操作流程:
1. 整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱:豬鏈球菌核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)
規(guī)格:50T
貨號(hào):GOY-M6558
分類:核酸檢測試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
儲(chǔ)存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
FAST kinase Fas活化的絲/蘇氨酸激酶抗體 規(guī)格: 0.1mlUBE2A/UBE2B/RAD6 泛素結(jié)合酶E2蛋白A抗體 規(guī)格: 0.2ml*
CT DNA(calf thymus DNA) 小牛胸DNA抗體 規(guī)格: 0.2ml*
phospho-LSP1 (Ser252) 磷酸化白細(xì)胞F肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlHIF3 alpha 缺氧誘導(dǎo)因子3α/HIF-3α抗體 規(guī)格: 0.1ml*
Rabbit Anti-human IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗人IgG 規(guī)格: 0.1ml*
FRMD5 FRMD5蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml*
NOX2/gp91phox NADPH氧化酶2抗體 規(guī)格: 0.1ml*
FLAG Tag (NT) FLAG Tag標(biāo)簽抗體(N端) 規(guī)格: 0.1ml*
Mouse Anti-human IgM/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的小鼠抗人IgM 規(guī)格: 0.1ml*
phospho-RPS6KB1(Ser441+Thr444) 磷酸化核糖體S6蛋白激酶抗體 規(guī)格: 0.1ml*
AIMP3/p18 抑蛋白AIMP3抗體 規(guī)格: 0.2ml*
PDZD5A/FRMPD2L2 PDZ結(jié)構(gòu)域PDZK5A蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml*
PMP22 外周髓鞘蛋白-22抗體 規(guī)格: 0.1ml*
Layilin 透明質(zhì)酸受體抗體 規(guī)格: 0.1ml*
Nucleolar protein 3/Apoptosis repressor with CARD 核仁蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2ml*
Donkey Anti-Goat IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的驢抗羊IgG 規(guī)格: 0.1ml*
豬鏈球菌核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)點(diǎn)樣吸頭-200只/盒200ul盒
Choline bitarate 酒石酸氫膽堿100g瓶
D201大孔強(qiáng)堿性乙烯系陰離子樹脂500g瓶
伊紅染液100ml瓶
Sodium Ciate 檸檬酸三鈉100g瓶
Cephalothin Sodium Salt 先鋒霉素25mg瓶
Acetylcholinesterase 乙酰膽堿酯酶50mg瓶
麩皮500g瓶
1kb plus DNA Ladder100T支
Avidin-FITC5ml支
EDTA抗原修復(fù)液(50×)100ml瓶
細(xì)胞過濾篩(不銹鋼)60目個(gè)
DMSO 二甲亞砜(細(xì)胞培養(yǎng)級(jí))50ml瓶
Sodium Houttuyfonate 魚腥草素鈉1847-58-120mg
Monoopein 水晶蘭苷5945-50-610mg