Von Kossa硝酸銀法鈣鹽染色試劑盒公司正在出售的產(chǎn)品：phospho-SHC (Ser36) 化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體1-吡唑-4-頻哪酯 97%
phospho-SHC (Tyr349) 化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體5-吡啶-3- 98%
phospho-SHC (Tyr427) 化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體2-氧吡啶-3-頻哪酯 97%
phospho-SHC (Tyr317)

商品介紹：

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

雞蛋花（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Diethylene glycolG蛋白偶聯(lián)受體171抗體包裝100mg

雞冠花（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Diethylene glycol神經(jīng)膜糖蛋白M6b包裝25mg

雞內(nèi)金（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 1-Dodecanol鳥苷激GMK抗體包裝500mg

雞矢藤（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： DIRECT BLUE 6半乳糖腦苷脂抗體包裝25ml

雞血藤（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Disperse Orange 37G蛋白偶聯(lián)受體激5抗體包裝100mg

雞眼睛（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Diethyltin-dichlorideGTP結(jié)合蛋白R(shí)EM1抗體包裝500mg

積雪草（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Napropamid磷化糖原合激-3α抗體包裝1g

積雪草苷B英文名稱： Diflubenzuron solution生長(zhǎng)分化因子7抗體包裝1g

積雪草苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Dithianon葡萄糖激調(diào)節(jié)蛋白抗體包裝5g

積雪草（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Dazometγ谷酰半胱合成抗體（γ-GCSc）包裝100g

吉馬（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： DichloropheneGCOM1蛋白抗體包裝25g

吉祥草（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Dipropetryn葡萄糖果糖還原2抗體包裝5g

急性子（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： [3-(3,5-Dichlorophenyl)-2,4-dioxoimidazolidinyl]-N-(methylethyl)carboxamide standard solution膠質(zhì)系源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子受體α1樣蛋白抗體包裝25g

蒺藜（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： DicapthonGHDC蛋白抗體包裝5g

蒺藜皂苷D英文名稱：  p, p’-DDD甘油激5抗體包裝25g

蒼白桿菌Ochrobactrum│pituitosum Huber et al. 質(zhì)量規(guī)格：>98%,進(jìn)分固試劑盒歐當(dāng)歸內(nèi)酯A;Levistilide A

雞傷寒沙門Salmonella│gallinarum 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR去乙?；疭irtuin-7試劑盒歐前胡;Imperatorin

黑孢屬菌種Nigrospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>99%去乙?；疭irtuin-6試劑盒尼泊金異酯;Isopropyl 4-H
Von Kossa硝酸銀法鈣鹽染色試劑盒玉米黑粉 5-甲氧基-2-并惡唑神經(jīng)肽Y受體Y1Elisa

豌豆根瘤 3-甲基膽蒽神經(jīng)肽Y受體Y2Elisa

根瘤 麥角考寧連蛋白抗體Elisa

尖角凸臍蠕孢 Tetramethyl Bisphenol A蛋白3抗體Elisa

深層大洋芽孢桿 2-氨基-4,6-二氯嘧啶-5-甲M型磷脂A2受體抗體Elisa

假單胞 2-噻唑神經(jīng)肽Elisa

釀酒酵母 氨基蝶呤組蛋白H1Elisa

*禾谷鐮刀 乙內(nèi)酰脲-5-乙酸胸腺肽β4Elisa

大腸埃希 1-萘乙酸酐胰島樣生長(zhǎng)因子2-mRNA結(jié)合蛋白2Elisa

羊泰勒蟲（崇信株） (1R,2R,4R,5R)-2,5-雙(3,5-二叔丁基-2-羥基苯亞甲基氨基)雙環(huán)[2.2.1]庚序列相似家族19成員A5Elisa

凍干粉  厭氧亞硫酸鹽還原梭（定量）  (1S,2S,4S,5S)-2,5-雙(3,5-二叔丁基-2-羥基苯亞甲基氨基)雙環(huán)[2.2.1]庚肽基脯氨酸順反異構(gòu)Elisa

慢生根瘤 S-羧乙基異硫脲甜菜堿肽基脯氨酸順反異構(gòu)Elisa

香菇 7，7，9，9-Tetramethyl-1，4-dioxa-8-azaspiro[4.5]decan骨髓源性生長(zhǎng)因子Elisa

花腐鐮孢 3’-氨基-2',3'-雙脫氧胸苷EB病早期抗原Elisa

巴氏醋桿 2-甲基-5-嘧啶甲酸EB病核心抗原Elisa