技術(shù)文章
微生物菌種培養(yǎng)與監(jiān)測菌種純度
閱讀:539 發(fā)布時間:2018-7-12筆者認為此環(huán)節(jié)是微生物菌種培養(yǎng)的中心環(huán)節(jié),也是重要的環(huán)節(jié)。培養(yǎng)菌種嚴格按照操作規(guī)程,注意每個細節(jié)。
1、空氣過濾器和接入培養(yǎng)罐的硅膠管要一起提前滅菌,建議在空氣過濾器和接入培養(yǎng)罐的硅膠管間安裝一個逆止閥,防止培養(yǎng)液倒流,這是很關(guān)鍵的,否則培養(yǎng)時因為內(nèi)外壓力差變化,培養(yǎng)液容易回流。
2、監(jiān)測菌種純度。這一步是至關(guān)重要的環(huán)節(jié),此步驟將直接決定你的成敗,監(jiān)測不好可能會導(dǎo)致全軍覆沒。監(jiān)測菌種純度有以下幾種方法:
①看:看培養(yǎng)液是否透明澄清,菌球是否均勻。培養(yǎng)液不能渾濁。用試管或錐形瓶,從下面接出少量液體(注意,一定要在大火焰的保護下進行),觀察菌球是否懸浮,不能在短時間內(nèi)下沉或上浮。
②聞:聞放氣閥處是否有菌絲的純香,不能是其他酒精味、酸味甚至惡臭,要回辨別霉菌和細菌感染時不同的氣味。
③顯微鏡觀察:顯微鏡觀察一些霉菌的特征,平時可以將已經(jīng)確定的液體菌拿來觀察練習,借助一些教材,對比觀察,這是經(jīng)驗累積才能確定的,但也是*的。顯微鏡具體使用方法本論壇有介紹。
④培養(yǎng)監(jiān)測:這一步是簡單也是直觀的,直接反應(yīng)了該菌種是否純凈。具體操作如下:提前做好試管或錐形瓶瓊脂培養(yǎng)基,并提前做好滅菌工作,再用此小錐形瓶或試管,在培養(yǎng)罐的下面放料處,接少量的培養(yǎng)液(這一步兩人操作,一個人負責火焰保護,一個人負責接液體),整個過程在火焰的保護下塞上棉塞。傾斜放置,讓部分瓊脂露出培養(yǎng)液??刂茰囟?,1~2天即可觀察,霉菌和細菌都可以盡收眼底,如果有感染,培養(yǎng)罐全體培養(yǎng)液應(yīng)及時放棄,否則后果很嚴重。
接種環(huán)節(jié)
首先確保微生物菌種純凈且旺盛的前提下,再討論接種環(huán)節(jié)。接種也是液體菌種較為關(guān)鍵的環(huán)節(jié),因為菌種含水量大,操作中很容易感染空氣中的雜菌。我把我的接種方法透露一下,希望對您有幫助。接種操作:五人一組,每一組一把接種槍,五個酒精燈。一個人專門負責接種槍的把握注射菌種,其余四人負責打開袋口(菌袋用無棉蓋封口,便于操作)。每人面前一個酒精燈,酒精燈火焰一定要大,大到可以包圍無棉蓋口。接種時,在火焰上打開蓋口,在火焰上接種,接完后,在火焰上蓋上蓋口,整個環(huán)節(jié)要迅速,否則火焰要把菌袋燒壞。接種槍在沒有用的時候?qū)⒄麄€槍頭放在火焰上,避免在空氣中放置。整個操作環(huán)節(jié)保險度*,對接種室的滅菌要求不高。
Phospho-Histone H3 (Ser28) 肺耐藥相關(guān)蛋白抗體
Phospho-Histone H3 (Thr11) 肺表面活性蛋白D抗體
Phospho-Histone H3 (Thr3) 肺表面活性蛋白C抗體
phospho-HMGCR (Ser872) 肺表面活性蛋白B抗體
phospho-HMGN1(Ser20+Ser24) 肺表面活性蛋白A抗體
phospho-HNF4 (Ser313) 肺癌腫瘤阻抑基因1抗體
phospho-HP1 alpha (Tyr24) 肺Kruppel樣因子抗體
Phospho-HP1 gamma (Ser83) 肥大細胞類胰蛋白酶β2
Phospho-HP1(Tyr43) 肥大細胞類糜蛋白酶1抗體
phospho-HSF1 (Ser326) 肥大細胞蛋白酶7抗體
phospho-HSF1(Ser303) 非洲爪蟾IGC抗體
微生物菌種