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詳細(xì)介紹
商品介紹：
長(zhǎng)鏈二烷基羰花青化合物，特別是Dil（分子量933.88），廣泛應(yīng)用于固定和非固定的組織與細(xì)胞中，進(jìn)行順行或逆行的神經(jīng)示蹤分析。Dil 不會(huì)影響細(xì)胞的活力、生長(zhǎng)以及基本生理特性。Dil 標(biāo)記運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元，可在培養(yǎng)基條件下持續(xù)跟蹤長(zhǎng)達(dá)四周，在體內(nèi)長(zhǎng)達(dá)一年。染料通過在質(zhì)膜中的緩慢橫向擴(kuò)散均勻標(biāo)記神經(jīng)元，0.2～0.6mm/每天/固定標(biāo)本，在活體組織里，可以達(dá)到6mm/每天。經(jīng)過醛固定的組織，Dil 的擴(kuò)增可以持續(xù)長(zhǎng)達(dá)1～2年。一般情況下未標(biāo)記的染料不會(huì)向非標(biāo)記的細(xì)胞轉(zhuǎn)移，除非質(zhì)膜被破壞，比如切片部位 |
產(chǎn)品屬性：
中文名稱：羰化青DiI(神經(jīng)元示蹤劑)
英文名稱：
產(chǎn)品規(guī)格：10mg
發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；
②生物膜與細(xì)胞器的研究；
③細(xì)胞骨架體系的研究；
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
白果內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： D(+)-Arabitol磷化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體包裝25g
白花丹（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Metol磷化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體包裝5g
白花前胡（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Pyridoxal hydrochloride磷化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體包裝25g
白花前胡（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Silicone oil磷化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體包裝5g
白花前胡A英文名稱： Sodium bromide磷化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體包裝25g
白花前胡（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Sodium hexametaphosphate磷化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體包裝5g
白花前胡乙（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Albumin, from bovine pH 7.0 Fatty free磷化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體包裝1g
白花蛇舌草（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Diaphorase磷化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體包裝5g
白樺脂(標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Digitonin-water-soluble磷化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體包裝25g
白樺脂（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： DSP磷化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體包裝5g
白樺脂（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Glutamate Dehydrogenase磷化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體包裝100g
白及（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： HOBT, 1-Hydroxybenzotriazole磷化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體包裝25g
白蠟樹（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： IDA, Iminodiacetic acid磷化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體包裝500g
白蘞（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Lithium lactate磷化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體包裝100ml
白麻苷英文名稱： Magnesium carbonate basic pentahydrate磷化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體包裝25ml
IMI265297資源名稱: 桔灰青霉 質(zhì)量規(guī)格：>99%,EP 6.4,BR絲/蘇蛋白激B-raf試劑盒人參皂苷Rg2;Ginsenoside
Alternaria constrictaAlternaria│constricta 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品瞬態(tài)電壓感受器陽離子通道,子類V,成員4試劑盒人參皂苷Rg1;Ginsenoside
?？曝愄厥暇?/span>Cobetia│marina 質(zhì)量規(guī)格：≥99,BR瞬態(tài)電壓感受器陽離子通道,子類V,成員1試劑盒人參皂苷Rb3;Ginsenoside
羰化青DiI(神經(jīng)元示蹤劑)pBIFC-VC155 4-甲氧基芐炭疽桿Elisa
南方靈芝 2-溴-4-甲基-5-氟吡啶病抗體Elisa
大腸埃希氏 2,4-二氟芐溴肌單磷酸1Elisa
岸濱芽孢桿 1-丁磺酰氯粘膜相關(guān)上皮趨化因子Elisa
福士擬莖點(diǎn)霉 1-N-Cbz-3-基維生HElisa
盤屬 吲唑-6-酸6-硫酸羥基褪黑Elisa
西班牙糖絲 3-溴噠前動(dòng)力蛋白2Elisa
中國(guó)臺(tái)灣根霉 3-溴噠氮末端腦鈉肽前體Elisa
葡萄汁酵母 2,5-二氨基苯磺酸磷酸化核轉(zhuǎn)錄因子p65Elisa
黏液桿屬 3-氨基-5-氟甲酯磷酸化核轉(zhuǎn)錄因子p65Elisa
豬鏈球分型血清參考品 血清型 SS23 3-溴-2-氟-4-甲基吡啶維生H受體Elisa
釀酒酵母 3-氨基-5-溴-2-甲氧基吡啶固調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白Elisa
擬康氏木霉 6-(1-甲基乙氧基)-3-吡啶甲再生胰島衍生蛋白1βElisa
米曲霉 3-氨基-5-溴-2-氟嘧啶再生胰島衍生蛋白3βElisa
大球蓋菇 異戊酸烯酯再生胰島衍生蛋白3γElisa
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