乳酸脫氫酶染色液(四唑鹽法)公司*的產(chǎn)品：Phospho-Cyclin D1 (Thr286) /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化cyclin D1抗體IgG氟化鈣 光譜純
Cyclin D2/FITC 熒光標(biāo)記周期D2抗體IgG化銫 SP
Cyclin D3/FITC 熒光標(biāo)記周期D3抗體IgG三氧化二鈷 SP
Cyclin E/FITC 熒光標(biāo)記周期E/原癌因抗體IgG三氧化

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：乳酸脫氫酶染色液(四唑鹽法)

英文名稱：

產(chǎn)品規(guī)格：2×50ml

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

牡丹皮（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Saikosaponin B2珠蛋白1抗體包裝100ml

牡丹皮苷C英文名稱： Saikosaponin C肌球蛋白輕鏈9抗體包裝25ml

牡荊(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Saikosaponian D磷化肌球蛋白輕鏈9抗體包裝1g

牡荊-4''-O-葡萄糖苷英文名稱： HederageninNADH復(fù)合體1抗體包裝5g

牡荊葡萄糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Hederagenin癌相關(guān)抗原抗體包裝100g

牡荊鼠李糖苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Epimedin A組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移MOF抗體包裝25g

木鱉子（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Epimedin A1間質(zhì)蛋白抗體包裝10g

木芙蓉葉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Epimedin B肌球蛋白輕鏈3抗體包裝100g

木瓜（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Epmedin C多藥耐藥蛋白/P-糖蛋白抗體包裝25g

木蝴蝶苷A（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Aurantio-obtusin同源結(jié)構(gòu)蛋白1抗體包裝5g

木蝴蝶苷B（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Hesperidin增殖誘導(dǎo)蛋白5/肺癌相關(guān)蛋白10抗體包裝1g

木蘭花堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Hesperidin肌鈀蛋白抗體包裝5g

木蘭花堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Hesperitin肌管相關(guān)蛋白2抗體包裝25g

木蘭脂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Cordycepin基質(zhì)金屬蛋白18/19抗體包裝10g

木棉花（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Nobiletin增殖相關(guān)蛋白MAGOH抗體包裝250g

JCM9420=ATCC51300=DSM44048=IFO15854=IMSNU資源名稱: 盧森坦類諾卡氏菌 質(zhì)量規(guī)格：>97%,游離抗膠原蛋白抗體試劑盒扁豆堿;PhysostigMine

康寧木霉Trichoderma│konigii 質(zhì)量規(guī)格：BS生物染色級(jí)抗?fàn)钕傥⒘ｓw抗體試劑盒冬凌草乙;Ponicidin

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格：BS抗?fàn)钕偾虻鞍卓贵w試劑盒多烯紫杉;Docetaxel
乳酸脫氫酶染色液(四唑鹽法)產(chǎn)氨短桿 6-叔丁基-3H-噻吩[2,3-D]嘧啶-4-酮III型前膠原Elisa

 4-異基苯乙IV型膠原Elisa

華特拉根瘤 4-異基苯I型膠原Elisa

芽胞桿 Fmoc-L-羥脯氨酸芐酯I型前膠原Elisa

蠟樣芽孢桿 肉桂基溴I型前膠原羧基端肽Elisa

馬泰勒蟲(chóng)（青海剛察株） 七甲基壬烷I型前膠原N端前肽Elisa

枯草芽孢桿 還原橙 3L-谷氨酸脫氫Elisa

牛瘟病 2-(甲基)喹啉N2乙酰受體IgGElisa

副結(jié)核補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)（-）陰性血清 3-苯基-5-氨基異噁唑N2乙酰受體IgG1Elisa

土壤短芽胞桿 3-溴-5-(三氟甲基)吡啶N2乙酰受體IgG2Elisa

琥珀乳牛肝 3,4,5-三苯酸Na-K-ATPElisa

大腸埃希 5-溴-2-茚滿N端前腦鈉Elisa

干酪乳桿 1-烯基-3-甲基咪唑六氟磷酸鹽N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷Elisa

貝萊斯芽胞桿 3-氟-5--4-甲酸骨膜蛋白Elisa

灰離褶傘 非洛地平Phospho (637)-DRP1Elisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)