MIF巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子ELISA Kit不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

實(shí)驗(yàn)流程:
1. 實(shí)驗(yàn)前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備；
2. 加樣（標(biāo)準(zhǔn)品及樣本）100µL，37°C孵育1小時(shí)；
3. 吸棄，加檢測溶液A100µL，37°C孵育1小時(shí)；
4. 洗板3次；
5. 加檢測溶液B100µL，37°C孵育30分鐘；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90µL，37°C孵育10-20分鐘；
8. 加終止液50µL，立即450nm讀數(shù)。

ELISA Kit檢測試劑盒優(yōu)點(diǎn)多，更加方便我們的科研學(xué)者進(jìn)行科學(xué)實(shí)驗(yàn)，是科研實(shí)驗(yàn)的好伙伴。

產(chǎn)品名稱	英文名稱	貨號
MIF巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子ELISA Kit	MIF ELISA Kit	GOY-E100052

樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。

（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
注意事項(xiàng)：
1.加樣：
①實(shí)驗(yàn)樣本過多時(shí)，可分批次操作，以減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間延長造成的誤差；
②加酶試劑后，用吸水紙吸干孔外試劑；
③作定量試驗(yàn)時(shí)，使用加樣器加注試劑，并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性，此外，要做到一份樣本一個(gè)移液頭，防止交叉污染。
2.溫育：
①如有兩種溫度，盡量使用較低的溫育溫度、較長反應(yīng)時(shí)間的條件；
②用1個(gè)小溫度計(jì)放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察；
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會造成“邊緣效應(yīng)”，因此盡量采用水?。?/span>
3.洗板：
①手工洗板時(shí)，拍板時(shí)要垂直，避免交叉污染，用力不能過猛，防止抗原抗體復(fù)合物脫離；
②洗板機(jī)洗板時(shí)應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢，若被雜物堵塞時(shí)可用注射器針頭挑出；
③為了洗滌效果好，實(shí)驗(yàn)室可采用機(jī)器與人工洗滌相結(jié)合的方法，在機(jī)器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次，或適當(dāng)增加洗板的次數(shù)；
4.顯色：
ELISA試劑盒中，如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物，則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液；如以鄰苯二胺(OPD)為底物，則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑，要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光，但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定：
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成，定性測定用肉眼判讀試驗(yàn)結(jié)果時(shí)，反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm；定量測定時(shí)用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果，酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽光或強(qiáng)光照射下，需先預(yù)熱15-30 min再進(jìn)行測試。

麥芽糖 訂購|咨詢 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 染色質(zhì)解旋酶DNA結(jié)合蛋白2抗體 α1-AT ELISA Kit α1抗胰蛋白酶(α1-AT)ELISA試劑盒

大豆分離蛋白 質(zhì)量規(guī)格：蛋白含量≥90%,BR Soy protein isolate 凝結(jié)芽孢桿菌 Bacillus coagulans 細(xì)胞名稱

薯蕷皂苷元;薯蕷皂素;地奧配質(zhì) 訂購|咨詢 規(guī)格： HPLC≥98%,20mg/支 化鈣調(diào)節(jié)素抗體 Enterovirus ELISA Kit 腸病毒(Enterovirus)ELISA試劑盒

姜黃 訂購|咨詢 規(guī)格： 0.5g 細(xì)胞分裂周期2相關(guān)蛋白激酶7抗體 FAM172A ELISA Kit FAM172A蛋白(FAM172A)ELISA試劑盒

一枝黃花 訂購|咨詢 規(guī)格： 6g 1號染色體開放閱讀框144抗體 β-TG ELISA Kit β血小板球蛋白(β-TG)ELISA試劑盒

茴香霉素 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR Anisomycin, from Streptomyces griseolus 蘇云金芽胞桿菌科爾默亞種 Bacillus thuringiensis subsp. colmeri藤倉赤霉 Gibberella fujikuroi

連翹酯苷E(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 Forsythoside E Hs 578T(人腺細(xì)胞)泡盛曲霉 Aspergillus awamori

