商品介紹:
Upadacitinib(ABT-494)是一種高效,有選擇性的JAK1抑制劑,用于治療一些自身免疫性疾病,IC50值為43nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1310726-60-3 別名:ABT-494 純度:99.40% 分子量:380.37 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
芽孢桿菌二磷腺苷核糖基化因子鳥嘌呤核苷交換因子2抗體Human KLHDC4 ELISA Kit小鼠糖原磷化同工MM(GP-MM)免疫試劑盒
孢吸水鏈霉菌α增強(qiáng)子結(jié)合蛋白1抗體Human KLHL32 ELISA Kit小鼠糖原磷化同工II(GP-II)免疫試劑盒
荷葉蘑脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)10抗體Human KLHL35 ELISA Kit小鼠糖原磷化同工BB(GP-BB)免疫試劑盒
多欄純潔桿菌蛋白激A錨定蛋白7抗體Human KLHL34 ELISA Kit小鼠糖原合成激(GSK)免疫試劑盒
蘇云金芽孢桿菌庫爾斯塔克亞種腺苷三磷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體12抗體Human KRT12 ELISA Kit小鼠糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白(CDT)免疫試劑盒
Arthrobacter腺苷三磷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體9抗體Human KLHL10 ELISA Kit小鼠糖皮質(zhì)類固受體(GR)免疫試劑盒
弗雷德里克斯堡假單胞菌三磷腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運蛋白4抗體Human KRT33B ELISA Kit小鼠糖皮質(zhì)激受體β(GR-β)免疫試劑盒
孢小克銀漢霉肌動蛋白結(jié)合蛋白LIM3抗體Human KRT34 ELISA Kit小鼠糖皮質(zhì)激受體α(GR-α)免疫試劑盒
球孢白僵菌高爾基復(fù)合體相關(guān)蛋白1抗體Human KRT36 ELISA Kit小鼠糖類抗原199(CA199)免疫試劑盒
暗灰鏈霉菌乙酰羧化1ACCα抗體Human KLHL4 ELISA Kit小鼠糖類抗原125(CA125)免疫試劑盒
釀酒酵母腺嘌呤核苷轉(zhuǎn)運蛋白1、2、3、4抗體Human KLHL9 ELISA Kit小鼠糖化血紅蛋白A1c(A1c)免疫試劑盒
芽孢桿菌去整合樣金屬蛋白12Human KLRF1 ELISA Kit小鼠糖蛋白130(gp130)免疫試劑盒
大腸桿菌磷化乙酰羧化1ACCα抗體Human KRT40 ELISA Kit小鼠碳酐2(CA-2)免疫試劑盒
卡爾斯巴德唯鹽菌膜粘連蛋白2受體抗體Human KPNA1 ELISA Kit小鼠碳酐1(CA-1)免疫試劑盒
單孢共頭霉晚期糖基化終末產(chǎn)物特異性受體抗體Human KLRG1 ELISA Kit小鼠胎球蛋白A(Fetuin A)免疫試劑盒
奇異球菌ADCK5蛋白抗體Human KLHL28 ELISA Kit小鼠胎盤生長因子(PLGF)免疫試劑盒
芽孢桿菌屬Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:38000~42000 mpa.s白介8試劑盒香葉
谷棒桿菌Corynebacterium│glutamicum 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR白介8試劑盒小檗紅堿硫酯
短桿菌Brevibacterium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,5N白介7試劑盒腺嘌呤
JAK1抑制劑(Upadacitinib)牛大力(美麗崖豆藤)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Salvianolic acid B少突膠質(zhì)髓鞘相關(guān)蛋白抗體包裝5g
牛膽粉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Salvianolic acid CCDC42結(jié)合蛋白激α抗體(MRCKα)包裝1g
牛耳楓(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Salvianolic acid D髓樣分化蛋白抗體包裝5g
牛黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cholesterol外周髓磷脂P0蛋白/P0蛋白抗體包裝100g
?;蛆Z去氧膽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cholesterol褪黑受體1A/松果體受體1A抗體包裝25g
牛膝(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cholic acid肌生成抗體包裝25g
牛至(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cholic acid磷化髓鞘轉(zhuǎn)錄因子1抗體包裝5g
扭肚藤(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: LobetyolinDNA損傷關(guān)鍵蛋白Mre11抗體包裝1g
女貞苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: α-mangostin磷化DNA損傷關(guān)鍵蛋白Mre11抗體包裝5g
女貞子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Diosimin蛋白激MST抗體包裝1g
諾米林(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Diosimin磷化蛋白激MST抗體包裝25g
糯稻根(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Momordin Ic磷化肌球蛋白輕鏈2抗體包裝5g
歐當(dāng)歸內(nèi)酯A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ziyuglycoside I髓鞘轉(zhuǎn)錄因子1抗體包裝1g
歐夾竹桃苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ziyuglycoside II髓樣白血病-1抗體包裝250mg
歐前胡(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Eugenol微管相關(guān)蛋白2抗體包裝5g