Th2細(xì)胞因子抑制劑（Suplatast Tosilate）公司*的產(chǎn)品：Anti-GAPDH/FITC 熒光素標(biāo)記3-磷酸甘油醛脫氫酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-NR1/NMDAR1/FITC 熒光素標(biāo)記谷氨酸受體1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh BORI

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：Th2細(xì)胞因子抑制劑（Suplatast Tosilate）

英文名稱：Suplatast Tosilate

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|100mg|500mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

猴頭兒茶酚O甲基移位抗體Human UCMA(Unique cartilage matrix-associated protein) ELISA Kit人纖維連接蛋白(cFn)免疫試劑盒

馬克斯克魯維酵母補(bǔ)體C1qTNF9鏈多肽抗體Human Cytochrome b-245 Beta Polypeptide ELISA Kit人外基質(zhì)磷糖蛋白(MEPE)免疫試劑盒

出芽短梗霉平滑肌鈣調(diào)蛋白CNN2抗體Human NADPH oxidase 5 ELISA Kit人色P450c21B/21-羥化(CYP21B)抗體免疫試劑盒

聚生殼菌心肌病相關(guān)蛋白2Human NEK2(Serine/threonine-protein kinase Nek2) ELISA Kit人色P450c21A/21-羥化(CYP21A)免疫試劑盒

球孢白僵菌5號(hào)染色體開放閱讀框34抗體Human HBeAg(hepatitis B virus E Antigen) ELISA Kit人色P450(CYP450)免疫試劑盒

釀酒酵母E1A激活基因激蛋白1抗體Human HBeAb(hepatitis B virus E Antibody) ELISA Kit人色c氧化亞基VIB多肽1(廣泛存在)(COX6B1)免疫試劑盒

根瘤菌2號(hào)染色體開放閱讀框42抗體Human NEK2(Serine/threonine-protein kinase Nek2) ELISA Kit人色c氧化亞基5B,線粒體(COX5B)免疫試劑盒

松口蘑豬瘟病抗體Human EZH2(Enhancer of zeste homolog 2) ELISA Kit人色c氧化亞基5A,線粒體(COX5A)免疫試劑盒

斑玉蕈3號(hào)染色體開放閱讀框54抗體Human HBcAb(hepatitis B virus Core antibody) ELISA Kit人色c氧化Ⅵα亞基多肽1(COX6A1)免疫試劑盒

醬油曲霉2號(hào)染色體開放閱讀框43抗體Human τPK1(Tau-Protein Kinase) ELISA Kit人色C氧化(COX)免疫試劑盒

釀酒酵母豬瘟病抗體Human VEGF165(Vascular Endothelial Growth Factor165) ELISA Kit人色C-1(CYC1)免疫試劑盒

蝦苗殺蝦微桿菌中心體蛋白110抗體Human VEGF-B(Vascular Endothelial Cell Growth Factor B) ELISA Kit人色b561(cytb561)免疫試劑盒

果生鏈核盤菌纖維Human VASPIN(Visceral Adipose Specific Serine Protease Inhibitor) ELISA Kit人絨毛蛋白/埃茲蛋白(cytovillin/ezrin)免疫試劑盒

根瘤菌分裂周期蛋白14B抗體Human VEGF-D(Vascular Endothelial Growth Factor D) ELISA Kit人膜DNA抗體(cmDNA)免疫試劑盒

食淀粉乳桿菌1號(hào)染色體開放閱讀框177抗體Human VIL1(Villin 1) ELISA Kit人角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)免疫試劑盒

冷海水黃桿菌1號(hào)染色體開放閱讀框183抗體Human WARS(Tryptophanyl tRNA Synthetase) ELISA Kit人角蛋白18-M65（CK 18-M65）免疫試劑盒

厚垣孢普可尼亞菌Pochonia│chlamydospora 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRDNA基轉(zhuǎn)移3A試劑盒狗牙花堿D

黃暗青霉Penicillium│citreonigrum 質(zhì)量規(guī)格：>98%，BCDNA基轉(zhuǎn)移1試劑盒高車前

瓊氏不動(dòng)桿菌Acinetobacter│junii 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BPDnaJ同源亞科B成員1試劑盒廣防風(fēng)苷A
Th2細(xì)胞因子抑制劑（Suplatast Tosilate）胎盤蛋白14抗體包裝5g

磷激α1抗體包裝1g

磷化激γ1包裝25g

親環(huán)相關(guān)蛋白1抗體包裝5g

磷化激γ2包裝1g

肝糖原磷化抗體包裝5g

肌肉糖原磷化抗體包裝25g

磷羧化2抗體包裝5g

磷葡萄糖內(nèi)酯抗體包裝25ml

蛋白磷2C亞型α抗體包裝5ml

蛋白激C nu型抗體包裝1g

磷化蛋白激C nu型抗體包裝25g

磷化磷脂酰肌激3催化亞單位3抗體包裝5g

磷甘油脫氫抗體包裝25g

磷化泌乳抗體包裝5g 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)