檢測試劑盒

          枯草芽孢桿 4-氯苯乙維D檢測試劑盒

          紫紅曲霉 2,4-二溴-6-氟苯維D2檢測試劑盒

          釀酒酵母 2-苯乙鹽酸鹽素D3檢測試劑盒

          塔賓曲霉 4-氯-3-乙基苯酚D受體檢測試劑盒

          釀酒酵母 阿加曲班單水合物維E檢測試劑盒

          pAAV-RC2 4-氯-2-氟苯磺酰氯維K1檢測試劑盒

          蕈狀芽孢桿 己二酸二乙酯維K2檢測試劑盒

          光黑腹 丁酸香茅酯尾加壓素Ⅱ相關(guān)肽檢測試劑盒

          蜂房哈夫尼 酸香茅酯尾加壓素II檢測試劑盒

          草木樨中華根瘤 橙花乙酸酯胃癌抗原MG7-Ag檢測試劑盒

          雞葡萄球 環(huán)己烯-1-酸頻哪酯胃腸癌標(biāo)志物CA199檢測試劑盒


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