詳細介紹
熒光定量PCR試劑盒:
Real Time PCR EasyTM-SYBR Green I試劑盒提供的2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR是一種使用SYBR Green I進行Real Time PCR擴增反應(yīng)的全新預(yù)混系統(tǒng),能大幅度提高產(chǎn)物特異性和反應(yīng)靈敏度。同時,提供ROX作為內(nèi)參染料。該試劑盒的熒光強度為同類產(chǎn)品的3-5倍,能更靈敏的、更直觀的反應(yīng)目的模板DNA的濃度。產(chǎn)品僅用于科研
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR包含本公司*的熱啟動Foregene Taq DNAPolymerase,該酶相對于普通Taq酶具有擴增效率高、特異性擴增能力強、錯配率低等優(yōu)點。用于熒光定量PCR反應(yīng)可減少非特異性擴增,提高PCR的準確性。
中文名稱:里氏立克次氏體探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Rickettsia risticii
貨號:GOY-M4433
規(guī)格:50T
產(chǎn)品特性: 高特異性:本產(chǎn)品采用熱啟動 DNA 聚合酶,90℃以上 2min 后具有擴增活性,可大大提高 PCR 產(chǎn)物的特 異性。 靈敏度:本產(chǎn)品包含的優(yōu)化的緩沖液可檢測低拷貝數(shù)的模板,且重復(fù)性好。 高適用性:本產(chǎn)品可適用于任意熒光定量 PCR 儀。
試劑盒內(nèi)容:
Store at -20°C
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR:包括特別改造的熱啟動 Taq DNAPolymerase、MgCl2、優(yōu)化配比的 dNTPs 和 SYBR Green I、反應(yīng)緩沖液、PCR反應(yīng)增強劑、優(yōu)化劑以及穩(wěn)定劑等。PCR 反應(yīng)時,只需將適當?shù)牧呀饣旌弦?、引物、DNase-ddH2O添加到2×Real PCR EasyTM Mix-SYBR中即可用于PCR反應(yīng)。
ROX Reference Dye:一般用于 ABI、Stratagene 等公司的 Real Time PCR 擴增儀上,用于調(diào)整 PCR 加樣誤差所引起的 PCR 管與管之的差異。不同儀器所需ROX Reference Dye 濃度不同,用戶可以根據(jù)儀器的推薦濃度添加。DNase-Free ddH2O:超純水,用于 PCR 反應(yīng)。
試劑盒應(yīng)用
熒光定量PCR進行模板定量分析。
常規(guī)PCR擴增。
樣品要求及注意事項:
1、 如果提供實驗材料,實驗材料必須保證新鮮,請您采樣后立刻放入液氮中速凍或加入樣穩(wěn)定劑,并用干冰運輸。
2、 如果樣品可以用Trigol法提總RNA ,也可以將樣品研磨后放在 Trigol中,動植物組織 : 50~100mg/mlTrigol,貼壁細胞:10cm2/mlTrigol,懸浮細胞:5×106動植物,酵母細胞或細菌細胞10×107/mlTrigol。
3、 如果提供RNA或cDNA我們要對您提供的材料進行評估。
4、 實時熒光定量PCR服務(wù)您一定要提供樣品及要擴增基因的詳細信息。
熒光定量PCR原理:
熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標記探針或相應(yīng)的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應(yīng)的進行,PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計,熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán),收集一個熒光強度信號,這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言,熒光擴增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段, PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便,在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
飛揚草(標準品)4532-96-1多萜醇磷酸-N-酰氨基葡萄糖磷酸轉(zhuǎn)移酶1(DPAGT1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
非洲防己堿(標準品)6158-45-8DNA損傷誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子3(DDIT3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
榧子(標準品)207122-15-4H2A組蛋白家族成員V(H2AFV)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
粉萆薢(標準品)60348-60-9B-細胞κ-輕肽基因增強子抑制因子激酶β(IκBKβ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
粉防己堿;漢防己素(標準品)189084-64-8Snail同源物1(SNAI1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
楓香脂(標準品)5436-43-1神經(jīng)調(diào)節(jié)素4(NRG4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
蜂房(標準品)30931-67-0含Kazal型絲氨酸蛋白酶抑制劑域蛋白1(KAZALD1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
蜂膠(標準品)551-93-9棘皮動物微管關(guān)聯(lián)蛋白樣蛋白2(EML2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
鳳尾草(標準品)24615-84-7血管緊張素1-7(Ang1-7)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
鳳仙萜四醇苷A36947-68-9血管緊張素Ⅱ(ANGⅡ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
鳳仙萜四醇苷B929-06-6干擾素γ(IFNγ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
里氏立克次氏體探針法熒光定量PCR試劑盒鳳仙萜四醇苷C2963-66-8吻素受體(KISS1R)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
鳳仙萜四醇苷F835-64-3吻素受體(KISS1R)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)人新生兒促狀腺素 4-基傘形酮(羥香豆素)
PerMutitChicken GPX3 (Glutathione Peroxidase 3, Plasma) ELISA Kit
人妊娠特異性β1糖蛋白 DL-苯氨酸
Perylene;peri-DinaphthaleneChicken PEDF (Pigment Epithelium Derived Factor ) ELISA Kit
人胎盤泌乳素 TPI-287
pGEM-TEasyVectorSysteMI(-20℃)Chicken REG1α (Regenerating Islet Derived Protein 1 Alpha) ELISA Kit
人雄激素結(jié)合蛋白 Tesetaxel
Phenanthrene;PhenanthrinChicken PP13 (Placental Protein13) ELISA Kit
人抗滋養(yǎng)膜細胞抗體 D-苯氨酸
PhenazineChicken EPCR (Endothelial Protein C Receptor) ELISA Kit
人抗透明帶抗體 Terameprocol
Phenol blue;Chicken PHLDA2 (Pleckstrin Homology Like Domain Family A, Member 2) ELISA Kit
相對定量簡介:
分析方法: ①雙標曲法 ②2 - △Ct ③2 - △△Ct ④Pfaffi法
①雙標準曲線法簡介
公式:
優(yōu)點:分析簡單,實驗優(yōu)化簡單產(chǎn)品僅用于科研
缺點:對每一個基因,每一輪實驗都必需做標準曲線;必需有固定的標準品做標準曲線;這些標準品并不代表樣品擴增的真實狀態(tài)應(yīng)用:基因表達調(diào)控研究中用與*的兩種相對定量方法之一。