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          上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞組織染色>>乳酸脫氫酶染色液(H型,四唑鹽法)

          乳酸脫氫酶染色液(H型,四唑鹽法)

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          • 乳酸脫氫酶染色液(H型,四唑鹽法)

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          • 所在地 上海市

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          更新時(shí)間:2022-04-24 11:25:08瀏覽次數(shù):281

          聯(lián)系我們時(shí)請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 2×50ml
          貨號 GOY-01X10024 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
          主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
          乳酸脫氫酶染色液(H型,四唑鹽法)公司正在出售的產(chǎn)品:Cygb/FITC 熒光標(biāo)記球蛋白抗體IgG硝銅,三水 99.99% metals basis
          CYP450/FITC 熒光標(biāo)記色P450單氧化抗體IgG鉻銫 SP
          CYP1A1/FITC 熒光標(biāo)記色P450 1A1抗體IgG三氧化二鐵 SP
          CYP11A1/P450SCC/FITC 熒光標(biāo)記色P450 11A1抗體IgG氧化釓 SP

          詳細(xì)介紹

          以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:

          中文名稱

          英文名稱

          產(chǎn)品規(guī)格

          發(fā)貨周期

          乳酸脫氫酶染色液(H型,四唑鹽法)


          2×50ml

          1~3天


          商品介紹:

          用途:

          乳酸脫氫酶染色,主要顯示H型(LDH1)

          注意事項(xiàng):

          主要由四氮唑藍(lán)孵育液、陰性對照組成。染色后酶活性部位呈藍(lán)紫色沉淀。

          儲存條件:4℃,避光,6個(gè)月

          公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

          一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

          1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。

          2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

          3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。

          二.細(xì)胞處理:

          1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

          2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

          對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

          方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

          操作步驟:

          1. 樣品染色

          1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。

          2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

          對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

          3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。

          4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

          5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。

          2. 樣品檢測

          1) 流式細(xì)胞儀檢測:

          染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時(shí)內(nèi)檢測)。

          建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

          2) 熒光顯微鏡檢測:

          染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
          木栓(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Nobiletin絲裂原活化蛋白激激激4抗體包裝50g

          木通乙苷B;荷苞花苷B英文名稱: Toosendanin神經(jīng)分化因子6抗體包裝100g

          木犀草苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tetramethylpyrazine同源盒蛋白Meis2抗體包裝25g

          木犀草-7-O-葡萄糖苷英文名稱: TetramethylpyrazineMeteorin神經(jīng)膠質(zhì)分化調(diào)節(jié)蛋白抗體包裝5g

          木犀草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Asperosaponin Ⅵ棕櫚酰化膜蛋白5抗體包裝1g

          木香(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Dipsacoside B腦蛋白239抗體包裝5g

          木香烴內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Irisflorentin同源盒蛋白MEIS3抗體包裝1g

          苜蓿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ononin顆粒分化蛋白抗體包裝25g

          耐斯糖;蔗果四糖三合物(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Eleutheroside E單氧化A+B抗體包裝5g

          南板藍(lán)根(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ciwujianoside B膜蛋白相互作用蛋白RGS16抗體包裝1g

          南鶴虱(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Octyl acetate膜型絲蛋白2抗體包裝250 mg

          南沙參(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Plantamajoside多藥耐藥相關(guān)蛋白8/9/14抗體包裝1g

          南山楂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: DaidzinMob1同源蛋白MOBKL2B抗體包裝5g

          南五味子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: ChrysophanolMob1同源蛋白MOBKL2C抗體包裝100g

          鬧羊花II英文名稱: Emodin復(fù)合型表皮生長因子樣結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體包裝1g

          曲霉屬Aspergillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:BS抗?fàn)钕龠^氧化物抗體試劑盒大黃葡萄糖苷;

          蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質(zhì)量規(guī)格:BS抗型肝炎病抗體IgM試劑盒;Digoxin

          芽孢桿菌Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:BS抗型肝炎病抗體IgG試劑盒L-蛋;L-Methionine
          乳酸脫氫酶染色液(H型,四唑鹽法)平菇 Boc-O-甲基-D-絲氨酸Pim-2原癌基因Elisa

          地衣芽孢桿 O-甲基-D-絲氨酸鹽酸鹽pro-MMP-9Elisa

          迂回殼囊孢 (R)-2-氨基-3-甲氧基酸鹽酸鹽PTEN;MMAC1Elisa

          香菇 1-芐基-4-(甲基)-1H-吡唑鹽酸鹽P物質(zhì)Elisa

          雙孢蘑菇(白蘑菇、洋蘑菇) 4-異氧基-3-甲氧基苯乙P選擇Elisa

          雙環(huán)林地蘑菇 3-羥基吡咯烷鹽酸鹽Qa抗原2Elisa

          地衣芽胞桿 (2R)-1-[(9H-芴-9-甲氧基)羰基]-2-甲酸RAS癌基因家族成員RAB5aElisa

          后藤假絲酵母 N-芴甲氧羰基-BETA-叔丁基-L-天冬氨酸五氟苯酯R-脊椎蛋白2Elisa

          大腸桿 6--5-氟甲酸吡啶S100B蛋白Elisa

          詹氏酸桿 3-氟-5-羥基S100蛋白Elisa

          釀酒酵母 L-硫代脯氨酸乙酯鹽酸鹽S100鈣結(jié)合蛋白A4Elisa

          鏈格孢 2-氨基-4-異基-5-溴S100鈣結(jié)合蛋白A8Elisa

          厚垣孢普可尼亞 3-氨基-4-氟苯S100鈣結(jié)合蛋白A8;A9復(fù)合物Elisa

          露濕漆斑 2--4-氟苯磺酰S100鈣結(jié)合蛋白A9Elisa

          乳酸片球 2--4-氟甲酯SH3YL1Elisa

           


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