甲基綠-派絡(luò)寧染色液公司*的產(chǎn)品：CITED1/ABCC1/FITC 熒光標(biāo)記結(jié)合轉(zhuǎn)化激活因子CITED1抗體IgG1,4-哌二磺(PIPES) for cell culture, ≥99%
MRP2/FITC 熒光標(biāo)記多藥耐藥相關(guān)蛋白2抗體1,4-哌二磺 99.5%
MRP3/FITC 熒光標(biāo)記多藥耐藥相關(guān)蛋白3抗體IgG哌-N,N-雙(2-羥烷磺) 99%
MRP4/ABCC4 /

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：甲基綠-派絡(luò)寧染色液

英文名稱：

產(chǎn)品規(guī)格：50ml|100ml

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

石榴干腐菌通用轉(zhuǎn)錄因子IIA樣因子抗體Human LIN28B ELISA Kit小鼠血管內(nèi)皮粘附分子1(VCAM-1/CD106)免疫試劑盒

小叢殼屬自噬相關(guān)蛋白4D抗體Human LHPP ELISA Kit小鼠血管內(nèi)皮生長因子受體-3(VEGFR-3/Flt-4)免疫試劑盒

類谷糠乳桿菌自噬相關(guān)蛋白9A抗體Human LIN7C ELISA Kit小鼠血管內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)免疫試劑盒

大豆慢生根瘤菌縮C抗體Human LILRA5 ELISA Kit小鼠血管內(nèi)皮生長因子受體1(VEGFR-1/Flt1)免疫試劑盒

產(chǎn)氣莢膜梭菌 C型谷草轉(zhuǎn)抗體Human LIN7B(Protein lin-7 homolog B) ELISA Kit小鼠血管內(nèi)皮生長因子D(VEGF-D)免疫試劑盒

土生類諾卡氏菌三磷腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員5抗體Human LILRA4 ELISA Kit小鼠血管內(nèi)皮生長因子C(VEGF-C)免疫試劑盒

樟疫霉三磷腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員8抗體Human LIMD2 ELISA Kit小鼠血管內(nèi)皮生長因子B(VEGF-B)免疫試劑盒

黃色長孢鏈霉菌?；摎溟L鏈抗體Human LILRB5 ELISA Kit小鼠血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)免疫試劑盒

果生鏈核盤菌?；摎渲墟溈贵wHuman LIMK1(LIM domain kinase 1) ELISA Kit小鼠血管緊張轉(zhuǎn)化2(ACE2)免疫試劑盒

地衣芽孢桿菌?；摎涠替溈贵wHuman LIMS1 ELISA Kit小鼠血管緊張轉(zhuǎn)化(ACE)免疫試劑盒

白金針菇過氧化物?；趸?/span>1抗體Human LIMK2 ELISA Kit小鼠血管緊張?jiān)?aGT)免疫試劑盒

大腸埃希氏菌磷化凋亡信號調(diào)節(jié)激1抗體Human LGI3 ELISA Kit小鼠血管緊張Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫試劑盒

白黃側(cè)耳轉(zhuǎn)化生長因子β誘導(dǎo)蛋白3抗體（半胱和絲富含核蛋白1）Human LGI2 ELISA Kit小鼠血管緊張Ⅰ(Ang-Ⅰ)免疫試劑盒

微小桿菌有絲分裂激A/B/C抗體Human LGI2 ELISA Kit小鼠血管緊張1-7(Ang1-7)免疫試劑盒

蘇云金芽孢桿菌蛋白酪激ATK抗體Human LIMS1 ELISA Kit小鼠血管活性腸肽(VIP)免疫試劑盒

藤黃類諾卡氏菌長鏈脂肪連接1/2抗體Human LIMK2 ELISA Kit小鼠雄烯二(ASD)免疫試劑盒

左旋乳芽孢桿菌Bacillus│laevolacticus Nakayama and yanoshi 質(zhì)量規(guī)格：>10 U/mg,BC瘢痕性天皰瘡抗體試劑盒*泊苷

中甸隔指孢Dactylella│zhongdianensis 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR百日咳病抗體試劑盒鹽羅格列

枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR百日咳病抗體試劑盒鹽吡格列
甲基綠-派絡(luò)寧染色液枯草芽孢桿 2--6-氟苯酸哇巴因Elisa

金黃色葡萄球（質(zhì)控） 5-乙酰戊酸腸三葉因子3Elisa

菜豆間座殼 對甲苯磺酸鐵六水合物二肽基肽ⅧElisa

嗜血苯基桿 3-氨基-5-甲基吡唑二肽基肽ⅨElisa

隔離德沃斯氏 3,5-吡唑二甲酸組織蛋白BElisa

球孢白僵 4-氨基-5,6-二嘧啶固調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白-1CElisa

燼灰土類芽孢桿 2,4,6-基-1,3-苯二乙酰Elisa

樹舌靈芝(平蓋靈芝) R-3-N-Boc-3-甲氨基NADH脫氫Elisa

枯草芽孢桿 4-苯氧基苯尿激Elisa

大腸埃希氏 2,2-二苯基環(huán)S-腺苷甲硫氨酸Elisa

Maritalea myrionectae 鋰糖原合成Elisa

杰丁畢赤酵母 草酸鋰糖原合成Elisa

白囊耙齒 正十二烷酸Rho關(guān)聯(lián)含卷曲螺旋蛋白激2Elisa

灰略紅鏈霉 2--4,6-二增值核抗原Elisa

鮑氏桑黃 (R)-(+)-1-苯胃泌釋放肽抗體Elisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)