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          類鼻疽伯克霍爾德菌(BP)核酸檢測試劑盒

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          • 所在地 上海市

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          更新時間:2023-03-15 09:03:32瀏覽次數:188

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          產品簡介

          供貨周期 現貨 規(guī)格 50T
          應用領域 化工 主要用途 僅供科研實驗
          類鼻疽伯克霍爾德菌(BP)核酸檢測試劑盒公司正在銷售的產品:小鼠再生胰島衍生蛋白1β(REG1β)PCR檢測試劑盒 ,英文名: REG1β
          猴可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA檢測試劑盒MonkeySolubleIercellularAdhesionMolecule-1,sICAM-1ELISAKit 50T
          犬巨噬細胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)免疫試劑盒 Canine

          詳細介紹

          操作流程
          收集基因信息——>設計引物——>PCR ——>回收目的片段——>與載體連接,取得連接產物 ——> 用感受態(tài)細胞做轉化 ——>接菌——>陽性克隆(酶切法或PCR)——>質粒抽提——>質粒測序——>測序結果分析——>克隆信息輸入數據庫——>質粒實物保存。

          產品名稱

          分類

          規(guī)格

          類鼻疽伯克霍爾德菌(BP)核酸檢測試劑盒

          PCR檢測試劑盒

          50T

          5.png


          PCR實驗方法步驟:
          方法
          1
          :在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
          10×PCR buffer
          5 μl     dNTP mix
          2mM
          4 μl    
          引物110pM
          2 μl    
          引物210pM
          2 μl     Taq
          酶 (2U/μl
          1 μl     DNA
          模板(50ng-1μg/μl
          1 μl      
          ddH2O 50 μl
          PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
          2
          :調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93
          預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在727min。
          3
          :伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4
          待電泳檢測或-20長期保存。
          4
          PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
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          人黑色素濃縮激素(MCH)免疫試劑盒 Human melanin concenating hormone,MCH

          RatCyclicguanosinemonophosphate,cGMPELISAKit大鼠環(huán)0酸鳥苷(cGMP)PCR檢測試劑盒

          3’末端DNA探針同位素([α
          實時熒光定量PCR
          實時熒光定量PCR技術有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點檢測的局限,實現了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強度,并記錄在電腦軟件之中,通過對每個樣品Ct值的計算,根據標準曲線獲得定量結果。因此,實時熒光定量PCR無需內標是建立在兩個基礎之上的:
          1
          Ct值的重現性PCR循環(huán)在到達Ct值所在的循環(huán)數時,剛剛進入真正的指數擴增期(對數期),此時微小誤差尚未放大,因此Ct值的重現性,即同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內擴增,得到的Ct值是恒定的。
          2
          Ct值與起始模板的線性關系由于Ct值與起始模板的對數存在線性關系,可利用標準曲線對未知樣品進行定量測定,因此,實時熒光定量PCR是一種采用外標準曲線定量的方法。
          外標準曲線的定量方法相比內標法是一種準確的、值得信賴的科學方法。利用外標準曲線的實時熒光定量PCR是迄今為止定量最準確,重現性定量方法,已得到,廣泛用于基因表達研究、轉基因研究,藥物療效考核、病原體檢測等諸多領域。
          定量PCR方法:
          a、競爭法
          選擇由突變克隆產生的含有一個新內切位點的外源競爭性模板。在同一反應管中,待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增(其中一個引物為熒光標記)。擴增后用內切酶消化PCR產物,競爭性模板的產物被酶解為兩個片段,而待測模板不被酶切,可通過電泳或高效液相將兩種產物分開,分別測定熒光強度,根據已知模板推測未知模板的起始拷貝數。
          b
          、內參照法
          在不同的PCR反應管中加入已定量的內標和引物,內標用基因工程方法合成。上游引物用熒光標記,下游引物不標記。在模板擴增的同時,內標也被擴增。在PCR產物中,由于內標與靶模板的長度不同,二者的擴增產物可用電泳或高效液相分離開來,分別測定其熒光強度,以內標為對照定量待檢測模板。
          c
          PCRELISA
          利用di高辛等標記引物,擴增產物被固相板上特異的探針所結合,再加入抗di高辛酶標抗體-辣根過氧化物酶結合物,最終酶使底物顯色。常規(guī)的PCRELISA法只是定性實驗,若加入內標,作出標準曲線,也可實現定量檢測目的。
          下列是公司正在銷售的產品:
          大鼠Ⅰ型膠原N末端肽(X)ELISA試劑盒 ,英文名: X ELISA Kit

          Mouse activin A (Activin-A) ELISA Kit 小鼠活化素A(Activin-A)ELISA試劑盒

          MouseBH3ieractingdomaindeathagonist,BidELISAKit 小鼠BH3結構域凋亡誘導蛋白(Bid)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

          CLIAKitforHumansimilaoRIKENcDNA4933429F08geneELISAKit人類似RIKENcDNA4933429F08基因規(guī)格:48T/96T

          通用型魚傳染性胰腺壞疽病(InfectiousPancreaticNecrosis;IPN)試劑盒20

          ELISAKitFIX大鼠IX規(guī)格:48T/96T

          小鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)ELISA試劑盒 ,英文名: OVA sIgE ELISA Kit

          大鼠雌二醇(E2)ELISA檢測試劑盒RatEsadiol,E2ELISAKit 96T/48T

          人毒蕈堿型乙酰受體M2(mAChRM2)自身抗體免疫試劑盒 Human muscarinic acetylcholine receptor M2(mAChRM2)aoaibody ELISA kit

          RatMotilin,MTLELISAKit大鼠胃動素(MTL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

          DNA探針聚合酶整合標記試劑盒10

          MouseProAialNaiureticPeptide,Pro-ANPELISA試劑盒小鼠前心肽(Pro-ANP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
          類鼻疽伯克霍爾德菌(BP)核酸檢測試劑盒Anti-PH-4/FITC 熒光素標記脯水解酶4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

          Mose Anti-rat IgG/Gold 金標記小鼠抗大鼠IgG (10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格: 2ml

          胰腺衍生因子抗體 Anti-FAM3B/PANDER 0.1ml

          Goat Anti-rabbit IgG/RBITC 羅丹明標記的羊抗兔IgG 0.3ml

          Factor I heavy chain 英文名稱: 補體因子I重鏈抗體 0.2ml

          Rhesus antibody Rh phospho-SYT1(Ser309) 0酸化突觸結合蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml

          Mose Anti-rat IgG/Gold 金標記小鼠抗大鼠IgG (10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格: 2ml
          操作流程:
          1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4
          2.
          設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
          3.
          樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
          4.
          除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37
          水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
          5.
          棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
          6.
          每孔加入底物A、B50μL,37
          避光孵育15min。產品僅用于科研實驗
          7.
          每孔加入終止液50μL15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。


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