熒光定量PCR試劑盒：
Real Time PCR EasyTM-SYBR Green I試劑盒提供的2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR是一種使用SYBR Green I進(jìn)行Real Time PCR擴(kuò)增反應(yīng)的全新預(yù)混系統(tǒng)，能大幅度提高產(chǎn)物特異性和反應(yīng)靈敏度。同時(shí)，提供ROX作為內(nèi)參染料。該試劑盒的熒光強(qiáng)度為同類(lèi)產(chǎn)品的3-5倍，能更靈敏的、更直觀的反應(yīng)目的模板DNA的濃度。
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR包含本公司*的熱啟動(dòng)Foregene Taq DNAPolymerase，該酶相對(duì)于普通Taq酶具有擴(kuò)增效率高、特異性擴(kuò)增能力強(qiáng)、錯(cuò)配率低等優(yōu)點(diǎn)。用于熒光定量PCR反應(yīng)可減少非特異性擴(kuò)增，提高PCR的準(zhǔn)確性。
中文名稱(chēng)：蜂房小甲蟲(chóng)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
英文名稱(chēng)：Aethina tumida
貨號(hào)：GOY-M3647
規(guī)格：50T
產(chǎn)品特性： 高特異性：本產(chǎn)品采用熱啟動(dòng) DNA 聚合酶，90℃以上 2min 后具有擴(kuò)增活性，可大大提高 PCR 產(chǎn)物的特 異性。 靈敏度：本產(chǎn)品包含的優(yōu)化的緩沖液可檢測(cè)低拷貝數(shù)的模板，且重復(fù)性好。 高適用性：本產(chǎn)品可適用于任意熒光定量 PCR 儀。

試劑盒內(nèi)容:
Store at -20°C
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR：包括特別改造的熱啟動(dòng) Taq DNAPolymerase、MgCl2、優(yōu)化配比的 dNTPs 和 SYBR Green I、反應(yīng)緩沖液、PCR反應(yīng)增強(qiáng)劑、優(yōu)化劑以及穩(wěn)定劑等。PCR 反應(yīng)時(shí)，只需將適當(dāng)?shù)牧呀饣旌弦?、引物、DNase-ddH2O添加到2×Real PCR EasyTM Mix-SYBR中即可用于PCR反應(yīng)。
ROX Reference Dye：一般用于 ABI、Stratagene 等公司的 Real Time PCR 擴(kuò)增儀上，用于調(diào)整 PCR 加樣誤差所引起的 PCR 管與管之的差異。不同儀器所需ROX Reference Dye 濃度不同，用戶(hù)可以根據(jù)儀器的推薦濃度添加。DNase-Free ddH2O：超純水，用于 PCR 反應(yīng)。
試劑盒應(yīng)用
熒光定量PCR進(jìn)行模板定量分析。
常規(guī)PCR擴(kuò)增。
樣品要求及注意事項(xiàng)：
1、 如果提供實(shí)驗(yàn)材料，實(shí)驗(yàn)材料必須保證新鮮，請(qǐng)您采樣后立刻放入液氮中速凍或加入樣穩(wěn)定劑，并用干冰運(yùn)輸。
2、 如果樣品可以用Trigol法提總RNA ，也可以將樣品研磨后放在 Trigol中，動(dòng)植物組織 ： 50～100mg/mlTrigol，貼壁細(xì)胞：10cm2/mlTrigol，懸浮細(xì)胞：5×106動(dòng)植物，酵母細(xì)胞或細(xì)菌細(xì)胞10×107/mlTrigol。
3、 如果提供RNA或cDNA我們要對(duì)您提供的材料進(jìn)行評(píng)估。
4、 實(shí)時(shí)熒光定量PCR服務(wù)您一定要提供樣品及要擴(kuò)增基因的詳細(xì)信息。

熒光定量PCR原理：
熒光定量PCR早稱(chēng)TaqMan PCR，后來(lái)也叫Real-Time PCR，是美國(guó)PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來(lái)的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來(lái)實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過(guò)一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào)，這樣我們就可以通過(guò)熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號(hào)階段，熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒(méi)有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
以下是公司正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品：