五指毛桃 訂購|咨詢 規(guī)格： 1g 豚鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA試劑盒，英文名：SOD ELISA Kit

山梨;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 訂購|咨詢 規(guī)格： 0.25g BIVM蛋白抗體 TYRO3 ELISA Kit 酪氨蛋白激酶受體TYRO3(TYRO3)ELISA試劑盒

α-巰基甘油(>98.0%(GC)(T)) 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(T) α-Thioglycerol  珊瑚色諾卡氏菌 Nocardia corallineWB-F344(大鼠肝上皮樣干細(xì)胞)

β-倒捻子素 訂購|咨詢 規(guī)格： HPLC≥98%,20mg/支 骨形態(tài)發(fā)生蛋白受體1B抗體 PGDS ELISA Kit 前列腺素D合成酶(PGDS)ELISA試劑盒

羅布麻寧；夾竹桃麻素 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR Acetovanillone 褐球固氮菌 Bacillus thuringiensis subsp. kumamotoensis鏈霉菌 Streptomyces sp.

頭孢他 訂購|咨詢 規(guī)格： 100mg 載脂蛋白O抗體 PPIL1 ELISA Kit 肽酰脯氨酰異構(gòu)酶(親環(huán)蛋白)樣1(PPIL1)ELISA試劑盒

MIF巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子ELISA KitDonkey Anti-Goat IgG/Cy5  Cy5標(biāo)記的驢抗羊IgG 規(guī)格: 0.1mlSPP/Signal Peptide Peptidase  信號肽肽酶SPP抗體 規(guī)格: 0.2ml

Mouse Anti-Bov IgG  小鼠抗牛IgG 規(guī)格: 1mgThioster-containing protein 1  按蚊硫酯包含蛋白-1抗體 規(guī)格: 0.2ml

KLHDC5  kelch樣蛋白5抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-LKB1(Ser334)  磷酸化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶抗體 規(guī)格: 0.1ml

ASB10  含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號抑制物盒蛋白家族10抗體 0.1mlGoat Anti-rabbit IgG/PE-CY5  PE-CY5標(biāo)記的羊抗兔IgG 規(guī)格: 0.1ml

CD33/Siglec-3  CD33抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-c-Raf(Ser338)  磷酸化原基因c-Raf抗體 規(guī)格: 0.1ml

MFF  線粒體裂變因子MFF抗體 規(guī)格: 0.2mlKMT8/Riz1/Riz2  轉(zhuǎn)錄因子GATA3結(jié)合蛋白G3B抗體 規(guī)格: 0.2ml

JAM1  連接粘附分子1抗體 規(guī)格: 0.1mlWNT4  信號通路Wnt4抗體 規(guī)格: 0.2ml

Phospho-Estrogen Receptor alpha (Tyr537)  磷酸化雌激素受體α抗體 規(guī)格: 0.1mlDEK  DEK基因結(jié)合蛋白 規(guī)格: 0.1ml

Bax  Bax 規(guī)格: 0.1ml

VEGFR2  管內(nèi)皮生因子受體2抗體 規(guī)格: 0.1ml

MSS1  26S蛋白酶調(diào)節(jié)亞型7抗體 規(guī)格: 0.1ml

PLEKHM2/SKIP  小板白細(xì)胞C激酶底物同源結(jié)構(gòu)域M2抗體 規(guī)格: 0.2ml

ANAPC1  細(xì)胞周期末期促進(jìn)復(fù)合蛋白APC1抗體 規(guī)格: 0.1ml

GRP78/BIP/HSPA5  葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78抗體（熱休克蛋白70蛋白5） 規(guī)格: 0.1ml

使用方法：
測定法的靈敏度來自作為報(bào)告的酶。，酶是一種有機(jī)催化劑，很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng)，產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。   24μg/ml    5號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 12μg/ml    4號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 6μg/ml     3號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 3μg/ml     2號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 1.5μg/ml   1號標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。|
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。