詳細(xì)介紹
熒光定量PCR試劑盒:
Real Time PCR EasyTM-SYBR Green I試劑盒提供的2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR是一種使用SYBR Green I進(jìn)行Real Time PCR擴(kuò)增反應(yīng)的全新預(yù)混系統(tǒng),能大幅度提高產(chǎn)物特異性和反應(yīng)靈敏度。同時(shí),提供ROX作為內(nèi)參染料。該試劑盒的熒光強(qiáng)度為同類產(chǎn)品的3-5倍,能更靈敏的、更直觀的反應(yīng)目的模板DNA的濃度。
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR包含本公司*的熱啟動(dòng)Foregene Taq DNAPolymerase,該酶相對(duì)于普通Taq酶具有擴(kuò)增效率高、特異性擴(kuò)增能力強(qiáng)、錯(cuò)配率低等優(yōu)點(diǎn)。用于熒光定量PCR反應(yīng)可減少非特異性擴(kuò)增,提高PCR的準(zhǔn)確性。
中文名稱:封閉毛細(xì)線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Capillaria obsignata
貨號(hào):GOY-M3808
規(guī)格:50T
產(chǎn)品特性: 高特異性:本產(chǎn)品采用熱啟動(dòng) DNA 聚合酶,90℃以上 2min 后具有擴(kuò)增活性,可大大提高 PCR 產(chǎn)物的特 異性。 靈敏度:本產(chǎn)品包含的優(yōu)化的緩沖液可檢測(cè)低拷貝數(shù)的模板,且重復(fù)性好。 高適用性:本產(chǎn)品可適用于任意熒光定量 PCR 儀。
試劑盒內(nèi)容:
Store at -20°C
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR:包括特別改造的熱啟動(dòng) Taq DNAPolymerase、MgCl2、優(yōu)化配比的 dNTPs 和 SYBR Green I、反應(yīng)緩沖液、PCR反應(yīng)增強(qiáng)劑、優(yōu)化劑以及穩(wěn)定劑等。PCR 反應(yīng)時(shí),只需將適當(dāng)?shù)牧呀饣旌弦?、引物、DNase-ddH2O添加到2×Real PCR EasyTM Mix-SYBR中即可用于PCR反應(yīng)。
ROX Reference Dye:一般用于 ABI、Stratagene 等公司的 Real Time PCR 擴(kuò)增儀上,用于調(diào)整 PCR 加樣誤差所引起的 PCR 管與管之的差異。不同儀器所需ROX Reference Dye 濃度不同,用戶可以根據(jù)儀器的推薦濃度添加。DNase-Free ddH2O:超純水,用于 PCR 反應(yīng)。
試劑盒應(yīng)用
熒光定量PCR進(jìn)行模板定量分析。
常規(guī)PCR擴(kuò)增。
樣品要求及注意事項(xiàng):
1、 如果提供實(shí)驗(yàn)材料,實(shí)驗(yàn)材料必須保證新鮮,請(qǐng)您采樣后立刻放入液氮中速凍或加入樣穩(wěn)定劑,并用干冰運(yùn)輸。
2、 如果樣品可以用Trigol法提總RNA ,也可以將樣品研磨后放在 Trigol中,動(dòng)植物組織 : 50~100mg/mlTrigol,貼壁細(xì)胞:10cm2/mlTrigol,懸浮細(xì)胞:5×106動(dòng)植物,酵母細(xì)胞或細(xì)菌細(xì)胞10×107/mlTrigol。
3、 如果提供RNA或cDNA我們要對(duì)您提供的材料進(jìn)行評(píng)估。
4、 實(shí)時(shí)熒光定量PCR服務(wù)您一定要提供樣品及要擴(kuò)增基因的詳細(xì)信息。
熒光定量PCR原理:
熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行,PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì),熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個(gè)循環(huán),收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào),這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言,熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段:熒光背景信號(hào)階段,熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段,擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段, PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便,在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
脫葉靈93675-85-5激肽釋放酶3(KLK3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
生根粉487-41-2激肽釋放酶3(KLK3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
花寶1號(hào)79831-76-8前列腺酸性磷酸酶(ACP3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
花寶2號(hào)6812-81-3前列腺酸性磷酸酶(ACP3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
花寶3號(hào)2901-66-8胎蛋白(αFP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
花寶5號(hào)50-55-5胎蛋白(αFP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
玉米素核苷24815-24-5髓鞘堿性蛋白(MBP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
茶精51020-87-2髓鞘堿性蛋白(MBP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
(+)-兒茶素13292-46-1髓鞘堿性蛋白(MBP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
1,3-二基黃嘌呤73870-35-6細(xì)胞周期素D1(CCND1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
百草敵23518-30-1細(xì)胞周期素D1(CCND1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
酸-1-萘酯97938-31-3細(xì)胞周期素D1(CCND1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
封閉毛細(xì)線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒酸-2-萘酯97938-31-3細(xì)胞周期素D2(CCND2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)整合素α1抗原 高黃綠酸
1,1,3,3-TetraethoxypropaneMonkey FGF23 (Fibroblast Growth Factor 23) ELISA Kit
整合素α4β7抗原 3-香葉基-5,7,2',4'-四羥基黃酮
1,1,2-TrichlorotrifluoroethaneMonkey ApoC1 (Apolipoprotein C1) ELISA Kit
整合素αE2抗原 5'-香葉基-5,7,2',4'-四羥基黃酮
(Z)-9-TricoseneMonkey ELA2B (Elastase 2B) ELISA Kit
ENPP3抗原 (E)-阿魏酸酯
(S)-(+)-1,2-PropanediolMonkey GFAP (Glial Fibrillary Acidic Protein) ELISA Kit
支架蛋白抗原 苦瓜皂苷 C
(R)-(−)-LeucinolMonkey GUK1 (Guanylate Kinase 1) ELISA Kit
干擾素調(diào)節(jié)因子抗原 苦瓜皂苷 L
(R)-(-)-1,2-PropanediolMonkey TNFSF14 (Tumor Necrosis Factor Ligand Superfamily, Member 14)ELISA Kit
相對(duì)定量簡(jiǎn)介:
分析方法: ①雙標(biāo)曲法 ②2 - △Ct ③2 - △△Ct ④Pfaffi法
①雙標(biāo)準(zhǔn)曲線法簡(jiǎn)介
公式:
優(yōu)點(diǎn):分析簡(jiǎn)單,實(shí)驗(yàn)優(yōu)化簡(jiǎn)單
缺點(diǎn):對(duì)每一個(gè)基因,每一輪實(shí)驗(yàn)都必需做標(biāo)準(zhǔn)曲線;必需有固定的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線;這些標(biāo)準(zhǔn)品并不代表樣品擴(kuò)增的真實(shí)狀態(tài)應(yīng)用:基因表達(dá)調(diào)控研究中用與*的兩種相對(duì)定量方法之一。