詳細(xì)介紹
運(yùn)輸及保存:低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期一年。使用本試劑盒提供的陽性對照時(shí),由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。在專門的區(qū)域操作。本試劑盒不但準(zhǔn)確、快速、靈敏,還具有以下
產(chǎn)品名稱 | 米德爾堡病毒進(jìn)口PCR試劑 |
英文名稱 | Middelburg VirusRTPCR |
分類 | PCR檢測試劑盒 |
特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單。
2. 預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 494 bp。
3. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
LISA Kit 膜聯(lián)蛋白A10(ANXA10)ELISA試劑盒
富含亮氨酸跨膜纖連蛋白3抗體 ANXA1 ELISA Kit 膜聯(lián)蛋白A1(ANXA1)ELISA試劑盒
牛纖維蛋白原抗體 MCP ELISA Kit 膜輔蛋白(MCP)ELISA試劑盒
FAM172A蛋白抗體 WASF2 ELISA Kit 免疫缺陷伴血小板減少綜合征蛋白家族成員2(WASF2)ELISA試劑盒
磷酸化粘著斑激酶抗體 WASP ELISA Kit 免疫缺陷伴血小板減少綜合征蛋白(WASP)ELISA試劑盒
磷酸化粘著斑激酶抗體 Tie1 ELISA Kit 免疫球蛋白樣EGF樣域酪氨酸激酶1(Tie1)ELISA試劑盒
磷酸化脆性組氨酸三聯(lián)體抗
盒圖片 SIP ng/mL BH-E5945
正五聚蛋白2檢測試劑盒說明書 Pentraxin 2 ng/ml BH-E5946
羧肽酶B2檢測試劑盒進(jìn)口 Carboxypeptidase B2 U/L BH-E5947
血纖蛋白原γ鏈檢測試劑盒現(xiàn)貨 FGG ng/mL BH-E5948
3-羥-3-甲戊二酸單酰輔酶A還原酶檢測試劑盒價(jià)格 HMG-CoA U/L BH-E5949
去乙?;窼irtuin-4檢測試劑盒圖片 NAD-dependent deacetylase sirtuin-4 U/L BH-E5950
去乙?;窼irtuin-3檢測試劑盒說明書 NAD-dependent deacetylase sirtuin-3 U/L BH-E5951
紅富鐵激素檢測試劑盒進(jìn)口 Erythroferrone ERFE FAM132B ng/mL BH-E5952
6磷酸果糖2激酶;果糖-2,6-二磷酸酶3檢測試劑盒現(xiàn)貨 6-phosphofructokinase2 mIU/mL BH-E5953
磷酸化MEK激酶檢測試劑盒價(jià)格 p-MEK pmol/L BH-E5954
P-CREB檢測試劑盒圖片 P-CREB pg/mL BH-E5955
絲氨酸棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶長鏈堿性亞基1檢測試劑盒說明書 Serine Palmitoyltransferase, Long Chain Base Subunit 1 ng/mL BH-E5956
體 IGSF16 ELISA Kit 免疫球蛋白超家族成員16(IGSF16)ELISA試劑盒
米德爾堡病毒進(jìn)口PCR試劑磷酸化FRA-1蛋白抗體 Igλ ELISA Kit 免疫球蛋白λ(Igλ)ELISA試劑盒
磷酸化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體 Igκ ELISA Kit 免疫球蛋白κ(Igκ)ELISA試劑盒
磷酸化堿性成纖維細(xì)胞生長因子受體1抗體
Q-PCR技術(shù):
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(real-time quantitative PCR)/QRT-PCR,是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光標(biāo)記物,利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過擴(kuò)增曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。熒光定量PCR不僅實(shí)現(xiàn)真正實(shí)現(xiàn)了定量,而且具有靈敏度和特異性、高能實(shí)現(xiàn)多重反應(yīng)、自動化程度高、無污染、實(shí)時(shí)和準(zhǔn)確等特點(diǎn)。
熒光定量PCR所使用的熒光基團(tuán)可分為兩種:熒光探針和熒光染料。
1.使用SYBR熒光染料法來進(jìn)行熒光定量PCR時(shí),我們首先在PCR反應(yīng)體系中加入過量SYBR熒光染料。SYBR熒光染料特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后發(fā)射一定量的熒光信號,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射熒光信號,從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步。
2.Taqman探針則是利用探針與模板的特異性結(jié)合的特點(diǎn),以及探針內(nèi)熒光報(bào)告基團(tuán)和淬滅基團(tuán)的分子特性來實(shí)現(xiàn)對PCR進(jìn)行定量檢測。這種方法可以實(shí)現(xiàn)高靈敏度,嚴(yán)格針對特定堿基序列的定量實(shí)驗(yàn)。