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    當(dāng)小鼠elisa試劑盒競爭法開發(fā)以親和力大小比較為目的，往往會(huì)以IC50值評(píng)價(jià)待測樣品阻斷配體受體結(jié)合效果，IC50越小，待測樣品的阻斷效果越好。親和力競爭法開發(fā)的劑量曲線應(yīng)該有明顯的上下平臺(tái)期以得到較為穩(wěn)定的IC50值。生物學(xué)活性的方法學(xué)驗(yàn)證可參照USP1032, 1033,1034來進(jìn)行實(shí)驗(yàn)方案的設(shè)計(jì)和數(shù)據(jù)分析。
   具體到elisa競爭法的方法學(xué)評(píng)價(jià)，即制備相對(duì)于對(duì)照品理論效價(jià)為156%，125%，100%，80%，64%的樣品進(jìn)行檢測，通過比較對(duì)照品和樣品的IC50，得到樣品相對(duì)于實(shí)測效價(jià)，通過實(shí)測效價(jià)和理論效價(jià)的差異初步確認(rèn)以親和力大小比較為目的的elisa競爭法的質(zhì)量。承接上文的全曲線選擇合適的8個(gè)濃度點(diǎn)，進(jìn)行初步的方法學(xué)驗(yàn)證的結(jié)果如下圖所示：該單次實(shí)驗(yàn)如果進(jìn)行多人和關(guān)鍵試劑的多批次實(shí)驗(yàn)，得到的實(shí)測效價(jià)經(jīng)過統(tǒng)計(jì)學(xué)分析將構(gòu)成方法學(xué)驗(yàn)證中主要的幾個(gè)概念，精密度，準(zhǔn)確度，線性和范圍。如結(jié)果顯示單次實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)測效價(jià)和理論效價(jià)的差異在5%以內(nèi)，能夠初步判斷該以親和力大小比較為目的elisa競爭法有較好的方法質(zhì)量。
    當(dāng)小鼠elisa試劑盒競爭法開發(fā)以定量為目的，選取7個(gè)點(diǎn)以理論濃度為X軸，信號(hào)值為Y軸進(jìn)行四參數(shù)函數(shù)擬合得到標(biāo)準(zhǔn)曲線，將對(duì)照品的信號(hào)值重新代入標(biāo)準(zhǔn)曲線可得回測濃度值，多次實(shí)驗(yàn)統(tǒng)計(jì)分析后回測濃度值和理論值的偏差決定了該條標(biāo)準(zhǔn)曲線的檢測上限，檢測下限，測量范圍，更加詳盡的方法學(xué)驗(yàn)證可參照2015版中國藥典第三部9012 生物樣品定量分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則或者美國FDA版本的Guidance for Industry Bioanalytical Method Validation相關(guān)論述。

 WNT12/WNT-10B 5-羥色胺受體2B抗體

 WNT2B 5-羥色胺受體2A抗體

 Wnt3a 5-羥色胺受體1B抗體

 WNT 5-羥色胺受體1A抗體

 WNT9A 5-羥色胺抗體

 WRCH-1 3-羥丁酸脫氫酶抗體

 WWOX 3磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1抗體

 X protein (middle) 3-磷酸甘油醛脫氫酶單克隆抗體(內(nèi)參抗體)

 X protein (N-Terminus) 3-磷酸甘油醛脫氫酶單克隆抗體(內(nèi)參抗體)
小鼠elisa試劑盒