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莫拉氏菌屬通用PCR進口試劑盒反應五要素
閱讀：136 發(fā)布時間：2023-6-7莫拉氏菌屬通用PCR進口試劑盒反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現(xiàn)二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)第二個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。
超快核酸銀染試劑盒
電泳級SYBR Green I
電泳級耐熱型SYBR染料
綠如藍核酸染料（UV）（0.5 mL）
綠如藍核酸染料（UV）（1.5 mL）
綠如藍核酸染料（可見光型）
溴化乙錠干粉
溴化乙錠清除劑（EB清除劑）
溴化乙錠溶液（1.5 mL）
核酸分子量標準
DNA電泳分子量標準2（DNA marker）（300-5000 bp）
DNA電泳分子量標準2（DNA marker）（50-400 bp）
DNA電泳分子量標準系列（DNA marker,λDNA/HindIII）
DNA電泳分子量標準系列（DNA marker,φX174 DNA/HaeIII）
DNA電泳分子量標準系列（DNA marker,φX174 DNA/Hinc II）
DNA電泳分子量標準系列（DNA marker）（100-1500bp）
DNA電泳分子量標準系列（DNA marker）（100-2000bp）
DNA電泳分子量標準系列（DNA marker）（100-5000bp）
DNA電泳分子量標準系列（DNA marker）（100-600bp）
DNA電泳分子量標準系列（DNA marker）（200-1500bp）
DNA電泳分子量標準系列（DNA marker）（200-5000bp）
DNA電泳分子量標準系列（DNA marker）（250-15000bp）
DNA電泳分子量標準系列（DNA marker）（300-10000bp）
DNA電泳分子量標準系列（DNA marker）（50-500bp）
DNA電泳分子量標準系列（DNA marker）（pBR322/BstN I）
DNA電泳分子量標準系列（DNA marker）（pBR322/MspI）
DNA電泳分子量標準系列（DNA marker）（pUC19/MspI）
DNA電泳分子量標準系列（DNA marker）（λ-EcoT14 I）