產(chǎn)品屬性:
中文名稱:AO熒光染色試劑盒
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:100T
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
用途: 流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞DNA含量,通過染色定量分析DNA,亦可通過熒光顯微鏡觀察形態(tài)變化。 注意事項(xiàng): 一步法,主要由AO儲存液和AO稀釋液組成,含破膜劑,簡便易行。 儲存條件:4℃,避光,6個月 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
去氫土莫英文名稱: DBD-ED [=4-(N,N-Dimethylaminosulfonyl)-7-(2-aminoethylamino)-2,1,3-benzoxadiazole] 鳥苷環(huán)化激活蛋白2抗體包裝100ml
去亞基小檗堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: AABD-SH (=4-Acetamido-7-mercapto-2,1,3-benzoxadiazole) 鳥苷環(huán)化激活蛋白3抗體包裝25g
去氧紫草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 9-(Bromomethyl)acridine 基合成抗體包裝5g
去乙酰車葉草酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: DBD-COCl [=4-(N,N-Dimethylaminosulfonyl)-7-(N-chloroformylmethyl-N-methylamino)-2,1,3-benzoxadiazole]高爾基體卷曲螺旋蛋白1抗體包裝1g
全蝎(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: NBD-COCl [=4-(N-Chloroformylmethyl-N-methylamino)-7-nitro-2,1,3-benzoxadiazole] 高爾基體卷曲螺旋蛋白2抗體包裝250mg
全葉青蘭(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: o-Phthalaldehyde 戊二酰脫氫抗體包裝5g
拳參(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Dansyl HydrazineGTP環(huán)反饋調(diào)節(jié)蛋白抗體包裝5mg
染料木苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: DBD-H [=4-(N,N-Dimethylaminosulfonyl)-7-hydrazino-2,1,3-benzoxadiazole] 絨毛膜特異性轉(zhuǎn)錄因子GCM2抗體包裝25g
染料木/金雀異黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: NBD-H (=4-Hydrazino-7-nitro-2,1,3-benzoxadiazole Hydrazine) 廣泛控制基合成1樣蛋白1抗體包裝5g
人參(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 1,3-Cyclohexanedioneβ1-6 N-乙?;咸烟寝D(zhuǎn)移2抗體包裝250mg
人參二(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: ABD-F [=4-(Aminosulfonyl)-7-fluoro-2,1,3-benzoxadiazole]磷化G蛋白激活內(nèi)向通道1抗體包裝100g
人參莖葉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ferroceneacetic AcidG蛋白偶聯(lián)受體激相互作用蛋白2抗體包裝25g
人參蘆頭(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: (Hydrazinocarbonyl)ferrocene間隙連接蛋白10抗體包裝500g
人參三(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Dimethyl Sulfoxide間隙連結(jié)蛋白46/白內(nèi)障相關(guān)蛋白抗體包裝1g
人參皂苷CK(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 1,2,3,4-Tetrahydronaphthalene間隙連結(jié)蛋白50/白內(nèi)障相關(guān)蛋白抗體包裝25g
鐮孢Fusarium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品尿微量白蛋白試劑盒羅漢果苷III;Mogroside II
棒形小克銀漢霉Cunninghamella│clavata 質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP grade尿相關(guān)蛋白C試劑盒律草;Humulone
ATCC44166=DSM2191資源名稱: 米根霉 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品尿皮龍膽;2,5-Dihydroxyben
AO熒光染色試劑盒大腸埃希 2-氟-6-甲氧基苯甲U3小核糖核蛋白IMP3Elisa
中慢生華癸根瘤 巴豆酸異丁酯畸胎瘤源性生長因子Elisa
黃桿 巴豆酸異丁酯封閉蛋白5Elisa
黑木耳 4-乙基苯超敏心肌肌鈣蛋白ⅠElisa
大孢枝孢 3-氯-2-氟苯甲谷氨酰合成Elisa
大羽須瑚 2-甲硫基-4-氨基嘧啶-5-甲幽門螺桿尿抗體Elisa
枯草芽孢桿 4-甲基-3-幽門螺桿相關(guān)基因蛋白A抗體Elisa
大腸埃希 磷酸甜菜堿心營養(yǎng)-1Elisa
冬蟲夏草 Fluvastatin Sodium組織蛋白G抗體Elisa
芽孢桿屬 5-溴-6-氯-3--β-D-吡喃葡萄糖苷θ-防御Elisa
褐囊蜜環(huán) 甲氧基酮聚乙二主鏈的IgG抗體Elisa
鮮綠青霉 2'-脫氧-5'-O-DMT-肌苷單磷酸腺苷激活蛋白Elisa
黃褐色牛桿 1,4-二乙炔基苯還原黃腺嘌呤二核苷酸Elisa
大豆慢生根瘤 1-丁基-1-甲基吡咯烷溴化物基質(zhì)金屬蛋白19Elisa
Pseudoclavibacter caeni Srinivasan (+)-4,5-雙[羥基(二苯基)甲基]-2,2-二甲基-1,3-二氧戊環(huán)基質(zhì)金屬蛋白20Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)