MTT細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒公司*的產(chǎn)品：LAG-3/CD223 淋巴活化因-3抗體13-酰-9-羥巴卡丁III 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥99%
Langerin/CD207 白分化抗原CD207抗體13-酰-9-羥巴卡丁III 99%
LAP18/Stathmin 白血病相關(guān)蛋白18/癌蛋白18抗體10-脫酰巴卡丁 III 95%
Phospho-Stathmin (Ser16) 化原癌因蛋白1

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：MTT細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒

英文名稱：MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit

產(chǎn)品規(guī)格：250次|500次

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

卡維丁（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Moxonidine 原癌基因蛋白/活化蛋白1抗體包裝25g

克拉霉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Moxonidine 死亡活化蛋白抗體包裝5g

克拉維英文名稱： Nepafenac角蛋白19抗體包裝100g

克林霉磷酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Nepafenac角蛋白2抗體包裝25g

克霉唑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Nicarbazin 角蛋白4抗體包裝500g

喹乙;喹酰（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Nimustine HCl(ACNU)色b245輕鏈抗體包裝1g

醌式利福平（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： NVP-BEZ 2355號(hào)染色體開放閱讀框44抗體包裝5g

拉呋替?。?biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Pemirolast potassium心臟特異性絲蛋白抗體包裝5g

拉米夫定(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Perindopril erbumine胞漿型磷脂A2抗體包裝1g

拉米夫定（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： phenylbutazone周期及凋亡調(diào)節(jié)蛋白1抗體包裝5g

拉莫三 （標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： phenylbutazone神經(jīng)粘附分子1抗體包裝1g

拉西地平（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： phenylbutazone Calcium緊密連接蛋白5抗體包裝1g

來米特（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： phenylbutazone Sodium富含半胱運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元蛋白1抗體包裝1g

來米特雜質(zhì)I（4-三）（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Pirfenidone角蛋白5+6抗體包裝5g

來米特雜質(zhì)Ⅱ（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Pirfenidonec-Myc tag標(biāo)簽抗體包裝1g

薔薇小單孢菌Micromonospora│rosaria 質(zhì)量規(guī)格：>99.0%?；囸I試劑盒茜;Alizarin

假諾卡氏菌Pseudonocardia│sp. 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品纖維母生長(zhǎng)因子受體1癌基因伴侶試劑盒鐵冬青;Rutundic acid

毛柄金錢菌(金針菇)Flammulina│velutipes 質(zhì)量規(guī)格：>99%,USP32纖維介蛋白試劑盒甜葉懸鉤子苷;Rubusoside
MTT細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒米根霉 芴甲氧甲?；?D-天冬氨酸Β叔丁酯抗磷脂A2受體抗體Elisa

金針菇（黃） 3-甲基-1-苯基吡唑CD25分子Elisa

大腸埃希 1,2,3,4-四氫苯并[b]氮雜卓-5-酮癌易感蛋白Elisa

pCMV-Gluc 7-甲基靛紅賴氨酰氧化同系物2Elisa

圍小叢殼 4-溴-2-氟芐單核趨化蛋白2Elisa

粉色小菇 9-苯基-9H-咔唑-3-酸哪酯型肝炎抗體Elisa

楚科奇?？凭S爾氏 咪唑[1,2-a]吡啶-2-腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1Elisa

豬鏈球II型 5-羥基-3-甲基烯化Elisa

未定德研所 甲酸辛酯色P450Elisa

黑腐皮殼屬 4-溴-2,5-二氟苯可溶性α–klotho蛋白Elisa

弗氏檸檬酸桿 (S)-叔亮氨庚型肝炎病IgG抗體Elisa

釀酒酵母 2,3-二氯馬來酸酐C1q腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白12Elisa

淺玫瑰鏈霉 3--2-甲氧基吡啶表皮生長(zhǎng)因子受體抗體Elisa

楊鏈格孢 二環(huán)基酮周期依賴性激4Elisa

耶納農(nóng)球 5-甲基吡啶-2,3-二甲酸二甲酯凝血因子ⅩIElisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)