熒光定量PCR試劑盒：
Real Time PCR EasyTM-SYBR Green I試劑盒提供的2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR是一種使用SYBR Green I進行Real Time PCR擴增反應的全新預混系統，能大幅度提高產物特異性和反應靈敏度。同時，提供ROX作為內參染料。該試劑盒的熒光強度為同類產品的3-5倍，能更靈敏的、更直觀的反應目的模板DNA的濃度。
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR包含本公司*的熱啟動Foregene Taq DNAPolymerase，該酶相對于普通Taq酶具有擴增效率高、特異性擴增能力強、錯配率低等優(yōu)點。用于熒光定量PCR反應可減少非特異性擴增，提高PCR的準確性。
中文名稱：禽類支原體通用探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Avian Mycoplasma spp.
貨號：GOY-M3684
規(guī)格：50T
產品特性： 高特異性：本產品采用熱啟動 DNA 聚合酶，90℃以上 2min 后具有擴增活性，可大大提高 PCR 產物的特 異性。 靈敏度：本產品包含的優(yōu)化的緩沖液可檢測低拷貝數的模板，且重復性好。 高適用性：本產品可適用于任意熒光定量 PCR 儀。

試劑盒內容:
Store at -20°C
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR：包括特別改造的熱啟動 Taq DNAPolymerase、MgCl2、優(yōu)化配比的 dNTPs 和 SYBR Green I、反應緩沖液、PCR反應增強劑、優(yōu)化劑以及穩(wěn)定劑等。PCR 反應時，只需將適當的裂解混合液、引物、DNase-ddH2O添加到2×Real PCR EasyTM Mix-SYBR中即可用于PCR反應。
ROX Reference Dye：一般用于 ABI、Stratagene 等公司的 Real Time PCR 擴增儀上，用于調整 PCR 加樣誤差所引起的 PCR 管與管之的差異。不同儀器所需ROX Reference Dye 濃度不同，用戶可以根據儀器的推薦濃度添加。DNase-Free ddH2O：超純水，用于 PCR 反應。
試劑盒應用
熒光定量PCR進行模板定量分析。
常規(guī)PCR擴增。
樣品要求及注意事項：
1、 如果提供實驗材料，實驗材料必須保證新鮮，請您采樣后立刻放入液氮中速凍或加入樣穩(wěn)定劑，并用干冰運輸。
2、 如果樣品可以用Trigol法提總RNA ，也可以將樣品研磨后放在 Trigol中，動植物組織 ： 50～100mg/mlTrigol，貼壁細胞：10cm2/mlTrigol，懸浮細胞：5×106動植物，酵母細胞或細菌細胞10×107/mlTrigol。
3、 如果提供RNA或cDNA我們要對您提供的材料進行評估。
4、 實時熒光定量PCR服務您一定要提供樣品及要擴增基因的詳細信息。

熒光定量PCR原理：
熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術。該技術是在常規(guī)PCR基礎上加入熒光標記探針或相應的熒光染料來實現其定量功能的。其原理：隨著PCR反應的進行，PCR反應產物不斷累計，熒光信號強度也等比例增加。每經過一個循環(huán)，收集一個熒光強度信號，這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產物量的變化，從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言，熒光擴增曲線可以分成三個階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產物量的變化。而在平臺期，擴增產物已不再呈指數級的增加，PCR 的終產物量與起始模板量之間沒有線性關系，根據終的 PCR 產物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數。只有在熒光信號指數擴增階段， PCR產物量的對數值與起始模板量之間存在線性關系，我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便，在實時熒光定量 PCR 技術中引入了兩個非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
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相對定量簡介：
分析方法： ①雙標曲法 ②2 － △Ct ③2 － △△Ct ④Pfaffi法
①雙標準曲線法簡介
公式：
優(yōu)點：分析簡單，實驗優(yōu)化簡單
缺點：對每一個基因，每一輪實驗都必需做標準曲線；必需有固定的標準品做標準曲線；這些標準品并不代表樣品擴增的真實狀態(tài)應用：基因表達調控研究中用與*的兩種相對定量方法之一。