商品介紹:
GNE-7915是高效選擇性,可滲透大腦的LRRK2抑制劑,IC50值為9nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1351761-44-8 純度:98.77% 分子式:C??H??F?N?O? 分子量:443.4 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:LRRK2抑制劑(GNE-7915)
英文名稱:GNE-7915
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
杏鮑菇麻疹病融合蛋白抗體Human NUDT3 ELISA Kit肉堿O-乙?;D(zhuǎn)移(CRAT/CAT1)ELISA Kit
松杉靈芝紅膜蛋白55抗體Human NT5C3 ELISA Kit溶血血小板活化因子(lyso-PAF)ELISA Kit
殼菌膜相關(guān)環(huán)指蛋白5抗體Human NUBPL ELISA Kit溶血補(bǔ)體(Hc)ELISA Kit
藤黃微球菌磷化肌增強(qiáng)因子2C抗體Human NSUN5 ELISA Kit溶體相關(guān)膜蛋白2(HLAMP-2)ELISA Kit
膠韌革菌(榆耳,榆蘑)線粒體核糖體蛋白MRP63抗體Human NT5M ELISA Kit溶菌(LZM)ELISA Kit
赭曲霉磷化肌增強(qiáng)因子2C抗體Human NT5DC1 ELISA Kit絨毛膜促性腺激β(β-HCG)ELISA Kit
類諾卡氏菌基質(zhì)金屬蛋白13抗體Human NTM ELISA Kit絨毛膜促性腺激β(β-CG)ELISA Kit
黑曲霉酪單氧化微管相關(guān)蛋白MICAL抗體Human NTHL1 ELISA Kit絨毛膜促性腺激(HCG)ELISA Kit
黑腐皮殼菌梅克爾-格魯伯綜合征相關(guān)蛋白抗體Human NTF2 ELISA Kit相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA Kit
漢塔成對(duì)桿菌突變的黑色瘤相關(guān)抗原1抗體Human F8(Coagulation factor VIII) ELISA Kit相關(guān)蛋白A(PAPP-A)ELISA Kit
平菇黑色瘤相關(guān)抗原10抗體Human NSDHL ELISA Kit特異性蛋白B(PSPB)ELISA Kit
綠粘帚霉絲裂原活化蛋白激激2抗體Human NT5C2 ELISA Kit特異性β1糖蛋白4(PSG4)ELISA Kit
苜蓿莖點(diǎn)霉G蛋白偶聯(lián)受體24抗體Human NT5C ELISA Kit特異性β1糖蛋白(SP1/PSβ1-G)ELISA Kit
腫痂鏈球菌絲裂原活化蛋白激組織蛋白1抗體Human NSFL1C ELISA Kit皰疹抗體(HG)ELISA Kit
蟲(chóng)草同源盒蛋白Meis1抗體Human NSMCE2 ELISA Kit熱休克因子1(HSF-1)ELISA Kit
稻黃桿菌單氧化A抗體Human NT5C3 ELISA Kit熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA Kit
雅致栓孔菌Lenzites│elegans (Spreng.) Pat. 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)鳶尾苷
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)鳶尾黃
皮狀絲孢酵母Trichosporon│cutaneum 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)胡椒堿
LRRK2抑制劑(GNE-7915)DDB2 損傷DNA結(jié)合蛋白2抗體酯 ≥99%, FCC
DDC/DOPA Decarboxylase 多巴脫羧抗體己酯 Standard for GC,>99%(GC)
DDX4/MVH DDX4抗體己酯 CP,98.0%
alpha Defensin 1/3 防御α1/3抗體己酯 99%
Defensin alpha 4 防御α4抗體己酯 ≥98%, FCC, FG
Defensin Beta 1 防御β1抗體棕櫚酯 98%
Defensin Beta 1 防御β1抗體棕櫚酯 standard for GC, ≥99% (GC)
DEK DEK癌因結(jié)合蛋白棕櫚酯 ≥98%, FG