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          上海谷研實業(yè)有限公司>>PCR法>>PCR檢測試劑盒>>轉(zhuǎn)基因植物PAT基因核酸檢測試劑盒

          轉(zhuǎn)基因植物PAT基因核酸檢測試劑盒

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          • 所在地 上海市

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          更新時間:2023-03-16 08:39:22瀏覽次數(shù):184

          聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
          應(yīng)用領(lǐng)域 化工 主要用途 僅供科研實驗
          轉(zhuǎn)基因植物PAT基因核酸檢測試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品:小鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)PCR檢測試劑盒 ,英文名: PDGFsR-α
          小鼠卵清蛋白特異性IgE(OVAsIgE)ELISA檢測試劑盒MouseovalbuminspecificIgE,OVAsIgEELISAKit 50T
          人10(KLK 10)免疫試劑盒 Human Kallikrein 10,KLK 10
          Rat

          詳細介紹

          操作流程
          收集基因信息——>設(shè)計引物——>PCR ——>回收目的片段——>與載體連接,取得連接產(chǎn)物 ——> 用感受態(tài)細胞做轉(zhuǎn)化 ——>接菌——>陽性克隆(酶切法或PCR)——>質(zhì)粒抽提——>質(zhì)粒測序——>測序結(jié)果分析——>克隆信息輸入數(shù)據(jù)庫——>質(zhì)粒實物保存。

          產(chǎn)品名稱

          分類

          規(guī)格

          轉(zhuǎn)基因植物PAT基因核酸檢測試劑盒

          PCR檢測試劑盒

          50T

          5.png


          PCR實驗方法步驟:
          方法
          1
          :在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
          10×PCR buffer
          5 μl     dNTP mix
          2mM
          4 μl    
          引物110pM
          2 μl    
          引物210pM
          2 μl     Taq
          酶 (2U/μl
          1 μl     DNA
          模板(50ng-1μg/μl
          1 μl      
          ddH2O 50 μl
          PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
          2
          :調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93
          預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在727min。
          3
          :伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4
          待電泳檢測或-20長期保存。
          4
          PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
          下列相關(guān)產(chǎn)品:
          小鼠特異生長因子/相關(guān)因子(TSGF)PCR檢測試劑盒 ,英文名: TSGF

          小鼠甲基化酶(Methylase)ELISA檢測試劑盒MouseMethylaseELISAKit 50T

          人抗Scl-70抗體免疫試劑盒 Human ai-Scl-70 aibody

          Rat17-ketosteroids,17-KSELISAKit大鼠17-同類固醇(17-KS)PCR檢測試劑盒

          載玻片細胞MYC蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20

          Lensculinarisagglinin,LCAPCR檢測
          實時熒光定量PCR
          實時熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點檢測的局限,實現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強度,并記錄在電腦軟件之中,通過對每個樣品Ct值的計算,根據(jù)標準曲線獲得定量結(jié)果。因此,實時熒光定量PCR無需內(nèi)標是建立在兩個基礎(chǔ)之上的:
          1
          Ct值的重現(xiàn)性PCR循環(huán)在到達Ct值所在的循環(huán)數(shù)時,剛剛進入真正的指數(shù)擴增期(對數(shù)期),此時微小誤差尚未放大,因此Ct值的重現(xiàn)性,即同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內(nèi)擴增,得到的Ct值是恒定的。
          2
          Ct值與起始模板的線性關(guān)系由于Ct值與起始模板的對數(shù)存在線性關(guān)系,可利用標準曲線對未知樣品進行定量測定,因此,實時熒光定量PCR是一種采用外標準曲線定量的方法。
          外標準曲線的定量方法相比內(nèi)標法是一種準確的、值得信賴的科學(xué)方法。利用外標準曲線的實時熒光定量PCR是迄今為止定量最準確,重現(xiàn)性定量方法,已得到,廣泛用于基因表達研究、轉(zhuǎn)基因研究,藥物療效考核、病原體檢測等諸多領(lǐng)域。
          定量PCR方法:
          a、競爭法
          選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個新內(nèi)切位點的外源競爭性模板。在同一反應(yīng)管中,待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增(其中一個引物為熒光標記)。擴增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物,競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個片段,而待測模板不被酶切,可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開,分別測定熒光強度,根據(jù)已知模板推測未知模板的起始拷貝數(shù)。
          b
          、內(nèi)參照法
          在不同的PCR反應(yīng)管中加入已定量的內(nèi)標和引物,內(nèi)標用基因工程方法合成。上游引物用熒光標記,下游引物不標記。在模板擴增的同時,內(nèi)標也被擴增。在PCR產(chǎn)物中,由于內(nèi)標與靶模板的長度不同,二者的擴增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來,分別測定其熒光強度,以內(nèi)標為對照定量待檢測模板。
          c
          、PCRELISA
          利用di高辛等標記引物,擴增產(chǎn)物被固相板上特異的探針所結(jié)合,再加入抗di高辛酶標抗體-辣根過氧化物酶結(jié)合物,最終酶使底物顯色。常規(guī)的PCRELISA法只是定性實驗,若加入內(nèi)標,作出標準曲線,也可實現(xiàn)定量檢測目的。
          下列是公司正在銷售的產(chǎn)品:
          人抑制素A(INH-A)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

          Human ansthyretin (T) ELISA Kit 人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白(T)ELISA試劑盒

          HumanIestinalefoilfactor,ITFELISAKit 人腸三葉因子(ITF)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

          HumanIerleukin12,IL-12/P40ELISA試劑盒人白介素12(IL-12/P40)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

          組織科薩基病毒A(CoxsackievirusA)定性檢測試劑盒20

          HumanIPO-38ELISAKitIPO-38蛋白(IPO38)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

          小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)ELISA試劑盒 ,英文名: EMA IgA ELISA Kit

          大鼠橫紋肌輔肌動蛋白α(smActinin-α)ELISA檢測試劑盒RatskeletalmuscleActinin-α,smActinin-αELISAKit 96T/48T

          人單皰疹病毒抗原-1(HSV-Ag1)免疫試劑盒 Human Herpes simplex virus,HSV-Ag1 ELISA Kit

          RatProgesterone,PROGELISAKit大鼠孕激素/孕同(PROG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

          Hanks平衡鹽緩沖溶液(HBSS)500毫升

          Mouseoponin,Tn-ELISA試劑盒小鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
          轉(zhuǎn)基因植物PAT基因核酸檢測試劑盒Anti-Phospho-MSK1 (Ser212)/FITC 熒光素標記0酸化有絲分裂原和應(yīng)激活化型蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

          Goat Anti-human Fibrinogen/HRP 辣根過氧化物酶標記羊抗Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

          14-3-3 蛋白抗體 Anti-14-3-3 0.1ml

          Mouse Anti-Rabbit IgM/PE PE標記的小鼠抗兔IgM 0.1ml

          GPR119 英文名稱: G蛋白偶聯(lián)受體119抗體 0.2ml

          Rhesus antibody Rh PSF2 PSF2蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml

          Goat Anti-human Fibrinogen/HRP 辣根過氧化物酶標記羊抗Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
          操作流程:
          1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4。
          2.
          設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
          3.
          樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
          4.
          除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37
          水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
          5.
          棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。
          6.
          每孔加入底物A、B50μL37
          避光孵育15min。產(chǎn)品僅用于科研實驗
          7.
          每孔加入終止液50μL15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。


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