商品介紹:
用途: 細(xì)胞學(xué)樣本常規(guī)染色,尤其適用于婦科細(xì)胞學(xué)涂片染色、細(xì)胞脫落標(biāo)本染色。 注意事項(xiàng): OG6與EA50或EA36聯(lián)合使用,可以將細(xì)胞漿染成鮮明的綠色、藍(lán)色、粉色。注意密閉干燥保存。 儲(chǔ)存條件:室溫,12個(gè)月 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
橘黃G6染色液 |
| 100ml|500ml | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
特女貞苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Aprotinin缺氧誘導(dǎo)基因1蛋白抗體包裝100ml
藤合歡(南蛇藤果)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): E64人絨毛膜促性腺激α 亞基單抗包裝25ml
藤黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Azilsartan Medoxomil人乙型肝炎表面抗原單克抗體(檢測(cè))包裝500ml
藤黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): α-Amylase人乙型肝炎e抗原單克(包被)抗體包裝5g
替寧(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Chymotrypsin人乙型肝炎e抗原單克(檢測(cè))抗體包裝25g
天花粉(栝樓)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Acetyl coenzyme A trilithium salt小鼠抗人血紅蛋白單克抗體包裝5g
天麻(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Urease型流感病血凝抗體包裝1g
天麻(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Protease type VIII磷化HER2受體抗體包裝5g
天名精(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Triamcinolone Acetonide組蛋白去乙?;?抗體包裝1g
天南星(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Triamcinolone Acetonide磷化HER2受體抗體包裝5g
天山雪蓮 (標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): β-NADH.hydrate磷化組蛋白去乙?;?抗體包裝1g
天仙藤(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Suramin sodiumHLA-DR抗體包裝5g
甜菜堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Elastase, pancreatic from porcine pancreas人類(lèi)白抗原G抗體包裝1g
甜茶(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Lipase高遷移率族蛋白A2抗體包裝1g
甜茶苷;甜葉懸鉤子苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Xylanase from Trichoderma viride 高遷移率族蛋白B1抗體包裝25g
型副傷寒沙門(mén)氏菌Salmonella│paratyphi A 質(zhì)量規(guī)格:>99%膜聯(lián)蛋白Ⅲ試劑盒L-亮 ;L-Leucine
分散泛菌Pantoea│dispersa 質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR膜聯(lián)蛋白Ⅱ試劑盒硫基葡萄糖;Glucosamine
牡丹枝孢(牡丹葉霉病菌)Cladosporium│paeoniae 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品膜聯(lián)蛋白Ⅰ試劑盒辣椒堿;Capsaicin
橘黃G6染色液嗜熱脂肪地球芽胞桿 2-氯乙基氯甲酸酯脯氨酸羥化1Elisa
盤(pán)長(zhǎng)孢狀盤(pán)孢 Fmoc-天門(mén)冬氨酸-β-芐酯脯氨酸羥化2Elisa
凍干粉 腸道出血性大腸埃希氏(EHEC)(陽(yáng)性) 脲脯氨酸羥化3Elisa
枯草芽孢桿枯草亞種 羥基吡鏈球抗體Elisa
假單胞 (乙基硫代)乙酸A群輪狀病Elisa
黃硬皮馬勃 Fmoc-L-天冬氨酸-1-芐酯腸腺病Elisa
粉紅單端孢霉 4-氯酸Anoctamin-1蛋白Elisa
光帽磷傘 己酸正酯抗酸性磷酸2bElisa
枯草芽孢桿 3-(5-乙基-1,2,4-噁二唑-3-基)高親和力IgE受體a鏈Elisa
Polyangium fumosum 7-氨基庚酸鹽酸鹽II型鏈球抗體Elisa
冷解糖芽孢桿 3,5-二溴抗內(nèi)因子抗體Elisa
普氏 (S)-(+)-1-芐氧基-2-谷氨酸脫氫2Elisa
多主葡萄殼 3,5-二溴苯17α羥孕酮Elisa
釀酒酵母 1,2-環(huán)己二甲酸酐多配體蛋白聚糖2Elisa
少根根霉 1,3-二苯叉頭蛋白O3αElisa