ELISA Kit檢測試劑盒優(yōu)點多，更加方便我們的科研學者進行科學實驗，是科研實驗的好伙伴。

實驗流程:
1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備；
2. 加樣（標準品及樣本）100µL，37°C孵育1小時；
3. 吸棄，加檢測溶液A100µL，37°C孵育1小時；
4. 洗板3次；
5. 加檢測溶液B100µL，37°C孵育30分鐘；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90µL，37°C孵育10-20分鐘；
8. 加終止液50µL，立即450nm讀數。

樣本實驗前準備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。

（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（2）血漿：
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
（4）細胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。
（5）培養(yǎng)細胞
檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（6）組織標本
切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐３?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
注意事項：
1.加樣：
①實驗樣本過多時，可分批次操作，以減少實驗時間延長造成的誤差；
②加酶試劑后，用吸水紙吸干孔外試劑；
③作定量試驗時，使用加樣器加注試劑，并經常校正其準確性，此外，要做到一份樣本一個移液頭，防止交叉污染。
2.溫育：
①如有兩種溫度，盡量使用較低的溫育溫度、較長反應時間的條件；
②用1個小溫度計放置在板孔反應液中測量觀察；
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學梯度會造成“邊緣效應”，因此盡量采用水浴；
3.洗板：
①手工洗板時，拍板時要垂直，避免交叉污染，用力不能過猛，防止抗原抗體復合物脫離；
②洗板機洗板時應經常檢查沖洗頭是否通暢，若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出；
③為了洗滌效果好，實驗室可采用機器與人工洗滌相結合的方法，在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次，或適當增加洗板的次數；
4.顯色：
ELISA試劑盒中，如以四甲基聯苯胺(TMB)為底物，則提供的底物為A和B兩瓶應用液；如以鄰苯二胺(OPD)為底物，則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應條件為37℃或室溫反應15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑，要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光，但A、B液應盡量避免接觸金屬器械。
5.判定：
讀取結果要在15-30 min內完成，定性測定用肉眼判讀試驗結果時，反應板應水平距離白色背景10-15 cm；定量測定時用酶標儀讀取結果，酶標儀不應置于陽光或強光照射下，需先預熱15-30 min再進行測試。

WI-38/VA13人SV－40轉化肺成纖維細胞1ml/T75

HLF-a人肺細胞1ml/T75

SPC-A-1人肺腺癌細胞1ml/T75

95-D人高轉移肺細胞1ml/T75

SK-LU-1人低分化肺腺癌細胞1ml/T75

NCI-H446人小細胞肺癌細胞1ml/T75

NCI-H23人非小細胞肺癌細胞1ml/T75

NCI-H157人非小細胞肺癌細胞1ml/T75

NCI-H358人非小細胞肺癌細胞1ml/T75

NCI-H524人非小細胞肺癌細胞1ml/T75

NCI-H838人非小細胞肺癌細胞1ml/T75

NCI-H1299人非小細胞肺癌細胞1ml/T75

NCI-H1975人非小細胞肺癌細胞1ml/T75

HCC827人非小細胞肺癌細胞1ml/T75

FGF-23成纖維細胞生長因子23ELISA KitSalmonella tropina  沙門氏菌菌體蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

Phospho-CEBP alpha (Thr222/226)  磷酸化轉錄調節(jié)因子CEBP α 抗體 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-Mink IgG/Cy7  Cy7標記的兔抗水貂IgG 規(guī)格: 0.1ml

TG  兔抗甲狀球蛋白 規(guī)格: 0.1ml

C4orf19  4號染色體開放閱讀框19抗體 規(guī)格: 0.2ml

SMC1  染色體結構維持蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml

MSH3  錯配修復蛋白3抗體 規(guī)格: 0.1ml

Mouse Anti-rat IgG/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標記的小鼠抗大鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml

Bag1/RAP46  抑凋亡基因bag1抗體 規(guī)格: 0.1ml

TSPAN20/UPIb  四分子交聯體20抗體（四旋蛋白） 規(guī)格: 0.2ml

SAMHD1/HDDC1/MOP5  單核細胞蛋白5抗體 規(guī)格: 0.2ml

RBM5/LUCA15  瘤抑制基因LUCA15抗體 規(guī)格: 0.2ml

COLEC12  凝集胎盤蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-pig IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標記的兔抗豬IgG 規(guī)格: 0.1ml

使用方法：
測定法的靈敏度來自作為報告的酶。，酶是一種有機催化劑，很少量的酶即可誘導大量的催化反應，產生可供觀察的顯色反應現象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。   24μg/ml    5號標準品    150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
 12μg/ml    4號標準品    150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
 6μg/ml     3號標準品    150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
 3μg/ml     2號標準品    150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
 1.5μg/ml   1號標準品    150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
2. 加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。|
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
11. 測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。