詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
500ml | 1~3天 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
用途: 又稱促藍液,用于蘇木素染色后藍化,尤其推薦用于Gill'sⅢ藍化蘇木素藍化。 注意事項: 主要由硫酸鎂、碳酸氫鈉等組成。 儲存條件:室溫,12個月 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
沙棘(標準品)英文名稱: Oroxin B激-M2包裝100g
沙棘膏(標準品)英文名稱: Fosfomycin tromethamine間皮抗體包裝25g
沙苑子(標準品)英文名稱: Fosfomycin tromethamine基質(zhì)金屬蛋白-1抗體包裝100g
沙苑子苷(標準品)英文名稱: Cynaroside基質(zhì)金屬蛋白-1抗體包裝25g
沙苑子苷A(標準品)英文名稱: Costundide基質(zhì)金屬蛋白13抗體包裝5g
砂仁(陽春砂)(標準品)英文名稱: Pseudoginsenoside F11基質(zhì)金屬蛋白-14抗體包裝100ml
山茶甙A英文名稱: Pseudoginsenoside RT5基質(zhì)金屬蛋白2抗體包裝25ml
山茶甙B英文名稱: Allantoin基質(zhì)金屬蛋白3抗體包裝250mg
山茶苷A英文名稱: Limonin基質(zhì)金屬蛋白-7抗體包裝100mg
山豆根(標準品)英文名稱: Limonin基質(zhì)金屬蛋白-9抗體包裝1g
山風(標準品)英文名稱: Limonin髓鞘少樹突膠質(zhì)糖蛋白抗體包裝500mg
山姜(標準品)英文名稱: Stearic acid多藥耐藥相關蛋白1抗體包裝10MG
山橿根(標準品)英文名稱: Stearic acid多藥耐藥相關蛋白2抗體包裝50MG
山臘梅葉(標準品)英文名稱: Arctigenin多藥耐藥相關蛋白3抗體包裝100g
山蠟梅堿英文名稱: Arctiin線粒體核糖體蛋白L28抗體包裝25g
棒桿菌Corynebacterium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:純度≥98.0%抗表皮基底膜抗體試劑盒大葉茜草;Rubimaillin
鏈格孢Alternaria│sp. 質(zhì)量規(guī)格:≥850 μg/mg,BR抗斑疹傷寒抗體試劑盒大黃;Emodin
新城疫病毒Rubulavirus│Newcastle disease virus 質(zhì)量規(guī)格:標準品用于含量測定抗白色念珠菌試劑盒膽維他;Anethole trithio
Scott藍化液沙漠畢赤酵母 2-氨基-4,5-二甲基噻酚-3-羧酸乙酯谷氨酸脫氫Elisa
灰色鏈霉 2,4-二氟-3-甲谷氨酰Elisa
點枝頂孢 3-甲基烯酰基苯酸Elisa
阿舒假囊酵母 烯酸十八酯S轉(zhuǎn)移A1Elisa
朱紅叢赤殼 2,4-二氟-3-S轉(zhuǎn)移Mu1Elisa
*蟲擬蠟 苯并氧化呋咱過氧化Elisa
棒彎孢 1-Cbz-氨基環(huán)烷羧酸巰基轉(zhuǎn)移Elisa
白腐 可可提取物骨保護Elisa
炭疽盤孢 顏料紅254骨成型蛋白2Elisa
仁果叢梗孢 N-Boc-N'-Fmoc-L-賴氨酸骨成型蛋白4Elisa
枯草芽孢桿 4-氟-3-甲?;浅尚偷鞍?Elisa
冷海希瓦氏 1-溴-3-氟-5-苯骨成型蛋白7Elisa
費氏中華根瘤 2-溴-6-氟苯甲骨鈣Elisa
肉座屬 5-羥甲基-1-甲基-1H-吡唑骨堿性磷酸Elisa
大黃歐文氏 5-氨基-6--2-酚骨橋Elisa