詳細(xì)介紹
熒光定量PCR試劑盒:
Real Time PCR EasyTM-SYBR Green I試劑盒提供的2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR是一種使用SYBR Green I進(jìn)行Real Time PCR擴(kuò)增反應(yīng)的全新預(yù)混系統(tǒng),能大幅度提高產(chǎn)物特異性和反應(yīng)靈敏度。同時(shí),提供ROX作為內(nèi)參染料。該試劑盒的熒光強(qiáng)度為同類產(chǎn)品的3-5倍,能更靈敏的、更直觀的反應(yīng)目的模板DNA的濃度。產(chǎn)品僅用于科研
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR包含本公司*的熱啟動(dòng)Foregene Taq DNAPolymerase,該酶相對(duì)于普通Taq酶具有擴(kuò)增效率高、特異性擴(kuò)增能力強(qiáng)、錯(cuò)配率低等優(yōu)點(diǎn)。用于熒光定量PCR反應(yīng)可減少非特異性擴(kuò)增,提高PCR的準(zhǔn)確性。
中文名稱:新港沙門(mén)氏菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
英文名稱:Salmonella newport
貨號(hào):GOY-M4453
規(guī)格:50T
產(chǎn)品特性: 高特異性:本產(chǎn)品采用熱啟動(dòng) DNA 聚合酶,90℃以上 2min 后具有擴(kuò)增活性,可大大提高 PCR 產(chǎn)物的特 異性。 靈敏度:本產(chǎn)品包含的優(yōu)化的緩沖液可檢測(cè)低拷貝數(shù)的模板,且重復(fù)性好。 高適用性:本產(chǎn)品可適用于任意熒光定量 PCR 儀。
試劑盒內(nèi)容:
Store at -20°C
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR:包括特別改造的熱啟動(dòng) Taq DNAPolymerase、MgCl2、優(yōu)化配比的 dNTPs 和 SYBR Green I、反應(yīng)緩沖液、PCR反應(yīng)增強(qiáng)劑、優(yōu)化劑以及穩(wěn)定劑等。PCR 反應(yīng)時(shí),只需將適當(dāng)?shù)牧呀饣旌弦骸⒁?、DNase-ddH2O添加到2×Real PCR EasyTM Mix-SYBR中即可用于PCR反應(yīng)。
ROX Reference Dye:一般用于 ABI、Stratagene 等公司的 Real Time PCR 擴(kuò)增儀上,用于調(diào)整 PCR 加樣誤差所引起的 PCR 管與管之的差異。不同儀器所需ROX Reference Dye 濃度不同,用戶可以根據(jù)儀器的推薦濃度添加。DNase-Free ddH2O:超純水,用于 PCR 反應(yīng)。
試劑盒應(yīng)用
熒光定量PCR進(jìn)行模板定量分析。
常規(guī)PCR擴(kuò)增。
樣品要求及注意事項(xiàng):
1、 如果提供實(shí)驗(yàn)材料,實(shí)驗(yàn)材料必須保證新鮮,請(qǐng)您采樣后立刻放入液氮中速凍或加入樣穩(wěn)定劑,并用干冰運(yùn)輸。
2、 如果樣品可以用Trigol法提總RNA ,也可以將樣品研磨后放在 Trigol中,動(dòng)植物組織 : 50~100mg/mlTrigol,貼壁細(xì)胞:10cm2/mlTrigol,懸浮細(xì)胞:5×106動(dòng)植物,酵母細(xì)胞或細(xì)菌細(xì)胞10×107/mlTrigol。
3、 如果提供RNA或cDNA我們要對(duì)您提供的材料進(jìn)行評(píng)估。
4、 實(shí)時(shí)熒光定量PCR服務(wù)您一定要提供樣品及要擴(kuò)增基因的詳細(xì)信息。
熒光定量PCR原理:
熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來(lái)也叫Real-Time PCR,是美國(guó)PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來(lái)的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來(lái)實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行,PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì),熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過(guò)一個(gè)循環(huán),收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào),這樣我們就可以通過(guò)熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言,熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段:熒光背