改良MacConaill鉛蘇木素染色液公司*的產(chǎn)品：ERCC1/FITC 熒光標(biāo)記抗切除修復(fù)交叉互補(bǔ)因1抗體IgG草鐵(II) CP,98%
ERK1/ERK /FITC 熒光標(biāo)記絲裂原活化蛋白激1抗體IgG草鐵(II) AR,99%
p-ERK1/p-MAPK-1/2 /FITC 熒光標(biāo)記化絲裂原活化蛋白激1/2抗體IgG草鐵(II) 99.999% (metals basis)
E

商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：改良MacConaill鉛蘇木素染色液

英文名稱：

產(chǎn)品規(guī)格：140ml

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

天花粉（栝樓）（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Linderane磷化蛋白激C底物Marcks抗體包裝250mg

天麻（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： D(+)-Glucose磷化蛋白激C底物Marcks抗體包裝1g

天麻(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Rutaecarpine肝生長(zhǎng)因子受體抗體包裝5g

天名精（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Rutaecarpine磷化絲裂原活化蛋白激3K9抗體包裝5MG

天南星（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Evodiamine受體酪激抗體包裝1g

天山雪蓮 （標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Evodiamine絲裂原活化蛋白激3K9抗體包裝5g

天仙藤（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Schisandrin C黑皮質(zhì)3受體抗體包裝1g

甜菜堿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Schisandrol AMenin抑癌蛋白抗體包裝5g

甜茶（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Schisandrol B錯(cuò)配修復(fù)蛋白3抗體包裝25g

甜茶苷;甜葉懸鉤子苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Schizandrin A微小染色體維持缺陷蛋白7抗體包裝5g

甜橙黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Schizandrin B單核趨化蛋白2抗體(小鼠)包裝25g

甜瓜蒂（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Schisantherin A單核趨化蛋白3抗體包裝5g

甜菊苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Sipeimine單核趨化蛋白3抗體包裝1g

甜葉菊（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Crocin巨噬炎癥蛋白18抗體包裝1g

鐵冬青;毛冬青(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Crocin IMITF相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子抗體包裝250mg

姬菇Pleurotus│corucopiae 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98.0%,標(biāo)準(zhǔn)品抗DNAB抗體試劑盒蒼術(shù);Atractylon

曲霉屬Aspergillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格：BR，含量≥95.0%抗BP180抗體試劑盒赤松;Pinosylvin

: 400資源名稱: 鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98.0%,標(biāo)準(zhǔn)品抗BB抗體試劑盒重樓皂苷E;Progenin III
改良MacConaill鉛蘇木素染色液糖化酵母 3-氟-2-酪酪肽Elisa

側(cè)耳 2--6-氟甲苯類風(fēng)濕因子Elisa

綠色木霉 N-芐氧羰基-DL-蛋氨酸類胰蛋白Elisa

芽孢桿屬 乙基酸粒集落激因子Elisa

硬毛栓孔 O-琥珀酰亞-1,3-二甲基基脲六氟磷酸鹽粒巨噬集落激因子Elisa

拜氏色鹽桿 2-氨基-4,5-二氟裂解型糖基化終末產(chǎn)物受體Elisa

多根硬皮馬勃 1-芐基高哌αElisa

釀酒酵母 N-甲基亞氨二乙酸功能相關(guān)抗原1Elisa

平菇 1-二乙基-2-磷酸二酯Elisa

芽枝狀枝孢 2-(4-乙氧基苯基)-2-甲基磷酸二酯3BElisa

小馬勃 雙(2,4,4-基戊基)膦酸磷酸甘油酸激Elisa

溶藻弧 3-乙?；?7氮雜磷酸果糖激1Elisa

蟬花* 6-叔丁基-4--噻吩[2,3-D]嘧啶磷酸化AKT蛋白Elisa

哈茨木霉 2,4,6-三羥基磷酸化p38絲裂原活化蛋白激Elisa

閃光須霉 4-甲氧基-2,3,5,6-四氟苯甲磷酸化Tau蛋白Elisa