產(chǎn)品屬性:
中文名稱:RIP1抑制劑(GSK2982772)
英文名稱:GSK2982772
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
GSK2982772是有效,ATP競爭型的RIP1抑制劑,IC50值為16nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1622848-92-3 純度:98.0% 分子量:377.4 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
17-Oxo倍他米松英文名稱: 2-(4-tert-Butylphenyl)pyridine果膠抗體包裝100g
17-雌二英文名稱: 4-(N,N-Diphenylamino)benzaldehydePRPF4蛋白抗體包裝1g
17-去乙酰基諾孕酯英文名稱: Tris(4-iodophenyl)amine青霉G抗體包裝25g
17-去乙酰羅銨英文名稱: Bindschedler's Green Leuco Base磷酯Cβ1抗體包裝5g
17-基英文名稱: Bis(4-iodophenyl)amine富含脯/絲卷曲螺旋蛋白1抗體包裝100g
17β-羧替卡松英文名稱: 4-(Diethylamino)benzaldehyde DiphenylhydrazoneNADPH氧化活化蛋白p47抗體包裝25g
1氫-1-乙基坎地沙坦酯英文名稱: 1,1'-Dinaphthylamine蛋白體PRS7抗體包裝500g
2',3'-O-異亞級-6-核苷巰基嘌呤英文名稱: 2,2'-Dinaphthylamine蛋白體PSMα1抗體包裝100g
2',3'-亞異基腺苷英文名稱: 1,2'-Dinaphthylamine (purified by sublimation)蛋白體PSMα2抗體包裝25g
2'-O-(2-氧乙基)腺苷英文名稱: N,N',N''-Triphenyl-1,3,5-benzenetriamine蛋白體PSMα6抗體包裝100g
2'-O-(tert-Butyldimethylsil...英文名稱: 2,5-Bis(4-aminophenyl)-1,3,4-oxadiazole蛋白體PSMα7抗體包裝25g
2'-O-(tert-Butyldimethylsil...英文名稱: 2-(2-Hydroxyphenyl)benzoxazole孕誘導(dǎo)阻斷因子1抗體包裝500g
2'-去-2'-羥基達(dá)沙替尼英文名稱: 5,6-Dibromo-2,1,3-benzothiadiazole多腺苷二磷多聚16抗體包裝10g
2'-脫氧-β-L-腺苷英文名稱: 2-(2-Hydroxyphenyl)benzothiazole成對樣同源結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)錄因子2抗體包裝50g
2'-脫氧鳥苷一合物英文名稱: 1-AminopyreneRNA聚合II抗體包裝100g
可可球二孢Lasiodiplodia│theobromae (Pat.) Griffon & Maubl. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品谷脫羧自身抗體IgM試劑盒D-蘋果;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書
毛柄金錢菌(金針菇)Flammulina│velutipes 質(zhì)量規(guī)格:>98%,選擇性的ALK抑制劑谷脫羧自身抗體IgG試劑盒L-茶;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書
發(fā)簇霉屬Sporothrix│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品谷脫羧65試劑盒乳糖;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書
RIP1抑制劑(GSK2982772)自噬相關(guān)蛋白12抗體牛小腸性磷(CIAP)檢測試劑盒CIAP ELISA Kit
自噬相關(guān)蛋白13抗體XIII B(F13B)檢測試劑盒F13B ELISA Kit
自噬相關(guān)蛋白3抗體XIII A1(F13A1)檢測試劑盒F13A1 ELISA Kit
整合樣金屬蛋白與凝血4型抗體VIIIa輕鏈(F8aLC)檢測試劑盒F8aLC ELISA Kit
磷化活化復(fù)制因子2抗體Ⅻ(FⅫ)檢測試劑盒FⅫ ELISA Kit
磷化APP(Tyr757)淀粉樣肽前體蛋白抗體Ⅺ(FⅪ)檢測試劑盒FⅪ ELISA Kit
絲/蘇蛋白激ATR抗體Ⅹ(FⅩ)檢測試劑盒FⅩ ELISA Kit
去整合樣金屬蛋白18抗體Ⅸ(FⅨ)檢測試劑盒FⅨ ELISA Kit
活化轉(zhuǎn)錄因子6抗體Ⅷ相關(guān)抗原(FⅧ-Ag)檢測試劑盒FⅧ-Ag ELISA Kit
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)