商品介紹:
Indomethacin是一種COX1和COX2的非選擇性抑制劑,常用于治療發(fā)熱、疼痛、僵硬、腫脹等癥狀。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):53-86-1 別名:Indometacin 純度:98.0% 分子量:357.79 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:COX1和COX2抑制劑(Indomethacin)
英文名稱:Indomethacin
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1g|5g
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
乳酒假絲酵母α1,4-N-乙酰葡糖轉(zhuǎn)移α4Gn-T抗體Human KTN1 ELISA Kit小鼠微管蛋白β3(TUBB3)免疫試劑盒
南海區(qū)交替紅色桿菌芳香乙酰脫乙?;贵wHuman LAMR1/RPSA ELISA Kit小鼠網(wǎng)膜(omentin)免疫試劑盒
路氏腸桿菌芳香乙酰脫乙酰基樣蛋白4抗體Human LANCL1 ELISA Kit小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌基乙二半脫氫磷泛酰巰基乙轉(zhuǎn)移抗體Human Langerin ELISA Kit小鼠脫氧膠原吡啶交聯(lián)(DPD)免疫試劑盒
融粘帚霉賴戊二還原抗體Human KRT81 ELISA Kit小鼠脫氫表雄硫酯(DHEA-S)免疫試劑盒
F56(蘑菇)錨蛋白重復(fù)域6抗體Human KRT80 ELISA Kit小鼠脫氫表雄(DHEA)免疫試劑盒
黃薄芝精2抗體Human KRT6B ELISA Kit小鼠褪黑(MT)免疫試劑盒
食芽胞桿菌固還原家族1成員C3抗體Human KPNA5 ELISA Kit小鼠突觸融合蛋白2(STX2)免疫試劑盒
大腸埃希菌促腎上腺皮質(zhì)激受體Human KPNA4(Karyopherin subunit alpha-4) ELISA Kit小鼠突觸融合蛋白1A(STX1A)免疫試劑盒
肉色曲霉褐黑相關(guān)蛋白ART抗體Human KPNA6(Karyopherin subunit alpha-6) ELISA Kit小鼠透明質(zhì)結(jié)合蛋白(HABP)免疫試劑盒
中溫富鹽菌腎上腺皮質(zhì)線粒體鐵氧還蛋白抗體Human KPTN ELISA Kit小鼠透明質(zhì)(HA)免疫試劑盒
深褐褶菌Allgrove綜合征相關(guān)蛋白抗體Human KRAP/SSFA2 ELISA Kit小鼠銅藍(lán)蛋白(CP/CER)免疫試劑盒
中國(guó)臺(tái)灣根霉腺相關(guān)病5 VP1抗體Human KRAS(GTPase KRas) ELISA Kit小鼠同型半胱(Hcy)免疫試劑盒
禽腺病Ⅶ型脂肪脫氫抗體Human KLHDC5 ELISA Kit小鼠鐵調(diào)(Hepc)免疫試劑盒
木賊鐮孢抗利尿激1A抗體Human KRR1 ELISA Kit小鼠鐵蛋白(FE)免疫試劑盒
富養(yǎng)羅爾斯通氏菌抗利尿激受體1B抗體Human KRI1 ELISA Kit小鼠天門(mén)冬基轉(zhuǎn)移(AST)免疫試劑盒
: AS3.2835資源名稱: 串珠鐮孢 質(zhì)量規(guī)格:BR白三烯C4試劑盒8-香葉草氧基補(bǔ)骨脂
杉木假單胞菌Pseudomonas│cunninghamiae 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR白三烯B4試劑盒熊果乙酯
堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿菌Bacillus│firmus 質(zhì)量規(guī)格:分子生物學(xué)級(jí)白介增強(qiáng)子結(jié)合因子2試劑盒細(xì)辛
COX1和COX2抑制劑(Indomethacin)鬧羊花III英文名稱: Emodin低密度脂蛋白受體的誘導(dǎo)降解蛋白抗體包裝25g
鬧羊花V英文名稱: Rhein鋅指蛋白144抗體包裝5g
鬧洋花(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Rhein生肌決定因子Myf5抗體包裝100g
擬人參皂苷F11(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Rhein-8-O-β-D-glucopyranoside磷化生肌決定因子Myf5抗體包裝25g
擬人參皂苷Rh2(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pectolinarin黑皮質(zhì)2受體輔助蛋白2抗體包裝500g
擬人參皂苷RT5(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Hordenine金屬硫蛋白3抗體包裝1g
鳥(niǎo)苷英文名稱: Danshensu絲裂原活化蛋白激MAP4K6抗體包裝5g
尿囊(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Danshensu擬南芥MAP65蛋白抗體包裝5MG
檸檬苦,黃柏內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品,橙皮提取)英文名稱: Sodium Danshensu神經(jīng)干RNA結(jié)合蛋白Musashi1抗體包裝1g
檸檬苦;吳茱萸內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品,吳茱萸提取)英文名稱: Tanshinone I粘膜粘附分子1抗體包裝5g
牛白藤(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tanshinone I髓過(guò)氧化物抗體包裝1g
牛蒡苷元(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tanshinone IIA膜相關(guān)鳥(niǎo)苷反轉(zhuǎn)激1抗體包裝25g
牛蒡子(牛蒡子)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tanshinone IIA神經(jīng)突觸前膜胞內(nèi)蛋白13抗體包裝5g
牛蒡子苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tanshinone IIA-sulfonic sodium高度保守基因相關(guān)蛋白Membralin抗體包裝100g
牛蒡子苷元-4'-O-β-龍膽二糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Salvianolic acid A運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元及胰腺同源蛋白1抗體包裝25g