產(chǎn)品屬性:
中文名稱:DPP-4抑制劑(Alogliptin Benzoate)
英文名稱:Alogliptin Benzoate
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
Alogliptin benzoate(SYR322)是高活性DPP-4抑制劑,IC50<10nM,比對DPP-8和DPP-9的抑制性高10000倍。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:850649-62-6 別名:SYR 322 純度:99.93% 分子式:C??H??N?O? 分子量:461.51 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
黃褐環(huán)銹傘谷酰1抗體Human TRPC4 ELISA Kit大鼠凋亡調(diào)節(jié)因子BAX(BAX)免疫試劑盒
約氏黃桿菌G蛋白偶聯(lián)受體GPR161蛋白抗體Human TRPA1(Transient receptor potential cation channel subfamily A member 1) ELISA Kit大鼠硒蛋白P(SEPP1)免疫試劑盒
榛色假單胞菌G蛋白偶聯(lián)受體GPR180蛋白抗體Human TSFM ELISA Kit大鼠戊糖(Pentosidine)免疫試劑盒
大腸埃希氏桿菌G蛋白通路抑制物蛋白2抗體Human TSG101(Tumor susceptibility gene 101 protein) ELISA Kit大鼠五聚3(PTX3)免疫試劑盒
埃里希青霉G蛋白偶聯(lián)受體GPR177蛋白抗體Human TRPM6 ELISA Kit大鼠胃泌調(diào)節(jié)免疫試劑盒
Chitinophaga sancti G蛋白偶聯(lián)受體GPR89A蛋白抗體Human TSGA10 ELISA Kit大鼠胃泌(Gastrin)免疫試劑盒
雙孢蘑菇G蛋白偶聯(lián)受體GPRSP2蛋白抗體Human PDE10A(cAMP and cAMP-inhibited cGMP 3′,5′-cyclic phosphodiesterase 10A) ELISA Kit大鼠胃動受體(MTLR)免疫試劑盒
節(jié)桿菌屬G蛋白偶聯(lián)受體GPRC5C蛋白抗體Human TSGA13 ELISA Kit大鼠胃動(MTL)免疫試劑盒
秦氏蜜環(huán)菌G蛋白偶聯(lián)受體結(jié)合蛋白α14/Gα 14 抗體Human TRPM8(Transient receptor potential cation channel subfamily M member 8) ELISA Kit大鼠胃蛋白(PG)免疫試劑盒
賈巴爾普爾毛殼G蛋白β樣蛋白抗體Human TRPS1 ELISA Kit大鼠維生K1(VK1)免疫試劑盒
哈茨木霉G蛋白β5/Gβ 5 抗體Human TRPT1 ELISA Kit大鼠維生E(VE)免疫試劑盒
炭黑曲霉G蛋白γ13/Gγ13 抗體Human TRMT5 ELISA Kit大鼠維生D結(jié)合蛋白(DBP)免疫試劑盒
海洋桿菌G蛋白γ5/Gγ5 抗體Human TSHZ3 ELISA Kit大鼠維生D3(VD3)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌G蛋白γ 1/Gγ 1 抗體Human TRMT6 ELISA Kit大鼠維生D2(VD2)免疫試劑盒
瑟氏泰勒蟲(成縣株)鳥嘌呤核苷結(jié)合蛋白2抗體Human TRNAU1AP/SECP43 ELISA Kit大鼠維生D(VD)免疫試劑盒
秦氏蜜環(huán)菌鳥嘌呤核苷結(jié)合蛋白3樣蛋白抗體Human TNFRSF6B(Tumor necrosis factor receptor superfamily member 6B) ELISA Kit大鼠維生C(VC)免疫試劑盒
: ATCC11758資源名稱: 草分枝桿菌 質(zhì)量規(guī)格:40-60目,氣相、液相色譜柱絞股藍(lán)皂苷XLIX
木賊鐮刀菌Gibberella│intricans Wollenw. 質(zhì)量規(guī)格:60-80目,氣相、液相色譜柱棕櫚
大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:80-100目,氣相、液相色譜柱連翹酯苷B
DPP-4抑制劑(Alogliptin Benzoate)白頭翁皂苷E英文名稱: Nickel (II) fluoride tetrahydrate上皮膜蛋白3抗體包裝5g
白頭翁皂苷E-1英文名稱: Silicon (IV) oxide膜蛋白EVC2抗體包裝1g
白頭翁皂苷E-2英文名稱: Strontium fluoride哺乳動物室管膜相關(guān)蛋白1抗體包裝5g
白頭翁皂苷E-3英文名稱: Syringaldehyde內(nèi)皮粘附分子抗體包裝10g
白土苓(短柱肖菝契)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tetrazolium violet上皮有絲分裂蛋白抗體包裝50g
白土苓(華南肖菝葜)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2-MethylindoleEmerin蛋白抗體包裝25g
白薇(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Aluminum ammonium sulfate, dodecahydrate外信號調(diào)節(jié)激5抗體包裝5g
白鮮堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: AMP buffer concentrate磷/磷二酯家族成員5抗體包裝1g
白鮮皮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Benzimidazole早期生長反應(yīng)蛋白2抗體包裝25g
白楊(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Carboxypeptidase B磷化雌受體β抗體包裝5g
白楊-7-O-龍膽二糖苷英文名稱: Cobalt (II) carbonate, hydrate乙激β抗體包裝1g
白英(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: dTDP微管相關(guān)末端結(jié)合蛋白2抗體包裝5g
白芷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Galactose oxidase減數(shù)分裂內(nèi)切EME1抗體包裝1g
百部(對葉百部)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Iron (II) oxalate, dihydrate延伸突觸蛋白2抗體包裝25g
百部(直立百部)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Lead (II) chloride延伸突觸蛋白1抗體包裝5g
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)