重組膜粘連蛋白-5抗體507-70-0維生素B12檢測(cè)試劑盒

銜接蛋白1抗體508-02-1維生素B1檢測(cè)試劑盒

凋亡蛋白活性因子-1抗體509-18-2維生素A檢測(cè)試劑盒

APC活化蛋白C抗體509-20-6微管相關(guān)蛋白tau檢測(cè)試劑盒

載脂蛋白D抗體509-24-0微管相關(guān)蛋白2檢測(cè)試劑盒

載脂蛋白E抗體51014-29-0微管相關(guān)蛋白1A/1B輕鏈3B檢測(cè)試劑盒

淀粉樣肽前體蛋白抗體510-30-5微管相關(guān)蛋白1A/1B輕鏈3A檢測(cè)試劑盒

水通道蛋白-2抗體51059-44-0微管微絲交聯(lián)因子1檢測(cè)試劑盒

水通道蛋白-3抗體512-04-9微管多特異性有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2檢測(cè)試劑盒

水通道蛋白-4抗體51330-27-9微管多特異性有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1檢測(cè)試劑盒

雄激素受體抗體51415-02-2微管蛋白,γ復(fù)合體關(guān)聯(lián)蛋白3檢測(cè)試劑盒

ARC抗體515-03-7網(wǎng)膜素檢測(cè)試劑盒

ADP核糖基化因子6抗體517-88-4晚期氧化蛋白產(chǎn)物檢測(cè)試劑盒mTSB肉湯Tide Quencher™ 3 phosphoramidite [TQ3 phosphoramidite]  大鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)ELISA Kit

新生霉素Tide Quencher™ 3 phosphoramidite [TQ3 phosphoramidite]  大鼠血管緊張素Ⅱ受體1(AT1R)抗體ELISA Kit

SD-39瓊脂Tide Quencher™ 4 phosphoramidite [TQ4 phosphoramidite] 大鼠血管緊張素Ⅱ受體1(AT1R)ELISA Kit

大腸桿菌／大腸菌群顯色培養(yǎng)基(平皿)Tide Quencher™ 4 phosphoramidite [TQ4 phosphoramidite]  大鼠血管緊張素1-7(Ang1-7)ELISA Kit

蜂房小甲蟲(chóng)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒沙門(mén)氏菌顯色培養(yǎng)基Tide Quencher™ 5 phosphoramidite [TQ5 phosphoramidite]  大鼠血管動(dòng)蛋白(AMOT)ELISA Kit

哥倫比亞血瓊脂基礎(chǔ)Tide Quencher™ 5 phosphoramidite [TQ5 phosphoramidite]  大鼠胸腺素β-4(TMSB4X)ELISA Kit

緩沖李氏菌增菌肉湯基礎(chǔ)Tide Quencher™ 4 acid [TQ4 acid]大鼠胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素(TSLP)ELISA Kit

PALCAM瓊脂Tide Quencher™ 4 amine [TQ4 amine]  大鼠胸腺表達(dá)趨化因子25(TECK/CCL25)ELISA Kit

Half–Fraser培養(yǎng)基Tide Quencher™ 4 CPG [TQ4 CPG] *500 Å*大鼠新喋呤ELISA Kit

Fraser培養(yǎng)基Tide Quencher™ 4 CPG [TQ4 CPG] *1000 Å*大鼠鋅金屬硫蛋白(Zn-MT)ELISA Kit

弧菌顯色培養(yǎng)基Tide Quencher™ 4 maleimide [TQ4 maleimide]  大鼠心肌肌鈣蛋白T(cTn-T)ELISA Kit

Elek氏培養(yǎng)基Tide Quencher™ 4 succinimidyl ester [TQ4 SE]大鼠心肌肌鈣蛋白C(TnC)ELISA Kit

R2A瓊脂Tide Quencher™ 1 acid [TQ1 acid]   大鼠腺苷酸環(huán)化酶1(AC-1)ELISA Kit

相對(duì)定量簡(jiǎn)介：
分析方法： ①雙標(biāo)曲法 ②2 － △Ct ③2 － △△Ct ④Pfaffi法
①雙標(biāo)準(zhǔn)曲線法簡(jiǎn)介
公式：
優(yōu)點(diǎn)：分析簡(jiǎn)單，實(shí)驗(yàn)優(yōu)化簡(jiǎn)單
缺點(diǎn)：對(duì)每一個(gè)基因，每一輪實(shí)驗(yàn)都必需做標(biāo)準(zhǔn)曲線；必需有固定的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線；這些標(biāo)準(zhǔn)品并不代表樣品擴(kuò)增的真實(shí)狀態(tài)應(yīng)用：基因表達(dá)調(diào)控研究中用與*的兩種相對(duì)定量方法之一。