以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
PI溶液(1mg/ml) | Propidium Iodide Solution | 1ml | 1~3天 |
商品介紹:
本產(chǎn)品為PI水溶液,濃度為1mg/ml。使用時(shí)根據(jù)實(shí)驗(yàn)不同直接將本產(chǎn)品用相應(yīng)溶液稀釋到工作濃度。 碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)是一種可對(duì)DNA 染色的細(xì)胞核染色試劑。它是一種溴化乙啶的類似物,在嵌入雙鏈DNA 后釋放紅色熒光。PI 不能穿透完整細(xì)胞膜,但對(duì)凋亡晚期細(xì)胞和死細(xì)胞的破損細(xì)胞膜能夠穿透,并使細(xì)胞核紅染。PI 經(jīng)常被用來(lái)與Calcein-AM 或者FDA 等熒光探針一起使用,能同時(shí)對(duì)活細(xì)胞和死細(xì)胞染色。PI-DNA 復(fù)合物的激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)分別為535 nm 和615 nm。常用于流式細(xì)胞儀分析和顯微鏡觀察,檢測(cè)細(xì)胞凋亡(apoptosis)或細(xì)胞壞死(necrosis)。 別名:碘化丙啶溶液 CAS號(hào):25535-16-4 分子式:C27H34I2N4 分子量:668.39 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期至少2年 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
AV-951英文名稱: Adenosine磷化鈣調(diào)磷B亞基B1抗體包裝5g
BGJ398(NVP-BGJ398)英文名稱: Adiphenine HCl羊毛甾14α-去基化蛋白抗體包裝5g
Carmustine(進(jìn)分)英文名稱: Adiphenine HCl補(bǔ)體C5抗體包裝1g
CEP-18770英文名稱: Alarelin Acetate5號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框24抗體包裝250mg
HSP990英文名稱: Alendronate Sodium5號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框42抗體包裝250mg
MK4827 (Niraparib)英文名稱: Alendronate Sodium5號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框49抗體包裝250mg
O-6-芐基鳥嘌呤英文名稱: Allopurinol5號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框35抗體包裝1g
Ruxolitinib(INCB018424) pho...英文名稱: Allopurinol中心體蛋白192抗體包裝25g
SB431542,SB-431542英文名稱: Allylestrenol中心體蛋白27抗體包裝5g
TAE684英文名稱: Allylestrenol中心體蛋白290抗體包裝100g
Tamoxifen Citrate英文名稱: Alprostadil,PGE1,中心體蛋白63抗體包裝25g
Tariquidar,XR-9576英文名稱: Altrenogest中心體蛋白70/p10結(jié)合蛋白抗體包裝5g
阿法替尼英文名稱: Altrenogest中心體蛋白72抗體包裝1ml
阿法替尼雙馬來(lái)鹽英文名稱: Amantadine HCl中心體蛋白95抗體包裝25g
阿西替尼英文名稱: Amantadine HCl中心體蛋白89抗體包裝1g
: AS2.606資源名稱: 橢圓釀酒酵母 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,三合物胰高血糖樣肽1試劑盒異綠原C;Isochlorogenic
豌豆根瘤菌Rhizobium│leguminosarum 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品,三合物胰高血糖試劑盒異綠原B;Isochlorogenic
拉曼小毛霉原變種Micromucor│ramarnianus 質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)≥750IU/MG,BP,BR胰多肽試劑盒異綠原A;Isochlorogenic
PI溶液(1mg/ml)楊奇青霉 1-苯基正癸烷血管生成樣蛋白8Elisa
沙諾氏芽孢桿 3-溴甲酯谷氨酸脫羧65抗體Elisa
幼角鐮孢 4-鄰苯二甲酰亞氨基環(huán)己酮谷氨酸脫羧65IgG抗體Elisa
黑色附球霉 3,5-二溴-4-硝基吡唑新型隱球抗原Elisa
大腸埃希 薄荷酮, mixture of isomers血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子DElisa
雅致枝霉 2-溴-3-氟三氟甲苯沙眼衣原體IgA抗體Elisa
谷氨酸棒桿 (S)-3-氨基四對(duì)甲苯磺酸鹽枸櫞酸Elisa
季也蒙邁耶氏酵母 2-氨基-2,4-二氯煙酸甲酯磷酸二酯9AElisa
大孔 (R)-(+)-alpha-氨基-gamma-丁內(nèi)酯鹽酸鹽耐膽鹽Elisa
嗜麥芽寡養(yǎng)單胞 普羅帕脒整合αMβ2Elisa
黃色糖多孢 N-芐基-雙鄰氯乙基氨基鹽酸鹽整合αVβ5Elisa
居真細(xì)屬 泛昔洛韋微管相關(guān)蛋白輕鏈3IIElisa
少根根霉 3,5-二氟-4-甲氧基苯甲甲型肝炎抗原Elisa
纖維單胞 帕拉米韋三水合物腫瘤蛋白p53Elisa
金黃桿 阿替美唑鹽酸鹽氧化低密度脂蛋白IgG抗體Elisa