詳細(xì)介紹
熒光定量PCR試劑盒:
Real Time PCR EasyTM-SYBR Green I試劑盒提供的2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR是一種使用SYBR Green I進(jìn)行Real Time PCR擴(kuò)增反應(yīng)的全新預(yù)混系統(tǒng),能大幅度提高產(chǎn)物特異性和反應(yīng)靈敏度。同時,提供ROX作為內(nèi)參染料。該試劑盒的熒光強(qiáng)度為同類產(chǎn)品的3-5倍,能更靈敏的、更直觀的反應(yīng)目的模板DNA的濃度。產(chǎn)品僅用于科研
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR包含本公司*的熱啟動Foregene Taq DNAPolymerase,該酶相對于普通Taq酶具有擴(kuò)增效率高、特異性擴(kuò)增能力強(qiáng)、錯配率低等優(yōu)點(diǎn)。用于熒光定量PCR反應(yīng)可減少非特異性擴(kuò)增,提高PCR的準(zhǔn)確性。
中文名稱:豬皰疹病毒通用探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Porcine herpesvirus
貨號:GOY-M4383
規(guī)格:50T
產(chǎn)品特性: 高特異性:本產(chǎn)品采用熱啟動 DNA 聚合酶,90℃以上 2min 后具有擴(kuò)增活性,可大大提高 PCR 產(chǎn)物的特 異性。 靈敏度:本產(chǎn)品包含的優(yōu)化的緩沖液可檢測低拷貝數(shù)的模板,且重復(fù)性好。 高適用性:本產(chǎn)品可適用于任意熒光定量 PCR 儀。
試劑盒內(nèi)容:
Store at -20°C
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR:包括特別改造的熱啟動 Taq DNAPolymerase、MgCl2、優(yōu)化配比的 dNTPs 和 SYBR Green I、反應(yīng)緩沖液、PCR反應(yīng)增強(qiáng)劑、優(yōu)化劑以及穩(wěn)定劑等。PCR 反應(yīng)時,只需將適當(dāng)?shù)牧呀饣旌弦?、引物、DNase-ddH2O添加到2×Real PCR EasyTM Mix-SYBR中即可用于PCR反應(yīng)。
ROX Reference Dye:一般用于 ABI、Stratagene 等公司的 Real Time PCR 擴(kuò)增儀上,用于調(diào)整 PCR 加樣誤差所引起的 PCR 管與管之的差異。不同儀器所需ROX Reference Dye 濃度不同,用戶可以根據(jù)儀器的推薦濃度添加。DNase-Free ddH2O:超純水,用于 PCR 反應(yīng)。
試劑盒應(yīng)用
熒光定量PCR進(jìn)行模板定量分析。
常規(guī)PCR擴(kuò)增。
樣品要求及注意事項:
1、 如果提供實驗材料,實驗材料必須保證新鮮,請您采樣后立刻放入液氮中速凍或加入樣穩(wěn)定劑,并用干冰運(yùn)輸。
2、 如果樣品可以用Trigol法提總RNA ,也可以將樣品研磨后放在 Trigol中,動植物組織 : 50~100mg/mlTrigol,貼壁細(xì)胞:10cm2/mlTrigol,懸浮細(xì)胞:5×106動植物,酵母細(xì)胞或細(xì)菌細(xì)胞10×107/mlTrigol。
3、 如果提供RNA或cDNA我們要對您提供的材料進(jìn)行評估。
4、 實時熒光定量PCR服務(wù)您一定要提供樣品及要擴(kuò)增基因的詳細(xì)信息。
熒光定量PCR原理:
熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行,PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計,熒光信號強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán),收集一個熒光強(qiáng)度信號,這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言,熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段, PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,我們可以選擇在這個階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便,在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
紫檀香(標(biāo)準(zhǔn)品)71-00-1表皮生長因子途徑底物蛋白2(EPN2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
紫菀(標(biāo)準(zhǔn)品)1483-01-8表皮生長因子途徑底物蛋白3(EPN3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
紫菀酮(標(biāo)準(zhǔn)品)78-70-6外血小板溶素1(EPPK1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
