熒光定量PCR試劑盒：
Real Time PCR EasyTM-SYBR Green I試劑盒提供的2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR是一種使用SYBR Green I進(jìn)行Real Time PCR擴(kuò)增反應(yīng)的全新預(yù)混系統(tǒng)，能大幅度提高產(chǎn)物特異性和反應(yīng)靈敏度。同時(shí)，提供ROX作為內(nèi)參染料。該試劑盒的熒光強(qiáng)度為同類產(chǎn)品的3-5倍，能更靈敏的、更直觀的反應(yīng)目的模板DNA的濃度。
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR包含本公司*的熱啟動(dòng)Foregene Taq DNAPolymerase，該酶相對(duì)于普通Taq酶具有擴(kuò)增效率高、特異性擴(kuò)增能力強(qiáng)、錯(cuò)配率低等優(yōu)點(diǎn)。用于熒光定量PCR反應(yīng)可減少非特異性擴(kuò)增，提高PCR的準(zhǔn)確性。
中文名稱：戈氏放線菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
英文名稱：Actinomyces gerencseriae
貨號(hào)：GOY-M3629
規(guī)格：50T
產(chǎn)品特性： 高特異性：本產(chǎn)品采用熱啟動(dòng) DNA 聚合酶，90℃以上 2min 后具有擴(kuò)增活性，可大大提高 PCR 產(chǎn)物的特 異性。 靈敏度：本產(chǎn)品包含的優(yōu)化的緩沖液可檢測(cè)低拷貝數(shù)的模板，且重復(fù)性好。 高適用性：本產(chǎn)品可適用于任意熒光定量 PCR 儀。

試劑盒內(nèi)容:
Store at -20°C
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR：包括特別改造的熱啟動(dòng) Taq DNAPolymerase、MgCl2、優(yōu)化配比的 dNTPs 和 SYBR Green I、反應(yīng)緩沖液、PCR反應(yīng)增強(qiáng)劑、優(yōu)化劑以及穩(wěn)定劑等。PCR 反應(yīng)時(shí)，只需將適當(dāng)?shù)牧呀饣旌弦?、引物、DNase-ddH2O添加到2×Real PCR EasyTM Mix-SYBR中即可用于PCR反應(yīng)。
ROX Reference Dye：一般用于 ABI、Stratagene 等公司的 Real Time PCR 擴(kuò)增儀上，用于調(diào)整 PCR 加樣誤差所引起的 PCR 管與管之的差異。不同儀器所需ROX Reference Dye 濃度不同，用戶可以根據(jù)儀器的推薦濃度添加。DNase-Free ddH2O：超純水，用于 PCR 反應(yīng)。
試劑盒應(yīng)用
熒光定量PCR進(jìn)行模板定量分析。
常規(guī)PCR擴(kuò)增。
樣品要求及注意事項(xiàng)：
1、 如果提供實(shí)驗(yàn)材料，實(shí)驗(yàn)材料必須保證新鮮，請(qǐng)您采樣后立刻放入液氮中速凍或加入樣穩(wěn)定劑，并用干冰運(yùn)輸。
2、 如果樣品可以用Trigol法提總RNA ，也可以將樣品研磨后放在 Trigol中，動(dòng)植物組織 ： 50～100mg/mlTrigol，貼壁細(xì)胞：10cm2/mlTrigol，懸浮細(xì)胞：5×106動(dòng)植物，酵母細(xì)胞或細(xì)菌細(xì)胞10×107/mlTrigol。
3、 如果提供RNA或cDNA我們要對(duì)您提供的材料進(jìn)行評(píng)估。
4、 實(shí)時(shí)熒光定量PCR服務(wù)您一定要提供樣品及要擴(kuò)增基因的詳細(xì)信息。

熒光定量PCR原理：
熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來(lái)也叫Real-Time PCR，是美國(guó)PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來(lái)的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來(lái)實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過(guò)一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào)，這樣我們就可以通過(guò)熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號(hào)階段，熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒(méi)有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品：

骨骼肌細(xì)胞25406-64-8氧還原蛋白過(guò)氧化物酶4檢測(cè)試劑盒

表皮角化細(xì)胞256925-92-5氧化型谷胱甘肽檢測(cè)試劑盒

真皮成纖維細(xì)胞2586-96-1氧化高密度脂蛋白檢測(cè)試劑盒

軟骨細(xì)胞260413-62-5氧化低密度脂蛋白抗體檢測(cè)試劑盒

破骨細(xì)胞26091-79-2氧化低密度脂蛋白檢測(cè)試劑盒

皮膚肥大細(xì)胞26116-89-2延伸蛋白A檢測(cè)試劑盒

前脂肪細(xì)胞26166-37-0煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸檢測(cè)試劑盒

