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          上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞組織染色>>乳酸脫氫酶染色液(M型,四唑鹽法)

          乳酸脫氫酶染色液(M型,四唑鹽法)

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          • 乳酸脫氫酶染色液(M型,四唑鹽法)

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          • 所在地 上海市

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          更新時(shí)間:2022-04-24 11:23:59瀏覽次數(shù):260

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          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 2×50ml
          貨號(hào) GOY-01X10025 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
          主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
          乳酸脫氫酶染色液(M型,四唑鹽法)公司*的產(chǎn)品:CYP2E1/FITC 熒光標(biāo)記抗色P450ⅡE1抗體IgG化鑭,七水 99.9% metals basis
          CYP3A4/FITC 熒光標(biāo)記抗色P450 3A4抗體IgG結(jié)晶化鋰 SP
          CYP8A1/PTGIS/FITC 熒光標(biāo)記前列環(huán)合成抗體IgG鉛 flakes,SP
          CYP19/FITC 熒光標(biāo)記色P450 19抗體IgG二氧化

          詳細(xì)介紹

          商品介紹:

          用途:

          乳酸脫氫酶染色,主要顯示M型(LDH5)

          注意事項(xiàng):

          主要由四氮唑藍(lán)孵育液、陰性對(duì)照組成。染色后酶活性部位呈藍(lán)紫色沉淀。

          儲(chǔ)存條件:4℃,避光,6個(gè)月

          產(chǎn)品屬性:

          中文名稱(chēng):乳酸脫氫酶染色液(M型,四唑鹽法)

          英文名稱(chēng):

          產(chǎn)品規(guī)格:2×50ml

          發(fā)貨周期:1~3天
          公司產(chǎn)品僅用于科研

          細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:

          細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:

          ①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;

          ②生物膜與細(xì)胞器的研究;

          ③細(xì)胞骨架體系的研究;

          ④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;

          ⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;

          ⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);

          ⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;

          ⑧細(xì)胞工程.

          實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

          一、分離與培養(yǎng):

          1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;

          2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

          3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

          4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

          5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

          二、免疫熒光鑒定:

          1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

          2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

          3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

          4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;

          5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

          6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

          操作規(guī)程

          1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

          2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

          3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

          4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

          5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

          6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

          7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

          8、結(jié)果分析

          a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100

          b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

          鬧羊花III英文名稱(chēng): Emodin低密度脂蛋白受體的誘導(dǎo)降解蛋白抗體包裝25g

          鬧羊花V英文名稱(chēng): Rhein鋅指蛋白144抗體包裝5g

          鬧洋花(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Rhein生肌決定因子Myf5抗體包裝100g

          擬人參皂苷F11(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Rhein-8-O-β-D-glucopyranoside磷化生肌決定因子Myf5抗體包裝25g

          擬人參皂苷Rh2(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Pectolinarin黑皮質(zhì)2受體輔助蛋白2抗體包裝500g

          擬人參皂苷RT5(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Hordenine金屬硫蛋白3抗體包裝1g

          鳥(niǎo)苷英文名稱(chēng): Danshensu絲裂原活化蛋白激MAP4K6抗體包裝5g

          尿囊(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Danshensu擬南芥MAP65蛋白抗體包裝5MG

          檸檬苦,黃柏內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品,橙皮提取)英文名稱(chēng): Sodium Danshensu神經(jīng)干RNA結(jié)合蛋白Musashi1抗體包裝1g

          檸檬苦;吳茱萸內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品,吳茱萸提取)英文名稱(chēng): Tanshinone I粘膜粘附分子1抗體包裝5g

          牛白藤(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Tanshinone I髓過(guò)氧化物抗體包裝1g

          牛蒡苷元(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Tanshinone IIA膜相關(guān)鳥(niǎo)苷反轉(zhuǎn)激1抗體包裝25g

          牛蒡子(牛蒡子)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Tanshinone IIA神經(jīng)突觸前膜胞內(nèi)蛋白13抗體包裝5g

          牛蒡子苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Tanshinone IIA-sulfonic sodium高度保守基因相關(guān)蛋白Membralin抗體包裝100g

          牛蒡子苷元-4'-O-β-龍膽二糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Salvianolic acid A運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元及胰腺同源蛋白1抗體包裝25g

          巨大芽胞桿菌Bacillus│megaterium 質(zhì)量規(guī)格:BS抗型肝炎病試劑盒多舌飛蓬苷;6’-O-Caffeoyle

          古德氏分枝桿菌Mycobacterium│goodii 質(zhì)量規(guī)格:BS(生物染色)抗基底節(jié)試劑盒丁香樹(shù)脂雙葡萄糖苷;Syringare

          芽胞桿菌Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:AR抗肌內(nèi)膜抗體試劑盒當(dāng)藥寧;Swertianin
          乳酸脫氫酶染色液(M型,四唑鹽法)不吸水鏈霉 4-Boc-2-基并Syndecan-1;CD138Elisa

          芽孢桿 4,6-二-2-氨基Tau蛋白Elisa

          貝倫格葡萄座腔 1-Boc-2-酮Toll樣受體2Elisa

          白被黑蛋巢 4-溴-2-甲氧基苯乙Toll樣受體3Elisa

          根瘤 N-BOC-1,2,3,6-四氫吡啶Toll樣受體4Elisa

          嗜酸乳桿 1-苯基-3-羥甲基哌Toll樣受體6Elisa

          中慢生華癸根瘤 6-甲氧基-8-硝基喹啉TβRIIElisa

          毛木耳(紫木耳、黃背木耳) 辛T亞群Elisa

          支氣管敗血波氏 5-溴氨基甲酯T球蛋白粘蛋白分子3Elisa

          運(yùn)動(dòng)節(jié)桿 2-氟苯乙USP21Elisa

          白僵 東莨菪鹽酸鹽WNT1可誘導(dǎo)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑蛋白1Elisa

          釀酒酵母 五苯α1酸性糖蛋白Elisa

          米曲霉 2-噻吩甲酰αL艾杜糖苷酸Elisa

          球毛殼 2-氨基-5-羥基吡啶鹽酸鹽αL巖藻糖苷Elisa

          大腸埃希 乙酸仲辛酯α-防御Elisa 

           


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