詳細(xì)介紹
商品介紹:
SYTO 綠色活細(xì)胞核酸染料( Ex/Em: 500/530 nm, bound to DNA)是一種具有細(xì)胞膜透性的核酸染料,其在于核酸結(jié)合之后熒光強(qiáng)度會得到顯著增強(qiáng)。SYTO 綠色活細(xì)胞核酸染料可以用于染死的或者活的真核細(xì)胞的RNA 和DNA,在革蘭氏細(xì)菌中同樣也適用。新型SYTO 綠色活細(xì)胞核酸染料具有如下重要特性: 細(xì)胞膜透性,可以穿過幾乎所有的細(xì)胞膜,包括哺乳動物細(xì)胞和細(xì)菌。 摩爾吸光系數(shù)高,可見吸收光譜消光系數(shù)> 60,000 cm-1M - 1。 極低的熒光背景,未與核酸結(jié)合時(shí),染料的量子產(chǎn)率通常<0.01。 與核酸結(jié)合之后,量子產(chǎn)率通常> 0.4。 SYTO 綠色活細(xì)胞核酸染料可以在不同的實(shí)驗(yàn)應(yīng)用中染活細(xì)胞或者固定細(xì)胞的核酸,能夠與配備了常規(guī)激光激發(fā)器或?qū)拵д彰鞴庠吹母鞣N熒光檢測設(shè)備匹配。 儲存:-20℃,避光,有效期6個(gè)月。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
500μL | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時(shí)內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
酰次烏頭原堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Myokinase癌基因ERG3抗體包裝1g
?;昝仔?/span>O英文名稱: Phosphodiesterase II from Bovine Spleen豬源產(chǎn)腸性大腸桿菌K88-K99抗體包裝25g
酰芍藥苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: SuccinimideFAS凋亡抑制分子3抗體包裝5g
酰烏頭原堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 5-Bromouridine纖維束1抗體包裝25g
酰新烏頭原堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: ADA buffer, disodium salt叉頭蛋白P3抗體包裝5g
酰氧化芍藥苷英文名稱: Albumin, from bovine Protease free免疫球蛋白G Fc段受體I包裝1g
比靈,右旋荷包牡丹堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Aluminum stearate叉頭蛋白M1抗體包裝5g
蓽茇(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Bismuth(III) nitrate pentahydrate磷化雷帕霉靶蛋白抗體包裝500ml
蓽澄茄(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Calcium phosphate, dibasic, dihydrate磷化粘著斑激抗體包裝100ml
蓖麻子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cerium(III) carbonate, hydrate絲聚合蛋白/中間絲蛋白抗體包裝25ml
蝙蝠葛堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Chymotrypsinogen A肺鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白抗體(C端)包裝10g
蝙蝠葛諾林堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cibacron blue 3G-A凝血因子13抗體(纖維蛋白穩(wěn)定因子)包裝50g
蝙蝠葛蘇林堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: DEAE Dextran濾泡樹突分泌蛋白抗體包裝25g
扁柏雙黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fluridone纖維母生長因子13抗體包裝5g
扁桃苷/苦杏仁苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Histamine骨骼肌肌球蛋白輕鏈2抗體包裝100g
淺灰鏈霉菌Streptomyces│griseolus 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR瘦試劑盒染料木;Genistein
白乳菇Lactarius│piperatus (L.) Pers. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品受體型酪蛋白磷樣N試劑盒;
鴨瘟病毒Alphaherpesvirinae│Duck plague virus 質(zhì)量規(guī)格:≥99.0%受體TNFRSF結(jié)合絲蘇激2試劑盒七葉皂苷 IIb;Escin IIb
活細(xì)胞核酸染料-綠菁SYT黃桿 甲基四氫苯二甲酸酐(4:6)隱球Elisa
炭疽芽孢桿 1-苯基-4-甲基-3-吡唑烷酮B類清道夫受體2Elisa
盤孢屬 3,3-二甲基-2,3-二氫-1H-茚-1-酮白介28BElisa
孢小克銀漢霉原變種 溶劑橙2肽基精氨酸脫亞氨4Elisa
枯草芽孢桿 2,4-二氯吡啶微粒體甘油三酸酯轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白大亞基Elisa
泰國鹽球 對甲苯磺酰甘氨酸甲酯肝X受體βElisa
戴爾根霉 3-溴-5-氯-2-氟吡啶法尼酯X受體Elisa
泰國放線短鏈孢 鄰甲苯基縮水甘油?;?膽固酰基轉(zhuǎn)移Elisa
根瘤 肼單鹽酸鹽趨化因子c-c-基元配體19Elisa
弗蘭克氏 異煙酰乙酸乙酯α-pro-GDNFElisa
蘇云金芽孢桿蠟螟亞種 1-酸β-pro-GDNFElisa
賴氨酸芽胞桿屬 2-溴-1-(2,4-二基)乙酮豬肉銚蟲Elisa
中華靈芝(紫芝) 5-氟-2-甲氧基煙酸著絲粒蛋白Elisa
瓶形毛殼 4-溴-3-氟苯磺酰狼瘡抗凝IgG抗體Elisa
海洋桿 α--3,4-二氯苯乙酮狼瘡抗凝IgM抗體Elisa