產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Goldner三色染色液
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:6×50ml|6×100ml
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
用途: 又稱戈德納三色染色液,主要用于骨組織染色。 注意事項(xiàng): 可不脫鈣染色,可用MMA塑料包埋,脫塑后直接染色。 儲存條件:室溫,避光,12個(gè)月 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
7-氧基-4’-羥基異黃(黃豆苷元雜質(zhì))(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Phloxine B三磷肌苷焦磷抗體包裝1g
7-羥基-4-基(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Eriochrome Red B2,3-雙加氧抗體包裝1g
7-羥基;傘形花內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fast Red RL Salt白介19抗體包裝5g
7-乙基(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fast Red Violet LB Salt抑制A/Inhibin α抗體包裝1g
8-O-乙酰山梔苷酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Amaranth胰島基因增強(qiáng)結(jié)合蛋白1/2抗體包裝25g
8-姜酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Brilliant ponceau 5R磷化白介-1受體相關(guān)激1抗體包裝5g
808猩紅英文名稱: Phenosafranine磷化白介-1受體相關(guān)激1抗體包裝1g
9-氧基英文名稱: Sirius Rose BB磷化白介-1受體相關(guān)激1抗體包裝5g
9’-丹酚B單酯英文名稱: Ruthenium Red干擾調(diào)節(jié)因子3包裝25g
9’’’-丹酚B單酯英文名稱: Erythrosin B磷化干擾調(diào)節(jié)因子3包裝5g
alpha-熊果苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Acid Red 88干擾調(diào)節(jié)因子7抗體包裝100g
Bullatine G(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Acid Red 183磷化干擾調(diào)節(jié)因子7抗體包裝25g
Cimiracemoside英文名稱: Acid Red 9磷化胰島受體底物-1抗體包裝1g
Clemaphenol A英文名稱: Malachite green磷化胰島受體底物-1抗體包裝25MG
Clematichinenoside C英文名稱: Brilliant green磷化胰島受體底物-1抗體包裝250mg
YIM45827資源名稱: 諾卡氏菌 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品淋巴功能相關(guān)抗原2試劑盒金絲桃;Hypericin
希爾正青霉Eupenicillium│shearii 質(zhì)量規(guī)格:依諾沙星純含量≥60%亮酰-半胱酰肽試劑盒桔皮;Tangeretin
曼達(dá)帕姆發(fā)光桿菌Photobacterium│mandapamensis 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR,可用于培養(yǎng) 亮富含重復(fù)絲/蘇蛋白激2試劑盒2-金剛烷;2-Adamantanon
Goldner三色染色液多分枝靈芝 4-(5-乙基-1,2,4-噁二唑-3-基)一磷酸腺苷Elisa
植物乳桿 N-芐基甘氨酸鹽酸鹽半纖維Elisa
美澳型核果褐腐病 原果膠Elisa
犁黑輪斑交鏈孢霉 3-乙炔基苯甲水溶性果膠Elisa
季也蒙邁耶氏酵母 4-甲氧基苯乙炔膳食纖維Elisa
空腸彎曲桿 1,2-雙[雙(五氟苯基)膦基]乙烷粗纖維Elisa
宇佐美曲霉 5-羧基熒光酸性磷酸Elisa
貝氏葡萄座腔 (S)-(+)-2-氨基丁酰鹽酸鹽3-磷酸甘油酸激Elisa
類產(chǎn)堿假單胞 (+)-二特戊酰-D-甘油-3-磷酸脫氫Elisa
釀酒酵母 6-溴嘌呤糖磷酸異構(gòu)Elisa
居海綿溶桿 [1,2,4]triazolo[4,3-a]pyridin-3-amine景天庚酮糖-1,7-二磷酸Elisa
毛柄(金針菇) 1-丁基吡咯烷肌動蛋白Elisa
黃色孢鏈霉 4-乙炔苯酪氨酸Elisa
總狀共頭霉 Phe-Proα-葡萄糖苷Elisa
環(huán)圈鏈霉 (4-溴苯基)乙炔酪氨酸Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)