商品介紹:
用途: 可以將死細(xì)胞染成藍(lán)色,活細(xì)胞的液泡系呈紅色。 注意事項(xiàng): 液泡系包括高爾基復(fù)合體、溶酶體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、轉(zhuǎn)運(yùn)泡、吞噬泡等。中性紅是液泡系的專一活性染色劑,在細(xì)胞處于生活狀態(tài)時(shí),只將液泡系染成紅色,細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核不被染色。 儲(chǔ)存條件:室溫,12個(gè)月 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:中性紅-甲基藍(lán)染色液
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:100ml
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
梭砂貝母堿;湖貝(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Indoxyl acetateHOXB4抗體包裝100g
鎖陽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: α-Cyclodextrin磷化HER2受體抗體包裝25g
塔拉薩敏;塔拉烏頭(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Xanthine Oxidase from bovine milk組蛋白去乙?;?抗體包裝5g
苔黑酚龍膽二糖苷英文名稱: Acylase from Aspergilus sp.磷化組蛋白去乙酰化6抗體包裝5ml
苔黑酚葡萄糖苷;地衣二葡萄糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Trypsin 1:250 fromPorcine pancreas組蛋白去乙酰化7抗體包裝1g
太子參(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Trypsin 1:2500 from Porcine pancreas磷化組蛋白去乙?;?抗體包裝250mg
太子參環(huán)肽B(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Alibendol組蛋白去乙酰化8抗體包裝1g
檀香(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ribonuclease A from bovine pancreas磷化HER4抗體包裝5g
唐古特大黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pyridoxal 5-phosphate組tRNA連接抗體包裝1g
桃金娘根(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Coenzyme II reduced tetrasodium salt(NADPH)雞新城疫血凝-神經(jīng)抗體包裝25g
桃仁(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Coenzyme II reduced tetrasodium salt(NADPH)熱休克蛋白105抗體包裝5g
桃仁(山桃)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Glucose oxidase肝核因子1α抗體包裝25g
桃葉干浸膏(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Lysozyme,from egg white缺氧誘導(dǎo)因子1β /HIF-1β抗體包裝5g
桃葉珊瑚苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Peroxidase, Horseradish(HRP)熱休克轉(zhuǎn)錄因子2抗體包裝1g
桃枝(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: HyaluronidaseHA tag標(biāo)簽抗體包裝5g
栗疫菌Cryphonectria│parasitica (Murrill) M. E. Barr 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品膜聯(lián)蛋白Ⅴ試劑盒萊苞迪甙A;Rebaudioside A
黃色赤桿菌Erythrobacter│flavus 質(zhì)量規(guī)格:含量≥670µg/mg膜聯(lián)蛋白Ⅴ試劑盒龍腦 ;Borneol
魯氏不動(dòng)桿菌Acinetobacter│lwoffii 質(zhì)量規(guī)格:>99%膜聯(lián)蛋白Ⅳ試劑盒硫軟骨;Chondroitin 4-
中性紅-甲基藍(lán)染色液醋酸桿科 1,4-二代丁烷無翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員7BElisa
彎孢 2-羥基苯絲氨酸蛋白1Elisa
粉紅單端孢 鄰氨基苯酸鹽酸鹽易洛魁族同源盒基因5Elisa
紋孢青霉 三羧酸三乙酯接觸蛋白相關(guān)蛋白樣4Elisa
繩狀青霉 乙二二硬脂酸受體相互作用蛋白1Elisa
傳染性法氏囊病病 氟化氫吡啶絡(luò)合物受體相互作用蛋白3Elisa
發(fā)酵乳桿 3-(三氟甲氧基)苯甲酰氯過氧化物4Elisa
紐纏叢梗孢 二乙氫鹽,98%檢測(cè)Arl6ip5Elisa
孟氏假單胞 4-溴-2-(三氟甲基)苯甲肝癌源性生長(zhǎng)因子Elisa
假單胞屬 N-烯自噬相關(guān)蛋白5Elisa
松生擬層孔 Fmoc-Leu-OPfp自噬相關(guān)蛋白7Elisa
蘇云金芽孢桿 N-甲基正β-己糖亞基αElisa
運(yùn)動(dòng)發(fā)酵單胞運(yùn)動(dòng)亞種 6-羥基-2H-苯并呋喃-3-酮亞硝基還原Elisa
諾卡氏屬 FMOC-L-纈氨酸五氟苯酯補(bǔ)體成分1q受體Elisa
黃單胞 2-氯-6-硝基喹喔啉腎母過度表達(dá)基因Elisa