詳細(xì)介紹
熒光定量PCR試劑盒:
Real Time PCR EasyTM-SYBR Green I試劑盒提供的2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR是一種使用SYBR Green I進行Real Time PCR擴增反應(yīng)的全新預(yù)混系統(tǒng),能大幅度提高產(chǎn)物特異性和反應(yīng)靈敏度。同時,提供ROX作為內(nèi)參染料。該試劑盒的熒光強度為同類產(chǎn)品的3-5倍,能更靈敏的、更直觀的反應(yīng)目的模板DNA的濃度。產(chǎn)品僅用于科研
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR包含本公司*的熱啟動Foregene Taq DNAPolymerase,該酶相對于普通Taq酶具有擴增效率高、特異性擴增能力強、錯配率低等優(yōu)點。用于熒光定量PCR反應(yīng)可減少非特異性擴增,提高PCR的準(zhǔn)確性。
中文名稱:脲原體通用探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Ureaplasma spp.
貨號:GOY-M4619
規(guī)格:50T
產(chǎn)品特性: 高特異性:本產(chǎn)品采用熱啟動 DNA 聚合酶,90℃以上 2min 后具有擴增活性,可大大提高 PCR 產(chǎn)物的特 異性。 靈敏度:本產(chǎn)品包含的優(yōu)化的緩沖液可檢測低拷貝數(shù)的模板,且重復(fù)性好。 高適用性:本產(chǎn)品可適用于任意熒光定量 PCR 儀。
試劑盒內(nèi)容:
Store at -20°C
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR:包括特別改造的熱啟動 Taq DNAPolymerase、MgCl2、優(yōu)化配比的 dNTPs 和 SYBR Green I、反應(yīng)緩沖液、PCR反應(yīng)增強劑、優(yōu)化劑以及穩(wěn)定劑等。PCR 反應(yīng)時,只需將適當(dāng)?shù)牧呀饣旌弦骸⒁?、DNase-ddH2O添加到2×Real PCR EasyTM Mix-SYBR中即可用于PCR反應(yīng)。
ROX Reference Dye:一般用于 ABI、Stratagene 等公司的 Real Time PCR 擴增儀上,用于調(diào)整 PCR 加樣誤差所引起的 PCR 管與管之的差異。不同儀器所需ROX Reference Dye 濃度不同,用戶可以根據(jù)儀器的推薦濃度添加。DNase-Free ddH2O:超純水,用于 PCR 反應(yīng)。
試劑盒應(yīng)用
熒光定量PCR進行模板定量分析。
常規(guī)PCR擴增。
樣品要求及注意事項:
1、 如果提供實驗材料,實驗材料必須保證新鮮,請您采樣后立刻放入液氮中速凍或加入樣穩(wěn)定劑,并用干冰運輸。
2、 如果樣品可以用Trigol法提總RNA ,也可以將樣品研磨后放在 Trigol中,動植物組織 : 50~100mg/mlTrigol,貼壁細(xì)胞:10cm2/mlTrigol,懸浮細(xì)胞:5×106動植物,酵母細(xì)胞或細(xì)菌細(xì)胞10×107/mlTrigol。
3、 如果提供RNA或cDNA我們要對您提供的材料進行評估。
4、 實時熒光定量PCR服務(wù)您一定要提供樣品及要擴增基因的詳細(xì)信息。
熒光定量PCR原理:
熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應(yīng)的進行,PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計,熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán),收集一個熒光強度信號,這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言,熒光擴增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段, PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便,在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
4-苯基 2-羧基次膦酸(福辛普利雜質(zhì)A)C21H26N2O3 HCL人凝血因子XIIIB鏈(F13B)ELISA Kit
4-差向-地美環(huán)素C10H14N2人凝血因子XIII A1(F13A1)ELISA Kit
4-差向-四環(huán)素C51H84O22人凝血因子VIII(FVⅢ)ELISA Kit
4-差向土霉素C16H30O人凝血因子Ⅻ(FⅫ)ELISA Kit
4-對酰氨基酚硫酸鉀鹽C43H48O16人凝血因子Ⅶ(FⅦ)ELISA Kit
4-含氧諾氟沙星C9H8O人凝血因子Ⅴ(FⅤ)ELISA Kit
4-環(huán)氧烷強力霉素C29H36O16人凝血酶原前體蛋白(PIVKA-II)ELISA Kit
4-氧基-17β-雌二醇C16H22O11人凝血酶原片段F1+2(F1+2)ELISA Kit
4-羥苯基馬拉維若C10H13N5O5人凝血酶(Thrombin)ELISA Kit
4-羥基-2H-1,2-苯并噻嗪-3-羧酸酯 1,1...C27H30O18人凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA Kit
4-羥基阿托伐他汀 ?;?β-D-葡萄糖醛酸苷C45H74O18人檸檬酸合成酶,線粒體(CS)ELISA Kit
4-羥基阿托伐他汀內(nèi)酯C46H78O19人尿微量白蛋白(MAU/ALB)ELISA Kit
4-羥基氨苯蝶啶C30H32O12人尿皮素ELISA Kitp-2-Thiazolylsulfamoylsuccinanilic acid 鹽酸前黃素
PicloramChicken tPA (Plasminogen Activator, Tissue) ELISA Kit
脲原體通用探針法熒光定量PCR試劑盒METHYL ARACHIDONATE 氧嗪酸鉀
1,1,1,2-TetrafluoroethaneChicken FCN1 (Ficolin 1) ELISA Kit
Talc 硝基呋喃妥因
4-AMinoazobenzene;p-AMino-azobenzene;p-AMinodiphenyliMide;Aniline yellow;Spirit yellow;Oil yellow B;p-Phenylazoaniline;C.I.11000;Chicken IL-15 (Interleukin 15) ELISA Kit
Cyclosporine Resolution Mixture 格爾德霉素
4-(Dimethylamino)cinnamic acidChicken LEPR (Leptin Receptor) ELISA Kit
Cyclopropanecarboxylic acid chloride 雙鏈霉素
4-DiethylaminobenzaldehydeChicken CAPA (Cytotoxin Associated Protein A) ELISA Kit
Cyclobutylamine 色苷酸鈉
Iron(III) p-toluenesulfonate hexahydrateChicken PYGM (Glycogen Phosphorylase, Muscle) ELISA Kit
相對定量簡介:
分析方法: ①雙標(biāo)曲法 ②2 - △Ct ③2 - △△Ct ④Pfaffi法
①雙標(biāo)準(zhǔn)曲線法簡介
公式:
優(yōu)點:分析簡單,實驗優(yōu)化簡單產(chǎn)品僅用于科研
缺點:對每一個基因,每一輪實驗都必需做標(biāo)準(zhǔn)曲線;必需有固定的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線;這些標(biāo)準(zhǔn)品并不代表樣品擴增的真實狀態(tài)應(yīng)用:基因表達調(diào)控研究中用與*的兩種相對定量方法之一。