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          上海谷研實業(yè)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞凋亡與增殖>>JC-1線粒體膜電位檢測試劑盒

          JC-1線粒體膜電位檢測試劑盒

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          • 所在地 上海市

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          更新時間:2022-04-21 13:17:30瀏覽次數(shù):308

          聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 20T|50T|100T
          貨號 GOY-01X9686 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
          主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
          JC-1線粒體膜電位檢測試劑盒公司*的產(chǎn)品:GRM5/mGluR5 促代謝型谷氨受體5抗體三化 AR,97.0%
          GRM2+GRM4 促代謝型谷氨受體2+4抗體式碳鉛 AR,99.0%
          GRO Alpha/GRO-1 生長調(diào)節(jié)致癌因-1抗體式碳鉛 ACS
          MIP2/GRO Beta/CXCL2 巨噬炎癥蛋白2( GROβ)抗體發(fā)煙硝 AR
          GRO gamma/CXCL3 生長調(diào)節(jié)致

          詳細(xì)介紹

          產(chǎn)品屬性:

          中文名稱:JC-1線粒體膜電位檢測試劑盒

          英文名稱:

          產(chǎn)品規(guī)格:20T|50T|100T

          發(fā)貨周期:1~3天
          公司產(chǎn)品僅用于科研

          商品介紹:

          線粒體膜電位的下降是細(xì)胞凋亡早期的一個標(biāo)志性事件。JC-1是一種廣泛用于檢測線粒體膜電位(mitochondrial membrane potential)△Ψm的理想熒光探針??梢詸z測細(xì)胞、組織或純化的線粒體膜電位。在線粒體膜電位較高時,JC-1聚集在線粒體的基質(zhì)中,形成聚合物,488nm 激發(fā)時的大發(fā)射波長為590nm,可以產(chǎn)生紅色熒光,在流式圖上表現(xiàn)為FL1和FL2雙陽性;在線粒體膜電位較低時,JC-1不能聚集在線粒體的基質(zhì)中,此時JC-1為單體,488nm 激發(fā)時大發(fā)射波長為527nm,可以產(chǎn)生綠色熒光,形成流式圖中所有細(xì)胞FL1均為陽性。凋亡細(xì)胞則大多為FL1 單陽性。這樣就可以非常方便地通過熒光顏色的轉(zhuǎn)變來檢測線粒體膜電位的變化。常用紅綠熒光的相對比例來衡量線粒體去極化的比例。

          通過JC-1從紅色熒光到綠色熒光的轉(zhuǎn)變可以很容易地檢測到細(xì)胞膜電位的下降,同時也可以用JC-1從紅色熒光到綠色熒光的轉(zhuǎn)變作為細(xì)胞凋亡早期的一個檢測指標(biāo)。

          線粒體膜電位檢測試劑盒(JC-1)可以快速靈敏地檢測細(xì)胞、組織或純化的線粒體膜電位變化,可以用于早期的細(xì)胞凋亡檢測。試劑盒染料與其他的陽離子染料如DiOC6(3)和羅丹明123 相比,特異性更高,對線粒體膜電位變化的特異性高于質(zhì)膜電位變化,對線粒體去極化檢測的檢測一致性更好;紅綠色熒光強(qiáng)度比率只受線粒體膜電位的變化,不受線粒體大小,形狀,密度的差異干擾;檢測靈敏度強(qiáng),對細(xì)胞應(yīng)激反應(yīng)的微小異質(zhì)性都能辨別;

          儲存條件:JC-1-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。孵育緩沖液2-8℃保存。

          有效期:一年。

          細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:

          細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:

          ①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;

          ②生物膜與細(xì)胞器的研究;

          ③細(xì)胞骨架體系的研究;

          ④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;

          ⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;

          ⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);

          ⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;

          ⑧細(xì)胞工程.