紫云英苷(標(biāo)準(zhǔn)品)16949-15-8伊默菌素(EMD)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
自然銅(醋煅)(標(biāo)準(zhǔn)品)554-13-2去泛素化酶3(DUB3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
棕櫚酸(標(biāo)準(zhǔn)品)85144-11-2黑素曲菌素(MREG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
棕矢車菊素(標(biāo)準(zhǔn)品)919-16-4天冬酰胺氨肽酶(ASPEP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
走馬胎(標(biāo)準(zhǔn)品)7789-24-4脫氧鳥苷激酶(DGUOK)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
祖師麻(唐古特瑞香)(標(biāo)準(zhǔn)品)6108-23-2二葉酸還原酶(DHFR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
鉆山風(fēng)(標(biāo)準(zhǔn)品)7580-67-8D-天冬氨酸氧化酶(DDO)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
醉椒素553-91-3二羰基/L-木酮糖還原酶(DCXR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
醉魚草皂苷IVb(標(biāo)準(zhǔn)品)944493dCMP脫氨酶(DCTD)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
左旋多巴(標(biāo)準(zhǔn)品)434-13-9Dachsous 2蛋白(DCHS2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)人肌球蛋白輕鏈激酶 L-氨酰胺鹽酸鹽
Evans blue;4,4′-Bis[7-(1-aMino-8-hydroxy-2,4-disulfo)naphthylazo]3,3′-bitolyl tetrasodiuM salt;Direct blue 53;C.I. 23860Guinea pig TMPRSS2 (Transmembrane 豬皰疹病毒通用探針法熒光定量PCR試劑盒Protease, Serine 2) ELISA Kit
人谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶pi基因 β-氨酸酯鹽酸鹽
EXOSAP-IT 2000 RXNSGuinea pig CALU (Calumenin) ELISA Kit
人谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶 D-異亮氨酸
Fast black B salt;4,4′-DiaMinodiphenylaMinesulfate salt;C.1. 37245;Guinea pig IFN-β (Interferon Beta) ELISA Kit
人泛素分解酶 CBZ-L-纈氨酸
Fast black G salt;C.I. 37260;Guinea pig MCP-1 (Monocyte Chemotactic Protein 1) ELISA Kit
人分泌型磷脂酶A2 2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四基脲六氟磷酸酯
Fast blue BB salt;4-Benzoyl-aMino-2,5-diethoxybenzene diazoniuM chloride heMi[Zinc chloride]salt;Diazo fast blue BB;Fast blue BBN salt;Azoene fast blue BBN salt;4-AMino-2,5-diethoxybenzanilide diazotate zinc doGuinea pig IgM (Immunoglobulin M) ELISA Kit
人泛素連接酶 芴氧羰酰琥珀酰亞胺
Fast dark blue R salt;Azoic diazo No.51;Diazo fast dark blue R;4-AMino-2,5-diMethoxy-4′-nitroazodichlorobenzene diazoniuM salt;C.I.37195;Guinea pig GATA4 (GATA Binding Protein 4) ELISA Kit
相對定量簡介:
分析方法: ①雙標(biāo)曲法 ②2 - △Ct ③2 - △△Ct ④Pfaffi法
①雙標(biāo)準(zhǔn)曲線法簡介
公式:
優(yōu)點(diǎn):分析簡單,實驗優(yōu)化簡單產(chǎn)品僅用于科研
缺點(diǎn):對每一個基因,每一輪實驗都必需做標(biāo)準(zhǔn)曲線;必需有固定的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線;這些標(biāo)準(zhǔn)品并不代表樣品擴(kuò)增的真實狀態(tài)應(yīng)用:基因表達(dá)調(diào)控研究中用與*的兩種相對定量方法之一。