背景資料:RNGTT (RNA guanylyltransferase and 5'-phosphatase) is a 597 amino acid protein that localizes to the nucleus and ts as four alternatively spliced isoforms. Expressed in kidney, lung, heart, brain, liver, testis, skin and muscle, RNGTT acts as a bifunctional mRNA-capping enzyme that exhibits RNA 5'-triphosphatase activity at its N-terminus and mRNA guanylyltransferase activity at its C-terminus. Via its catalytic activity, RNGTT facilitates the first two steps of mRNA cap formation, naming the removal of a γ-phosphate from the end of nascent mRNA and the subsequent transfer of the phospho residue to the 5’-diphosphate terminus. The e encoding RNGTT maps to human chromosome 6, which contains 170 million base pairs and comprises nearly 6% of the human ome.
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
HCE抗體 | 50ul 100ul 200ul | Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. |
產(chǎn)品分類:抗體 / 一抗
英文名稱:HCE
中文名稱 5’-三磷酸聚核苷酸抗體
英文別名 RNGTT; CAP1A; GTase; GTP--RNA guanylyltransferase; hCAP; HCAP1; HcE; HCE1; MCE1; MCE1_HUMAN; mRNA 5''-triphosphatase; mRNA capping enzyme; mRNA guanyltransferase; mRNA guanylyltransferase; polynucleotide 5' trisphosphatase; RNA guanylyltransferase and 5' phosphatase; TPase;
交叉反應(yīng):Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
標(biāo)記: Unconjugated
抗體來源: Rabbit
抗體類型: Polyclonal
免疫原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human HCE
蛋白細(xì)胞定位: 細(xì)胞核
純化方法: affinity purified by Protein A
亞型 IgG
性狀: Liquid
濃度: 1mg/ml
儲存液: 0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件: Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one ye
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏佐劑和弗氏不佐劑
d.實(shí)驗(yàn)動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。
相關(guān)產(chǎn)品:
CD33抗體
肌肽二肽酶1抗體
7號染色體開放閱讀框63抗體
20號染色體開放閱讀框70抗體
鈣反應(yīng)因子抗體
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
標(biāo)記法:
直接標(biāo)記法 | 間接標(biāo)記法 |
抗體的準(zhǔn)備:取提純的Ig溶液測定蛋白質(zhì)含量,置于三角燒瓶中加入生理鹽水和0.5mol/L pH9.5碳酸鹽緩沖液,冰槽中攪拌5~10min; 熒光素的準(zhǔn)備:按每毫克蛋白質(zhì)加0.01~0.02mg的FITC計(jì)算,準(zhǔn)確稱取后加入抗體溶液中; 標(biāo)記:邊攪拌邊加入熒光素,避免粉末黏附于壁上,置于4℃冰箱或冰庫繼續(xù)攪拌12~18h; 透析:結(jié)合完畢后,先將結(jié)合物以3000r/min離心20min,除去少量沉淀物后裝入透析袋中再置于pH8.0緩沖鹽的燒杯中透析過夜; 過柱:取透析過夜的標(biāo)記物,過葡聚糖凝膠G-25或G-50柱,分離游 | 抗體的準(zhǔn)備:0~4℃下,用0.01mol/L pH8.0 PBS將待標(biāo)記的抗體蛋白溶液稀釋到濃度為30~40mg/ml,置于三角燒瓶內(nèi)放入冰槽中; 熒光素的準(zhǔn)備:按每毫克蛋白質(zhì)加入0.01mg的熒光素稱取,溶解于等量的3%重碳酸鈉水溶液中;將抗體蛋白溶液與FITC溶液等量混合,在0~4℃中攪拌18~24h,充分?jǐn)噭颍?span> 透析或過柱層析。 |
實(shí)驗(yàn)步驟:
① 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,10min后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
② 滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間(參考:30min)。
③ 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min,不時振蕩。
④ 取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
⑤ 立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度,一般可用“+"表示:
(-)無熒光;(±)極弱的可疑熒光;(+)熒光較弱,但清楚可見;(++)熒光明亮;(+++ --++++)熒光閃亮。待檢標(biāo)本特異性熒光染色強(qiáng)度達(dá)“++"以上,而各種對照顯示為(±)或(-),即可判定為陽性。
IgM/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的兔抗馬IgM 0.1ml
FBXL21: FBXL21蛋白抗體 0.1ml
精神分裂癥易感基因抗體 Anti-DTNBP1 1ml
Anti-PDGF-R-A/FITC 熒光素標(biāo)記血小板源性生長因子受體-A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-TOPO II Alpha (Ser1106) 0酸化DNA拓普西異構(gòu)酶Ⅱ抗體 規(guī)格 0.1ml
IgG/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.3ml
小鼠血管性血友病因子(vWF)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,vWF ELISA Kit
兔子內(nèi)皮抑素(ES)ELISA檢測試劑盒rabbitEndostatin,ESELISAKit 96T/48T
犬α-3干擾素(IFN-α3)免疫試劑盒 Canine Ierferon alpha-3,IFN-α3 ELISA kit
英文名稱HumanEpinephrineELISAKit人(Epinephrine)
單核細(xì)胞增生李斯特菌(Listeriamonocytogenes)鑒定16SrDNAPCR擴(kuò)增檢測試劑盒20次
RatMacrophageColony-StimulatingFactor,M-CSF酶聯(lián)免疫試劑盒大鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)酶聯(lián)免疫試劑盒
HCE抗體埃希氏菌通用PCR檢測試劑盒 英文名稱; Escherichia spp.PCR 50T
巴西諾卡菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Nocardia brasiliensisPCR 50T
鮑球狀病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Abalone Spherical VirusPCR 50T
丙酸桿菌通用PCR檢測試劑盒 英文名稱; Propionibacterium spp.PCR 50T
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗(yàn)、研究實(shí)驗(yàn)、教學(xué)實(shí)驗(yàn)、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,價格實(shí)惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。