景信號(hào)階段,熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段,擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋,無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒(méi)有線性關(guān)系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段, PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便,在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
黃芩苷(80%)24057-28-1人金屬肽酶含血小板反應(yīng)蛋白5(ADAM-TS 5)ELISA試劑盒
黃芩苷(95%)19438-60-9人δ氨基酰酸脫水酶(ALAD)ELISA試劑盒
黃芩苷(標(biāo)準(zhǔn)品)1072-47-5人血管生成素樣蛋白4(ANGPTL4)ELISA試劑盒
黃芩素822-36-6人金屬肽酶含血小板反應(yīng)蛋白9(ADAMTS9) ELISA試劑盒
黃芩素(標(biāo)準(zhǔn)品)691-37-2人醛脫酶2(ALDH2)ELISA試劑盒
黃藤素606-31-5人載脂蛋白C2(Apo C2)ELISA試劑盒
黃芫花(標(biāo)準(zhǔn)品)4316-23-8人載脂蛋白B(Apo-B)ELISA試劑盒
黃楊堿(標(biāo)準(zhǔn)品)6160-80-1人β抑制蛋白2(ARRB2)ELISA試劑盒
黃鐘花醌;拉帕醇 (標(biāo)準(zhǔn)品)6160-78-7人金屬肽酶含血小板反應(yīng)蛋白1(ADAMTS1) ELISA試劑盒
灰氈毛忍冬皂苷22042-71-3人金屬肽酶含血小板反應(yīng)蛋白7(ADAMTS7)ELISA試劑盒
灰氈毛忍冬皂苷(標(biāo)準(zhǔn)品)100-07-2人12-脂氧化酶/脂加氧酶(LOX-12)ELISA試劑盒
茴芹內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)830-09-1人載脂蛋白A4(apo-A4)ELISA試劑盒
茴香腦1126-09-6人抗頂體蛋白抗體(ACR)ELISA試劑盒人血小板反應(yīng)蛋白/凝血酶敏感蛋白1 銀杏雙黃酮
Scopoletine;Esculetin-6-Methyl ester;Chrysatropic acid;β-Methylesculetin;6-MethoxyuMbelliferone;7-Hydroxy-6-MethoxycouMarinChicken 6-OHDA (6-Hydroxydopamine) ELISA Kit
人血漿α顆粒膜蛋白 魚(yú)藤素
Sebacic acid;Decanedioic acid;1,8-Octanedicarboxylic acid;Sebacylic acidChicken ARHGDIα (Rho GDP Dissociation Inhibitor Alpha ) ELISA Kit
人末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9 異銀杏雙黃酮
Sebacic dinitrile;Decane dinitrile;Sebaconitrile;OctaMethylene dicyanideChicken MSTN (Myostatin) ELISA Kit
人補(bǔ)體蛋白4 異酰紫草素
新港沙門(mén)氏菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒SEC-BUTYLLITHIUMChicken DBP (Vitamin D Binding Protein) ELISA Kit
人補(bǔ)體蛋白3 酰紫草素
sec-ButylaMine;Frucote;Deccotane;TutaneChicken CGRP (Calcitonin Gene Related Peptide) ELISA Kit
人凝血因子Ⅱ 異丹葉大黃素
SeMicarbazide hydrochloride;HydrazinecarboxaMide;CarbaMyl hydrazine hydrochlorideChicken TG (Thyroglobulin) ELISA Kit
相對(duì)定量簡(jiǎn)介:
分析方法: ①雙標(biāo)曲法 ②2 - △Ct ③2 - △△Ct ④Pfaffi法
①雙標(biāo)準(zhǔn)曲線法簡(jiǎn)介
公式:
優(yōu)點(diǎn):分析簡(jiǎn)單,實(shí)驗(yàn)優(yōu)化簡(jiǎn)單產(chǎn)品僅用于科研
缺點(diǎn):對(duì)每一個(gè)基因,每一輪實(shí)驗(yàn)都必需做標(biāo)準(zhǔn)曲線;必需有固定的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線;這些標(biāo)準(zhǔn)品并不代表樣品擴(kuò)增的真實(shí)狀態(tài)應(yīng)用:基因表達(dá)調(diào)控研究中用與*的兩種相對(duì)定量方法之一。