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          轉(zhuǎn)基因植物CamV35S啟動子核酸檢測試劑盒

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          更新時間:2023-03-16 08:35:27瀏覽次數(shù):233

          聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
          應(yīng)用領(lǐng)域 化工 主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn)
          轉(zhuǎn)基因植物CamV35S啟動子核酸檢測試劑盒公司正在銷售的產(chǎn)品:小鼠亞鹽氧化酶(SUOX)PCR檢測試劑盒 ,英文名: SUOX
          兔子單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA檢測試劑盒Rabbitmonocytechemotacticprotein1/monocytechemotacticandactivatingfactor,MCP1/MCAFELISAkit 50T

          詳細(xì)介紹

          實(shí)時熒光定量PCR
          實(shí)時熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點(diǎn)檢測的局限,實(shí)現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強(qiáng)度,并記錄在電腦軟件之中,通過對每個樣品Ct值的計(jì)算,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得定量結(jié)果。因此,實(shí)時熒光定量PCR無需內(nèi)標(biāo)是建立在兩個基礎(chǔ)之上的:
          1
          Ct值的重現(xiàn)性PCR循環(huán)在到達(dá)Ct值所在的循環(huán)數(shù)時,剛剛進(jìn)入真正的指數(shù)擴(kuò)增期(對數(shù)期),此時微小誤差尚未放大,因此Ct值的重現(xiàn)性,即同一模板不同時間擴(kuò)增或同一時間不同管內(nèi)擴(kuò)增,得到的Ct值是恒定的。
          2
          Ct值與起始模板的線性關(guān)系由于Ct值與起始模板的對數(shù)存在線性關(guān)系,可利用標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知樣品進(jìn)行定量測定,因此,實(shí)時熒光定量PCR是一種采用外標(biāo)準(zhǔn)曲線定量的方法。
          外標(biāo)準(zhǔn)曲線的定量方法相比內(nèi)標(biāo)法是一種準(zhǔn)確的、值得信賴的科學(xué)方法。利用外標(biāo)準(zhǔn)曲線的實(shí)時熒光定量PCR是迄今為止定量最準(zhǔn)確,重現(xiàn)性定量方法,已得到,廣泛用于基因表達(dá)研究、轉(zhuǎn)基因研究,藥物療效考核、病原體檢測等諸多領(lǐng)域。

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          操作流程
          收集基因信息——>設(shè)計(jì)引物——>PCR ——>回收目的片段——>與載體連接,取得連接產(chǎn)物 ——> 用感受態(tài)細(xì)胞做轉(zhuǎn)化 ——>接菌——>陽性克隆(酶切法或PCR)——>質(zhì)粒抽提——>質(zhì)粒測序——>測序結(jié)果分析——>克隆信息輸入數(shù)據(jù)庫——>質(zhì)粒實(shí)物保存。

          產(chǎn)品名稱

          分類

          規(guī)格

          轉(zhuǎn)基因植物CamV35S啟動子核酸檢測試劑盒

          PCR檢測試劑盒

          50T

          下列相關(guān)產(chǎn)品:
          小鼠鐵蛋白(FE)PCR檢測試劑盒 50T

          Siated muscle actinin alpha (SM Actinin- a)  大鼠橫紋肌輔肌動蛋白α (sm Actinin-α )PCR檢測試劑盒

          Humanmannosereceptor,MRELISAKit 人甘露糖受體(MR)PCR檢測試劑盒 50T 進(jìn)口分裝

          ChickenansformingGrowthfactorβ1,TGF-β1PCR檢測試劑盒雞轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)PCR檢測試劑盒

          載玻片細(xì)胞RUNX3蛋白表達(dá)熒光顯微鏡

          PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
          方法
          1
          :在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
          10×PCR buffer
          5 μl     dNTP mix
          2mM
          4 μl    
          引物110pM
          2 μl    
          引物210pM
          2 μl     Taq
          酶 (2U/μl
          1 μl     DNA
          模板(50ng-1μg/μl
          1 μl      
          ddH2O 50 μl
          PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
          2
          :調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93
          預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在727min。
          3
          :伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4
          待電泳檢測或-20長期保存。
          4
          PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