          實驗報告:

          一、分離與培養(yǎng):

          1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;

          2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

          3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

          4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

          5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

          二、免疫熒光鑒定:

          1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

          2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

          3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

          4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

          5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

          6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

          達(dá)拉濱磷酯英文名稱: Baclofen趨化因子受體D6抗體包裝5g

          尿嘧啶,5-脲嘧啶,5-尿嘧啶英文名稱: Balofloxacin Dihydrate鈣穩(wěn)態(tài)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白抗體包裝1g

          維司群英文名稱: Balofloxacin DihydrateCHES1蛋白抗體包裝5g

          枸櫞托瑞米芬英文名稱: Bendamustine HCl哺乳動物性幾丁質(zhì)抗體包裝100mg

          紅杉,西曲依英文名稱: Bendamustine HCl幾丁質(zhì)結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體包裝1g

          環(huán)孢D英文名稱: Betamethasone嵌合蛋白2/β2-chimaerin抗體包裝25g

          吉莫斯特;吉美嘧啶英文名稱: Betamethasone幾丁質(zhì)1抗體包裝5g

          吉西他濱英文名稱: Biapenem白抗原CD97 alpha 抗體包裝100mg

          蝶呤英文名稱: Biapenem緊密連接蛋白2抗體包裝100mg

          蝶呤二鈉鹽英文名稱: Bilibubin緊密連接蛋白7抗體包裝1g

          啶鉑,吡鉑英文名稱: Bilibubin2號染色體開放閱讀框53抗體包裝5g

          長春瑞賓/重長春瑞賓英文名稱: Bivalirudin TFA2號染色體開放閱讀框54抗體包裝25g

          長春質(zhì)堿英文名稱: Bimatoprost2號染色體開放閱讀框56抗體包裝5g

          卡鉑英文名稱: Bimatoprost2號染色體開放閱讀框61抗體包裝100g

          卡博替尼 ;XL184英文名稱: Bleomycin A5 Hydrochloride 癌相關(guān)抗原抗體包裝25g

          黃色長孢鏈霉菌Streptomyces│longisporoflavus 質(zhì)量規(guī)格:含量>99.0%胰島樣因子3試劑盒異茴芹;Isopimpinellin(

          鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%,BR胰島樣生長因子結(jié)合蛋白7試劑盒異土木香內(nèi)酯;Isoalantolact

          弧菌Vibrio│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品胰島樣生長因子結(jié)合蛋白5試劑盒7-乙基-10-羥基;7-Ethy
          JC-1線粒體膜電位檢測試劑盒銅綠假單胞 4-(三氟甲基l)芐基異酸酯ARHGAP4Elisa

          奧氏蜜環(huán) 1-甲基-1H--5-LYNElisa

          三葉草根瘤 叔丁基二甲基羥乙氧基硅烷a2-6半乳糖的唾液酸寡糖Elisa

          哈薩克斯坦酵母屬 (S)-N-BOC-3-甲基啉α2,6-半乳糖唾液酸Elisa

          少孢根霉 4-(2-甲氧基乙基)嗎啉三苯氧Elisa

          膠孢 6-氯-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶尿Elisa

          圍小叢殼 1-[3-(二氟甲氧基)苯基]乙酮游離皮質(zhì)Elisa

          紅紫青霉 N-CBZ-2-甲胃動蛋白2Elisa

          巴斯德畢赤酵母 6-氯-2-氟-3-甲氧基分泌性熱休克蛋白90Elisa

          黃桿 2-氨基-5-甲氧基吡啶20羥二十碳四烯酸Elisa

          牛瘟病 6-溴-2-氯-8-環(huán)戊基-5-甲基-吡啶并[2,3-D]嘧啶-7(8H)-酮19羥二十碳四烯酸Elisa

          蘇云金芽胞桿蠟螟亞種 [1,3-雙(2,4,6-三基)-2-咪唑烷亞基][[2-[2-氧代氧基]苯基]亞甲基]二氯西尼羅病抗體Elisa

          Escherichia 1-(3,4-二基)哌西尼羅病抗原Elisa

          水生黃桿 4-氯-3-甲5,6-EETElisa

          金色鏈霉 2,4-二氯-5-氟8,9-EETElisa 

          操作規(guī)程

          1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

          2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

          3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

          4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

          5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

          6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

          7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

          8、結(jié)果分析

          a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100

          b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

           


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