神經(jīng)元綠色熒光探針公司正在出售的產(chǎn)品：Phospho-p70 S6 Kinase Beta (Thr229) 化核糖體S6蛋白激β2抗體4-硝-7-哌苯并氧雜惡二唑 98%
Phospho-p70 S6 Kinase Beta (Thr421/Ser424) 化核糖體S6蛋白激β2抗體4-肼-7-硝-2,1,3-苯并氧雜惡二唑 98%
phospho-P70 S6 Kinase beta (S

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀(guān)察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀(guān)察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
阿里紅（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： Lanthanum (III) chloride, hexahydrate轉(zhuǎn)錄因子ETV7抗體包裝25g

阿魏（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： Molybdic oxideELAVL1抗體包裝5g

阿魏(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng)： Papain 2x crystallized from papaya Latex胚胎干相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子1抗體包裝1g

阿魏乙酯（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： Sodium benzenesulfonate表皮生長(zhǎng)因子受體III型突變體抗體包裝5g

矮地茶（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： Superoxide dismutase from Bovine Erythrocytes(SOD)紅膜蛋白條帶EPB41L5抗體包裝25g

艾黃;六棱菊亭(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng)： Triacontanol早期發(fā)育調(diào)控蛋白1抗體包裝5g

艾葉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： 4-Hydroxybenzaldehyde轉(zhuǎn)錄因子ETV6抗體包裝5g

安格洛苷 C（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： Albumin, from bovine pH 7.0 Low endotoxin跨膜通道蛋白8抗體包裝100mg

安石榴甙（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： Clostripain尤文氏肉瘤相關(guān)EWS蛋白抗體包裝25mg

安五脂（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： dGMP, 2'-Deoxyguanosine-5'-monophosphate disodium salt核外切1抗體包裝25g

安息香（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： L-Tartaric acid多發(fā)性肌炎/硬皮病自身抗原2抗體包裝5g

澳茄新堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng)： N,N'-Dimethylurea核糖體RNA合成蛋白40抗體包裝100g

澳洲茄;澳州茄（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： Nickel(II) oxide green核糖體RNA合成蛋白42抗體包裝25g

澳洲茄邊堿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： Phenazine多發(fā)性外生骨疣樣蛋白3抗體包裝5g

澳洲茄堿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： Potassium citrate tribasic, monohydrate轉(zhuǎn)錄因子EYA1抗體包裝250mg

樹(shù)舌靈芝Ganoderma│applanatum 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品絲肽2甘露聚糖結(jié)合凝集試劑盒人參二;Panaxadiol

致病性大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR絲蛋白抑制因子肽抑制因子進(jìn)化枝3G試劑盒人參皂苷-Rf;Ginsenoside

蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定絲蛋白HTRA1試劑盒人參皂苷Re;Ginsenoside R
神經(jīng)元綠色熒光探針梅花狀青霉 3-氯-4-氨基DPPX-IgG抗體Elisa

黃硬皮馬勃 3-硝基-1,2,4-三唑IgLON家族蛋白5抗體Elisa

阿維鏈霉 雙乙酰乙酰對(duì)苯二豬肉絳蟲(chóng)Elisa

枯草芽孢桿 2-叔丁基-5-酚抗神經(jīng)節(jié)苷脂抗體Elisa

絳紅產(chǎn)色小單胞 L-纈氨酸芐酯鹽酸鹽抗神經(jīng)節(jié)苷脂抗體Elisa

紅冬孢酵母屬 甘氨酸芐酯鹽酸鹽抗神經(jīng)節(jié)苷脂抗體Elisa

白靈側(cè)耳 3-(1-萘氧基)-1,2-環(huán)氧烷抗神經(jīng)節(jié)苷脂抗體Elisa

Hyalodendriella betulae Crous  4-氯吡啶-2-甲酸甲酯抗神經(jīng)節(jié)苷脂抗體Elisa

貪噬 十二烷基氯甲酸酯抗神經(jīng)節(jié)苷脂抗體Elisa

香菇 6-氨基-1-甲基尿嘧啶氯離子通道輔助蛋白1Elisa

不吸水鏈霉 4-乙氧基-2,3-二氟-6-酚胞內(nèi)氯離子通道蛋白1Elisa

孟氏假單胞 正丁基縮水甘油磷酸Elisa

枯草芽孢桿 N-甲基二烯基組蛋白脫乙酰基5Elisa

相思根瘤 2,3-二溴-6-氯吡啶甲氧基腎上腺Elisa

植物乳桿 4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜烷-2-基)-1H-吲唑可溶性髓系觸發(fā)受體-2Elisa