商品介紹:
Saxagliptin(BMS477118)是選擇性可逆的DPP4抑制劑,IC50和Ki分別為26nM和1.3nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):361442-04-8 別名:BMS-477118 純度:98.03% 分子式:C??H??N?O? 分子量:315.41 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
*櫻桃鏈格孢環(huán)化核苷調(diào)控陽離子通道蛋白亞型4Human SLC7A4 ELISA Kit大鼠α干擾(IFN-α)免疫試劑盒
漢遜德巴利酵母HEAT重復(fù)內(nèi)含蛋白8蛋白抗體Human SLC5A3 ELISA Kit大鼠α-輔肌動(dòng)蛋白1(ACTN-1)免疫試劑盒
稀疏鏈霉菌稀疏變種雄激調(diào)節(jié)樣蛋白抗體Human SLTM ELISA Kit大鼠αL巖藻糖苷(AFU)免疫試劑盒
芽孢桿菌雄激調(diào)節(jié)蛋白2抗體Human SLC6A8 ELISA Kit大鼠α2巨球蛋白(α2-MG)免疫試劑盒
三葉草根瘤菌角化蛋白S100A18抗體Human SLC38A3 ELISA Kit大鼠α2-HS糖蛋白(AHSG)免疫試劑盒
產(chǎn)黑色鏈霉菌型肝炎病NS4B抗體Human SLC38A4 ELISA Kit大鼠α1微球蛋白(α1-MG)免疫試劑盒
黃桿菌異質(zhì)性核糖核蛋白C1/C2抗體Human SLC9A11 ELISA Kit大鼠α1性糖蛋白(α1-AGP)免疫試劑盒
藍(lán)色犁頭霉異質(zhì)性核糖核蛋白RHuman SLC3A1 ELISA Kit大鼠α1抗前體(pre-α1-AT)免疫試劑盒
白地霉同源相互作用蛋白激4抗體Human SLC9A9 ELISA Kit大鼠VGF神經(jīng)生長因子誘導(dǎo)蛋白(VGF)免疫試劑盒
球毛殼菌肝輔助因子II抗體Human SLCO6A1 ELISA Kit大鼠U型肌激,線粒體(CKMT1A)免疫試劑盒
鉤狀木霉組蛋白替換精蛋白DGGR1抗體Human SLC43A1 ELISA Kit大鼠T活化核因子5(NFAT5)免疫試劑盒
鏈格孢屬透明質(zhì)及粘蛋白4抗體Human SLC44A1 ELISA Kit大鼠Toll樣受體9(TLR9)免疫試劑盒
綠葉假單胞菌神經(jīng)特異性鈣結(jié)合蛋白抗體Human SLCO4C1 ELISA Kit大鼠Toll樣受體7(TLR-7)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌無毛發(fā)蛋白抗體Human APC(Adenomatous polyposis coli protein) ELISA Kit大鼠Toll樣受體4(TLR4)免疫試劑盒
東方伊薩酵母心臟和神經(jīng)嵴衍生蛋白2抗體Human SLC45A2 ELISA Kit大鼠toll樣受體3(TLR3)免疫試劑盒
短小芽孢桿菌乙?;M蛋白H4(K16)抗體Human SLC47A1 ELISA Kit大鼠toll樣受體1(TLR1)免疫試劑盒
粉狀畢赤酵母Pichia│farinosa 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品芹菜-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷
馬腺疫鏈球菌獸疫亞種Streptococcus│equi subsp.zooepidemicus 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=5%川續(xù)斷皂苷VI
短芽孢桿菌Bacillus│brevis 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品異甘草
DPP4抑制劑(Saxagliptin)AR 雄激受體抗體地美環(huán)鹽鹽 分析標(biāo)準(zhǔn)品
phospho-Androgen Receptor (Ser580) 化雄激受體抗體地美環(huán)鹽鹽 ≥90% (HPLC)
phospho-Androgen Receptor (Ser595) 化雄激受體抗體順式-4,7,10,13,16,19-二十二碳六烯酯 90%
ARHI ARHI蛋白抗體順式-4,7,10,13,16,19-二十二碳六烯酯 99%
AKR1B1 糖還原抗體6,7-二羥 ≥98%
ARC ARC抗體四丁氫氧化銨,30水 98%
ARF6 ADP核糖化因子6抗體p, p’-DDE 分析標(biāo)準(zhǔn)品
Arfaptin 1 ADP核糖化因子結(jié)合蛋白1抗體2,4-滴異辛酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品