成骨細(xì)胞26342-66-5煙酰胺腺嘌呤二核苷酸檢測(cè)試劑盒

腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞2643-85-8牙骨質(zhì)蛋白1檢測(cè)試劑盒

腦動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞26544-34-3牙本質(zhì)基質(zhì)蛋白1檢測(cè)試劑盒

腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞26575-93-9循環(huán)免疫復(fù)合物檢測(cè)試劑盒

腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞26575-95-1血影蛋白檢測(cè)試劑盒

腦膜細(xì)胞2673-40-7血血小板衍生生長(zhǎng)因子可溶性受體α檢測(cè)試劑盒7.5%化鈉肉湯顆粒5(6)-CR110, SE [5-(and 6)-Carboxyrhodamine 110, succinimidyl ester] *Mixed isomers*  雞白介素1(IL-1)ELISA Kit

孟加拉紅培養(yǎng)基顆粒5-CR110, SE [5-Carboxyrhodamine 110, succinimidyl ester] *Single isomer* 雞γ干擾素(IFN-γ)ELISA Kit

Half-Fraser顆粒培養(yǎng)基6-CR110, SE [6-Carboxyrhodamine 110, succinimidyl ester] *Single isomer*   雞β內(nèi)酰銨酶(β-lactamase)ELISA Kit

Fraser培養(yǎng)基顆粒5(6)-TAMRA [5-(and-6)-Carboxytetramethylrhodamine] *Mixed isomers*   雞β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA Kit

含0.6%酵母浸膏的胰酪胨大豆瓊脂（TSA-YE）顆粒5(6)-TAMRA [5-(and-6)-Carboxytetramethylrhodamine] *Mixed isomers*  雞α酮戊二酸脫酶(α-KGDHC)ELISA Kit

戈氏放線菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒含0.6%酵母膏的胰酪胨大豆肉湯(TSB-YE)顆粒5(6)-TAMRA [5-(and-6)-Carboxytetramethylrhodamine] *Mixed isomers*  雞α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)ELISA Kit

改良月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯-萬(wàn)古霉素,(mLST-Vm)顆粒5-TAMRA [5-Carboxytetramethylrhodamine] *Single isomer*  雞α干擾素(IFN-α)ELISA Kit

TCBS瓊脂顆粒5-TAMRA [5-Carboxytetramethylrhodamine] *Single isomer*  雞α1酸性糖蛋白(OGCHI)ELISA Kit

改良EC肉湯(mEC+n)顆粒5-TAMRA [5-Carboxytetramethylrhodamine] *Single isomer*   雞α/β水解酶域包含蛋白5(ABHD5)ELISA Kit

EC肉湯顆粒6-TAMRA [6-Carboxytetramethylrhodamine] *Single isomer*  雞Toll樣受體4(TLR4)ELISA Kit

SS瓊脂顆粒6-TAMRA [6-Carboxytetramethylrhodamine] *Single isomer*   雞L苯氨酸解氨酶(PAL)ELISA Kit

堿性蛋白胨水顆粒6-TAMRA [6-Carboxytetramethylrhodamine] *Single isomer*   雞HSP90抗體(IgM)ELISA Kit

3%化鈉堿性蛋白胨水顆粒5(6)-TAMRA, SE [5-(and-6)-Carboxytetramethylrhodamine, succinimidyl ester] *Mixed isomers*   雞HSP90抗體(IgG)ELISA Kit

相對(duì)定量簡(jiǎn)介：
分析方法： ①雙標(biāo)曲法 ②2 － △Ct ③2 － △△Ct ④Pfaffi法
①雙標(biāo)準(zhǔn)曲線法簡(jiǎn)介
公式：
優(yōu)點(diǎn)：分析簡(jiǎn)單，實(shí)驗(yàn)優(yōu)化簡(jiǎn)單
缺點(diǎn)：對(duì)每一個(gè)基因，每一輪實(shí)驗(yàn)都必需做標(biāo)準(zhǔn)曲線；必需有固定的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線；這些標(biāo)準(zhǔn)品并不代表樣品擴(kuò)增的真實(shí)狀態(tài)應(yīng)用：基因表達(dá)調(diào)控研究中用與*的兩種相對(duì)定量方法之一。