詳細(xì)介紹
運(yùn)輸及保存:低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期一年。使用本試劑盒提供的陽性對照時,由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。在專門的區(qū)域操作。本試劑盒不但準(zhǔn)確、快速、靈敏,還具有以下
產(chǎn)品名稱 | 巨細(xì)胞病毒進(jìn)口PCR試劑 |
英文名稱 | Cytomegalovirus(CMV)PCR |
分類 | PCR檢測試劑盒 |
特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單。
2. 預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 494 bp。
3. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
ELISA Kit Human anti-deoxyribonuclease B antibody(anti-DNase B Ab)ELISA Kit
人抗BP180抗體(anti-SA Kit Human SFRP2 ELISA Kit
人分泌型卷曲相關(guān)蛋白1(SFRP1)ELISA Kit Human SFRP1 ELISA Kit
人分泌粒蛋白1(嗜鉻粒蛋白B)(CHGB/SCG1)ELISA Kit Human CHGB/SCG1 ELISA kit
人肺炎衣原體抗原(Cpn)ELISA Kit Hu
FBLN2 ELISA Kit 腓骨蛋白2(FBLN2)ELISA試劑盒
著絲粒蛋白H抗體 Obestatin ELISA Kit 肥胖抑制素(Obestatin)ELISA試劑盒
半胱氨酸蛋白酶抑制劑6抗體 MCT ELISA Kit 肥大細(xì)胞類胰蛋白酶(MCT)ELISA試劑盒
碳酸酐酶相關(guān)蛋白/腦蛋白10抗體 CA211 ELISA Kit 非小細(xì)胞肺癌相關(guān)抗原211(CA211)ELISA試劑盒
白細(xì)胞介素-18受體α鏈抗體BAE ELISA Kit 泛素激活酶(E1/UBAE)ELISA試劑盒
2號染色體開放閱讀框60抗體 DUB ELISA Kit 泛素分解酶(DUB)ELISA試劑盒
磷酸化周期素依賴性激酶7抗體 UBD ELISA Kit 泛素蛋白D(UBD)ELISA試劑盒
磷酸化周期素依賴性激酶9抗體 Ub ELISA Kit 泛素蛋白(Ub)ELISA試劑盒
磷酸化細(xì)胞周期檢測點(diǎn)激酶1抗體 rT3 ELISA Kit 反三碘甲狀腺原氨酸(rT3)ELISA試劑盒
磷酸化細(xì)胞周期檢測點(diǎn)激酶1抗體 FDFT1 ELISA Kit 法尼基二磷酸法尼基轉(zhuǎn)移酶1(FDFT1)ELISA試劑盒
磷酸化抑癌基因p16抗體 FXR ELISA Kit
man chlamydia pneumoniae,Cpn ELISA Kit
人肺炎衣原體抗體IgM(Cpn- TP1B4 ELISA Kit
巨細(xì)胞病毒進(jìn)口PCR試劑人蛋白(肽酰脯氨酰順/反異構(gòu)酶)NIMAHuman Herpes simplex virus,HSV-Ag1 ELISA Kit
人單純皰疹病毒Ⅱ型抗體IgM(HSVⅡ-Ab)ELISA Kit Human Herpes simplexvirus Ⅱ IgM antibody,HSVⅡ-Ab ELISA Kit
人單純皰疹病毒Ⅱ型抗體IgG(HSVⅡ-Ab)
Q-PCR技術(shù):
實(shí)時熒光定量PCR(real-time quantitative PCR)/QRT-PCR,是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光標(biāo)記物,利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,后通過擴(kuò)增曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。熒光定量PCR不僅實(shí)現(xiàn)真正實(shí)現(xiàn)了定量,而且具有靈敏度和特異性、高能實(shí)現(xiàn)多重反應(yīng)、自動化程度高、無污染、實(shí)時和準(zhǔn)確等特點(diǎn)。
熒光定量PCR所使用的熒光基團(tuán)可分為兩種:熒光探針和熒光染料。
1.使用SYBR熒光染料法來進(jìn)行熒光定量PCR時,我們首先在PCR反應(yīng)體系中加入過量SYBR熒光染料。SYBR熒光染料特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后發(fā)射一定量的熒光信號,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射熒光信號,從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步。
2.Taqman探針則是利用探針與模板的特異性結(jié)合的特點(diǎn),以及探針內(nèi)熒光報(bào)告基團(tuán)和淬滅基團(tuán)的分子特性來實(shí)現(xiàn)對PCR進(jìn)行定量檢測。這種方法可以實(shí)現(xiàn)高靈敏度,嚴(yán)格針對特定堿基序列的定量實(shí)驗(yàn)。