以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
中性紅染色液(活細胞染色用) | Neutral Red Staining Solution(Living cell staining) | 100ml | 1~3天 |
商品介紹:
本染色液是一種組織或細胞染色時常用的可以把細胞核染成紅色的染色液。本染色液配制在pH值較接近中性的,并且和普通的細胞培養(yǎng)液等滲的溶液中,可以用于外周血細胞的活體染色,也可以用于其它活體細胞或組織的染色。本染色液經過濾除菌,可以直接用于培養(yǎng)細胞的染色。中性紅同時也是一種pH指示劑,在酸性時呈紅色,在pH6.8-8.0時呈黃色。細胞核中的核酸呈酸性,因此細胞核會被染成紅色。由于溶酶體(lysome)中也是酸性環(huán)境,因此溶酶體也是可以被酸性紅染色液染成紅色的。如果每樣需使用0.5ml本染色液,一個包裝的本染色液可檢測200個樣品。如用于涂片的染色,至少可染色500個樣品。 CAS:553-24-2 分子式:C15H17IN4 分子量:288.8 注意事項:第一次使用本試劑盒時建議先取1-2個樣品做預實驗。 儲存條件:4℃避光,有效期一年。 |
公司產品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
鹽吡格列雜質/5-{4-[2-(5-乙基-2-吡啶...英文名稱: Tulathromycin ADHX15蛋白抗體包裝5g
鹽表阿霉(標準品)英文名稱: Latamoxef sodiumDIAPH2蛋白抗體包裝1g
鹽卡特羅(標準品)英文名稱: Procyanidin磷化蓬亂蛋白2抗體包裝250mg
鹽美(標準品)英文名稱: ProcyanidinWnt通路抑制因子2抗體包裝1mg
鹽米(標準品)英文名稱: Piperine磷化B淋巴銜接分子DAPP1抗體包裝100g
鹽帕他莫(標準品)英文名稱: Piperine磷化Fas相關死亡結構域蛋白抗體包裝25g
鹽哌維林(標準品)英文名稱: Pneumocandin B0冷休克蛋白DBPA抗體包裝500g
鹽(標準品)英文名稱: Formoterol 脫帽1A抗體包裝250g
鹽(標準品)英文名稱: Homatropine Methyl Bromide 清道夫脫帽/熱休克蛋白1抗體包裝1g
鹽布替萘芬(標準品)英文名稱: Abiraterone Acetate干擾調節(jié)因子4結合蛋白抗體包裝5g
鹽達克羅寧(標準品)英文名稱: BrimonidineDNA交聯修復蛋白1C抗體包裝100g
鹽氮卓斯汀(標準品)英文名稱: Asulam磷化凋亡相關蛋白激2抗體包裝25g
鹽地巴唑(標準品)英文名稱: Asulam凋亡相關蛋白激樣蛋白1抗體包裝5g
鹽地布(標準品)英文名稱: Bepotastine besilate磷化凋亡相關蛋白激1抗體包裝25g
鹽地爾硫卓(標準品)英文名稱: Sodium copper chlorophyllin牙本質基質蛋白1抗體包裝5g
鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品脫氧核糖核Ⅰ試劑盒苷;Kaempferitrin
鹽反硝化枝芽孢桿菌Virgibacillus│halodenitrificans 質量規(guī)格:>99.5%,超純,BP2010,BR,可用于培養(yǎng)脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉試劑盒三葉豆紫檀苷;Trifolirhizin
類諾卡氏菌Nocardioides│sp. 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品脫氫表雄硫酯試劑盒矢車菊-3-O-葡萄糖苷;Cyanid
中性紅染色液(活細胞染色用)大腸桿 2-(三氟甲基)吩噻胞質5核苷酸1A抗體Elisa
Pseudoxanthomonas 1-烯基環(huán)磺酰氯血管內皮鈣黏蛋白抗體Elisa
絨奧德蘑 1-乙基-3-甲基咪唑雙鹽血栓調節(jié)蛋白抗體Elisa
斑點青霉 N-Boc-氨基炔二型腺相關病Elisa
耐寒短桿 1-(4-甲氧基-3-(3-甲氧基氧基)苯基)-3-甲基-1-丁酮腺相關病Elisa
圈卷產色鏈霉 3-十四烷基噻吩;滲透增強蛋白樣Elisa
炭疽健康皮張抗原 2,6-二甲基哌死骨片1-泛結合蛋白P62Elisa
凝結芽胞桿 2,6-二甲基哌轉錄激活因子MYBElisa
巨大芽孢桿 2,4-二氟甲酯醌NADH脫氫1Elisa
雅致放射毛霉 6(5H)-5-氮雜菲酮CCAAT增強子結合蛋白αElisa
解淀粉芽孢桿 4-氨基-6-氯-2-甲硫基嘧啶甲基胞嘧啶雙加氧2Elisa
微小根毛霉 1-乙基-6,7,8-三氟-1,4-二氫-4-氧代-3-喹啉甲酸乙酯增強因子-1Elisa
根瘤 3-甲基吡啶-N-氧化物Runt相關轉錄因子1Elisa
畢赤酵母 二酸單乙酯跨膜受體蛋白Notch-1Elisa
斯瓦特貝赫山克里布所 3,5-二硫脲白介36γElisa