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          技術(shù)文章

          微生物菌種污染的細胞株如何救治?

          閱讀:141          發(fā)布時間:2018-4-8

          1)抗生素法:

          微生物菌種培養(yǎng):用無抗生素*培養(yǎng)液培養(yǎng)細胞3 d,收集上清離心后將沉淀物接種于血瓊脂培養(yǎng)基, 35e培養(yǎng)。

          所采用的抗生素包括臨床常用的15種抗生素,抗生素zui適抑菌濃度篩選:根據(jù)細菌藥敏實驗結(jié)果選出敏感抗生素,每種抗生素從zui低抑菌濃度MIC到zui高耐藥濃度分別配制6個濃度梯度。將LSC-1細胞按1*104/孔種96孔板,細胞貼壁后加入含敏感抗生素的*培養(yǎng)液,24 h后換無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)1 d,如此重復(fù)3次,連續(xù)7 d。

          2)抗生素聯(lián)合巨噬細胞吞噬法:

          將上述抗生素處理過的細胞再用小鼠的巨噬細胞處理。巨噬細胞的制備:將滅菌的玻璃粉與0. 9%氯化鈉注射液混和注入小鼠腹腔, 3 d后脫頸處死動物,無菌操作取小鼠腹腔液,離心收集巨噬細胞,與LSC-1細胞混合培養(yǎng), 3 d后換液,棄去巨噬細胞。間隔一周后再用巨噬細胞共培養(yǎng)一次。

          3)裸鼠體內(nèi)接種法:

          將LSC-1細胞按1*106個/mL接種裸鼠腋下皮下,連續(xù)觀察,當(dāng)微生物菌種腫物長至約1cm3后,脫頸處死動物,無菌操作取出腫物,采取組織塊法做組織細胞培養(yǎng)。

          仔細檢查一下器皿的滅菌情況,是否在高壓滅菌時放氣時間足夠,壓力足夠!尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品,連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染,一定要注意!下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象!可在培養(yǎng)液中加相應(yīng)的抗生素處理。
          有關(guān)物質(zhì)    50mg    100725-200401    氟比洛芬
          含量測定    100mg    100727-200601    氟馬西尼
          含量測定    100mg    100728-200501    鹽酸阿呋唑嗪
          含量測定    100mg    100729-200401    鹽酸丁咯地爾
          HPLC法含量測定    100mg    100730-200401    卡維地洛
          HPLC法含量測定    50mg    100731-200401    阿維A 
          含量測定    100mg    100732-200501    苯扎貝特
          UV法含量測定    50mg    100733-200401    非諾貝特
          UV法含量測定    100mg    100734-200401    苯甲酸甲硝唑
          HPLC法含量測定    50mg    100735-200401    醋酸鈉
          微生物菌種

           

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