詳細(xì)介紹
運(yùn)輸及保存:低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期一年。使用本試劑盒提供的陽性對照時(shí),由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。在專門的區(qū)域操作。本試劑盒不但準(zhǔn)確、快速、靈敏,還具有以下
產(chǎn)品名稱 | 乳酸乳球菌PCR試劑免費(fèi)代測 |
英文名稱 | Lactococcus lactis PCR |
分類 | PCR檢測試劑盒 |
特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單。
2. 預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 494 bp。
3. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
絲氨酸蛋白酶12(PRSS12)ELISA試劑盒
FBXO36 F-box蛋白相關(guān)蛋白36抗體 PRSS1 ELISA Kit 絲氨酸蛋白酶1(PRSS1)ELISA試劑盒
CAST1蛋白抗體 STK4 ELISA Kit 絲氨酸/蘇氨酸激酶4(STK4)ELISA試劑盒
RAB6蛋白抗體 STK39 ELISA Kit 絲氨酸/蘇氨酸激酶39(STK39)ELISA試劑盒
皮卡丘素抗體 STK3 ELISA Kit 絲氨酸/蘇氨酸激酶3(STK3)ELISA試劑盒
ELAVL4蛋白抗體 STK25 ELISA Kit 絲氨酸/蘇氨酸激酶25(STK25)ELISA試劑盒
表皮生長因子樣激素受體1 STK19 ELISA Kit 絲氨酸/蘇氨酸激酶19(STK19)ELISA試劑盒
磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1/2抗體 STK16 ELISA Kit 絲氨酸/蘇氨酸激酶16(STK16)ELISA試劑盒
電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白α抗體 STK11 ELISA Kit 絲氨酸/蘇氨酸激酶11(STK11)ELISA試劑盒
前列腺素E受體蛋白4抗體 STK10 ELISA Kit 絲氨酸/蘇氨酸激酶10(STK10)ELISA試劑盒
風(fēng)疹病毒糖蛋白抗體 STYK1 EL
基(RPA1)ELISA Kit Rat replication protein A 70 kDa DNA-binding subunit,RPA1 ELISA kit
大鼠脯氨酸羥化酶(PHD)ELISA Kit Rat prolyl hydroxylases,PHD ELISA Kit
大鼠封閉蛋白4(CLDN4)ELISA Kit Rat Claudin 4,CLDN4 ELISA Kit
大鼠分泌型磷脂酶A2(sPLA2)ELISA Kit Rat secreted phospholipase A2,sPLA2 ELISA Kit
大鼠肺炎支原體(MP)抗體ELISA Kit Rat mycoplasma pneumoniae(MP)antibody ELISA kit
大鼠肺炎病毒抗體(PV-Ab)ELISA Kit Rat Pneumonia Virus Antibody,PV-Ab Elisa kit
大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白D(SP-D)ELISA Kit Rat Pulmonary Surfactant-associated protein D,SP-D ELISA kit
大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C(SP-C)ELISA Kit Rat Pulmonary Surfactant-associated protein C,SP-C ELISA kit
ISA Kit 絲氨酸/蘇氨酸/酪氨酸激酶1(STYK1)ELISA試劑盒
乳酸乳球菌PCR試劑免費(fèi)代測EFR3A蛋白抗體 ACO2 ELISA Kit 順烏頭酸酶2(ACO2)ELISA試劑盒
ENAH蛋白抗體 ACO1 ELISA Kit 順烏頭酸酶1(ACO1)ELISA試劑盒
乙基丙二酸腦病蛋白抗體 ADI1 ELISA Kit 順式還原酮加雙氧酶1(ADI1)ELISA試劑盒
轉(zhuǎn)錄因子E2F-3抗體 AQP8 ELISA Kit 水通道蛋白
Q-PCR技術(shù):
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(real-time quantitative PCR)/QRT-PCR,是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光標(biāo)記物,利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過擴(kuò)增曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。熒光定量PCR不僅實(shí)現(xiàn)真正實(shí)現(xiàn)了定量,而且具有靈敏度和特異性、高能實(shí)現(xiàn)多重反應(yīng)、自動(dòng)化程度高、無污染、實(shí)時(shí)和準(zhǔn)確等特點(diǎn)。
熒光定量PCR所使用的熒光基團(tuán)可分為兩種:熒光探針和熒光染料。
1.使用SYBR熒光染料法來進(jìn)行熒光定量PCR時(shí),我們首先在PCR反應(yīng)體系中加入過量SYBR熒光染料。SYBR熒光染料特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后發(fā)射一定量的熒光信號,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會(huì)發(fā)射熒光信號,從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步。
2.Taqman探針則是利用探針與模板的特異性結(jié)合的特點(diǎn),以及探針內(nèi)熒光報(bào)告基團(tuán)和淬滅基團(tuán)的分子特性來實(shí)現(xiàn)對PCR進(jìn)行定量檢測。這種方法可以實(shí)現(xiàn)高靈敏度,嚴(yán)格針對特定堿基序列的定量實(shí)驗(yàn)。