          定量PCR方法:
          a、競爭法  產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)
          選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個新內(nèi)切位點(diǎn)的外源競爭性模板。在同一反應(yīng)管中,待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴(kuò)增(其中一個引物為熒光標(biāo)記)。擴(kuò)增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物,競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個片段,而待測模板不被酶切,可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開,分別測定熒光強(qiáng)度,根據(jù)已知模板推測未知模板的起始拷貝數(shù)。
          b
          、內(nèi)參照法
          在不同的PCR反應(yīng)管中加入已定量的內(nèi)標(biāo)和引物,內(nèi)標(biāo)用基因工程方法合成。上游引物用熒光標(biāo)記,下游引物不標(biāo)記。在模板擴(kuò)增的同時,內(nèi)標(biāo)也被擴(kuò)增。在PCR產(chǎn)物中,由于內(nèi)標(biāo)與靶模板的長度不同,二者的擴(kuò)增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來,分別測定其熒光強(qiáng)度,以內(nèi)標(biāo)為對照定量待檢測模板。
          c
          、PCRELISA
          利用di高辛等標(biāo)記引物,擴(kuò)增產(chǎn)物被固相板上特異的探針?biāo)Y(jié)合,再加入抗di高辛酶標(biāo)抗體-辣根過氧化物酶結(jié)合物,最終酶使底物顯色。常規(guī)的PCRELISA法只是定性實(shí)驗(yàn),若加入內(nèi)標(biāo),作出標(biāo)準(zhǔn)曲線,也可實(shí)現(xiàn)定量檢測目的。

          操作流程:
          1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4。
          2.
          設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
          3.
          樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
          4.
          除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37
          水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
          5.
          棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
          6.
          每孔加入底物A、B50μL,37
          避光孵育15min。
          7.
          每孔加入終止液50μL15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。

          下列是公司正在銷售的產(chǎn)品:
          人載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

          Human tumor associated aigen (TAA) ELISA Kit 人腫瘤相關(guān)抗原(TAA)ELISA試劑盒

          HumanCaspase3,Casp-3ELISAKit 人胱天3(Casp-3)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

          Humaninsulin-likegrowthfactors1,IGF-1ELISA試劑盒人胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

          組織基質(zhì)金屬(MMP-9)明膠法比色定量檢測試劑盒20

          HumanLebtospiraIgMELISAKit人鉤端IgM(Lebtospira)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

          小鼠抗(AT)ELISA試劑盒 ,英文名: AT ELISA Kit

          人花生四烯酸5脂加氧酶(ALOX-5)ELISA檢測試劑盒Humanarachidonate5-lipoxygenase,ALOX-5ELISAKit 96T/48T

          大鼠血紅素氧合酶2(HO-2)免疫試劑盒 Rat heme oxygenase 2,HO-2 ELISA Kit

          英文名稱RatLaminaPropriaLymphocyteELISAKit大鼠脂蛋白脂酶(LPL)規(guī)格:96T/48T

          高多糖多酚植物組織葉綠體DNA高分離試劑盒10/20

          ELISAKitF-TESTO人游離睪同規(guī)格:48T/96T
          轉(zhuǎn)基因植物CamV35S啟動子核酸檢測試劑盒Anti--phospho-P70 S6 Kinase beta (Thr228) /FITC 熒光素標(biāo)記抗0酸化核糖體S6蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

          Goat Anti-human IgG 羊抗人IgG (親和層析化)Multi-class antibodies規(guī)格: 1mg

          半乳糖凝集素-3抗體 Anti-Galectin-3 0.1ml

          Goat Anti-Mouse IgG/Bio 標(biāo)記的羊抗小鼠IgG 0.1ml

          FOXN2 英文名稱: 叉頭蛋白N2抗體 0.2ml

          Rhesus antibody Rh phospho-SOX9(Ser181) 0酸化轉(zhuǎn)錄因子SOX9蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

          Goat Anti-human IgG 羊抗人IgG (親和層析化)Multi-class antibodies規(guī)格: 1mg


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