商品介紹:
用途: 醋酸洋紅染色液主要用于花粉、動植物組織切片等樣本中細胞核的染色,亦可用于線粒體的染色。 注意事項: 又稱乙酸洋紅染色液或醋酸胭脂紅染色液,主要由高濃度乙酸、洋紅(也稱胭脂紅)等組成,pH呈酸性。 儲存條件:室溫,避光,12個月 |
以下是細胞生物學(xué)試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
醋酸洋紅染色液 |
| 50ml|100ml | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
三白草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fluorescein Chloride 磷化G蛋白偶聯(lián)受體激相互作用蛋白1抗體包裝5g
三白草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2',7'-Dichlorofluorescein磷化G蛋白偶聯(lián)受體激相互作用蛋白1包裝1g
三叉苦(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2,3-Diaminonaphthalene葡萄糖激調(diào)節(jié)蛋白抗體包裝5g
三尖杉堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Dimidium BromideGTP結(jié)合蛋白10抗體包裝1g
三尖杉寧堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 7-(Dimethylamino)-4-methylcoumarin磷化Ras GTP活化蛋白結(jié)合蛋白1抗體包裝5g
三角葉薯蕷皂苷英文名稱: 7-(Dimethylamino)-4-(trifluoromethyl)coumarinRas GTP活化蛋白結(jié)合蛋白1抗體包裝25g
三棱(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 7-(Diethylamino)coumarin-3-carboxylic Acidγ基丁γ2受體/GABAA Rγ2抗體包裝5g
三七(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ethyl 6-[4-(Diphenylamino)phenyl]coumarin-3-carboxylate磷化糖原合激3β抗體包裝1g
三七皂甙R1(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Uranine K磷化G蛋白偶聯(lián)受體激相互作用蛋白1抗體包裝100g
三七皂苷Fa英文名稱: Fluorescein Diacetate磷化珠蛋白轉(zhuǎn)錄因子1抗體包裝25g
三七皂苷Fe(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 7-Hydroxycoumarin-3-carboxylic Acid磷化珠蛋白轉(zhuǎn)錄因子1抗體包裝5g
三七皂苷Ft1(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 7-Diethylamino-4-methylcoumarinG蛋白偶聯(lián)受體激相互作用蛋白1抗體包裝100g
三七皂苷R2(R型)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Methyl Calcein Blue Hydrate磷化GATA結(jié)合蛋白6抗體包裝25g
三七皂苷R2(S型)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 6,7-Methylenedioxy-4-methyl-3-maleimidocoumarin磷化γ基丁γ2受體/GABAA Rγ2抗體包裝5g
三七總皂苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 4-Methyl-6,7-methylenedioxycoumarin胰高血糖受體抗體包裝100g
嗜松青霉Penicillium│pinophilum 質(zhì)量規(guī)格:≥99%鳥脫羧試劑盒雷公藤乙;Tripdiolide
: B90資源名稱: 產(chǎn)氣腸桿菌 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品黏著斑激試劑盒硫秋仙苷;Thiocolchicosi
芽孢桿菌Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR黏膜地址黏附分子試劑盒硫長春堿;Vinblastine su
醋酸洋紅染色液根瘤 β-內(nèi)?;|(zhì)衍生因子2Elisa
熒光假單胞 二水氧化三基質(zhì)衍生因子4Elisa
運動節(jié)桿 硝基乙酸乙酯Thimet脫寡肽1Elisa
釀酒酵母 1,3-苯二甲硫三磷酸Elisa
皮狀絲孢酵母 1,3-二(溴甲基)苯RAS相關(guān)蛋白RAB-27AElisa
啤酒神金黃桿 二(對傘花烴)釕(II)二聚體間隙連接蛋白37Elisa
盾殼霉 二乙酸酯絲氨酸蛋白Elisa
美澳型核果褐腐病 2-溴-6-氯甲苯間隙連接蛋白47Elisa
黑曲霉 1-二苯甲基-3-羥基氮雜環(huán)丁烷鹽酸鹽AP核酸內(nèi)切-1Elisa
白僵 對溴甲酸黃腺嘌呤二核苷酸Elisa
果生鏈核盤 N-甲基-對甲苯乙酰受體IgG1抗體Elisa
木賊鐮孢 2,5-雙(1-萘基)-1,3,4-惡二唑組織相容性復(fù)合體Ⅰ類相關(guān)基因BElisa
唾液乳桿 2-氯苯乙早老1Elisa
泡囊短波單胞 占噸酮µ型受體Elisa
康氏木霉 N-芐氧羰基-BETA-氨基-D-氨酸類缺陷病2Elisa